铜绿假单胞菌外毒素A全基因的克隆与分泌性表达

利用PCR技术从铜绿假单胞菌PA103株DNA中扩增到铜绿假单胞菌外毒素A(EPA)全基因,选择合适位点插入pBV221 PLPR启动子下游,构建分泌性表达载体;转化宿主E.coliDH5α、JM109后,热诱导表达;SDS-PAGE分析表明表达产物占菌体总蛋白量的17%左右,分子量69kD左右;分离细胞组分蛋白发现仅有少量重组蛋白以成熟毒素形式分泌到宿主菌的周质间隙,并能检测到Vero细胞毒活性,其余大部分以包涵体形式存在。免疫印迹检测显示,表达产物与兔抗EPA多抗有特异性反应。此项工作为重组EPA的研制建立了有用的技术方法。

基于烟草烟雾致病研究进展刍议“烟毒”之外内因机

在过去的几十年,大量化学分析研究已经鉴定出烟草烟雾中众多化合物,且数量不断增加,截至2013年,烟草烟雾中已发现化合物达9582种,其中包含尼古丁、烟草烟雾特异性亚硝胺、苯并[α]芘等物质,以及可替宁、4-(甲基亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-1-丁醇等经体内代谢转化而成的产物,能够靶向心、肺等器官,诱发慢性阻塞性肺疾病、冠心病以及肺癌、食道癌等多种类型的癌症。中医对“毒性”的认识起源于《内经》,认为“毒邪”既可以作为外来致病因素,也可致五脏失和酿生痰瘀等病理产物蕴积成内毒。现代医学对烟草烟雾有毒物质及其代谢产物致病认识与中医“外毒”“内毒”的认识颇相一致,因此笔者从烟草烟雾有害物质及其代谢产物出发,拟深入探析其主要成分及致病机制,明确烟毒“内毒”“外毒”病因特点及病机转化特征,从而为中医探析“烟毒”致病现代化研究及烟草烟雾致病与中医理论相结合奠定理论基础。

低神经外毒力乙脑病毒M47株的分子生物学特征

目的探究低神经毒力乙脑病毒M47株的分子生物学特征,以期找出其低毒力的分子基础。方法采用RTPCR法扩增M47株病毒全长基因片段,测定其序列,并与GenBank中19株代表性乙脑病毒株全基因序列进行核苷酸和氨基酸比对分析。结果 M47株属于基因Ⅲ型,与GenBank中19株代表性乙脑病毒株核苷酸序列同源性为79.4%-99.6%,氨基酸序列同源性为91.3%-99.6%;氨基酸序列比对发现,该毒株存在一个独特的氨基酸位点改变E-29（S-R）。结论 M47株独特的氨基酸位点改变E-29（S-R）可能是导致其低神经外毒力的原因。

从“外毒伏髓”辨识艾滋病

中医学对艾滋病的研究尚属探索阶段。艾滋病病因是"外毒";病位在"髓";病机为毒、郁、瘀、虚互为因果,恶性循环。本文从"外毒伏髓"认识艾滋病的病因病机和病位,以丰富艾滋病的中医病因病机理论,启发后学。

外源自毒物质对桃实生苗生长的影响

以当年桃实生苗为试材,以10%乙醇为对照,研究外源添加不同浓度的苦杏仁苷、香草醛和苯甲酸对桃苗生长的影响。结果表明:处理液浓度为0.5 mmol·L-1时,与对照相比,苦杏仁苷处理显著提高了根系POD活性,而抑制了CAT活性和根系活力,香草醛和苯甲酸处理均无显著差异;处理液浓度为1.0mmol·L-1时,与对照相比,苦杏仁苷处理显著降低了根系SOD和CAT活性,香草醛和苯甲酸处理显著降低了根系保护酶活性、根系活力、叶片SPAD值、净光合速率和植株生物量,香草醛处理还显著降低了叶片全钾含量;处理液浓度为3.0 mmol·L-1时,与对照相比,苦杏仁苷、香草醛、苯甲酸和混合液处理都显著降低了根系保护酶活性、根系活力、叶片SPAD值、净光合速率、叶片养分含量和植株生物量。可见,当香草醛和苯甲酸浓度达到1.0 mmol·L-1、苦杏仁苷浓度达到3.0 mmol·L-1对实生桃苗生长产生抑制,且随处理浓度增大,抑制作用增强。

壮药减毒外洗剂防治男性外生殖器尖锐湿疣复发的临床观察

目的 :探讨壮药减毒外洗剂对男性外生殖器尖锐湿疣复发的防治作用。方法:将60例符合纳入标准的患者先行电离子手术治疗机去除可见疣体治疗后,随机分为2组,观察组30例术后采用壮药减毒外洗剂外洗治疗,对照组30例术后予腹股沟皮下注射干扰素、外涂重组人干扰素α-2b软膏治疗,比较两组疗效以及复发率。结果 :观察组治愈率为80.00%、复发率20.00%;对照组治愈率53.33%、复发率46.67%,两组复发率比较差异均有显著性(P<0.05)。结论 :壮药减毒外洗剂对男性外生殖器尖锐湿疣有一定的治疗作用,并可明显防止尖锐湿疣的复发。

急性中毒的体外排毒治疗进展

急性中毒的治疗进展迅速,已成为急救医学的重要课题。本文综述目前临床常用的透折、灌流及换血等体外排毒疗法的原理、指征及效益。

肉毒杆菌二元毒素和细胞外酶

对肉毒中毒和肉毒毒蛋白的研究已有近百年历史。肉毒杆菌神经毒素（BoNT）作用机制研究的进展已使它成为分析神经递质释放的胞吐分子机制和用于临床治疗的有用工具。近年发现，肉毒梭状芽孢杆菌C和D型菌株除分泌BoNT外，尚合成另外两类与BoNT结构和生物活性完全不同的蛋白质：肉毒二元毒素和肉毒细胞外酶，它们分别影响细胞骨架和细胞的生长发育；也成为分析相关生命过程的有效工具药。本文综述了这两类蛋白质的有关资料。

疣毒净外洗液对离体尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒DNA的影响

目的:观察疣毒净外洗液对离体尖锐湿疣(CA)组织中人乳头瘤病毒(HPV)DNA 的影响。方法:将10例不同浓度的 CA 组织混悬液与50%疣毒净外洗液混合作用,7天后用多聚酶链反应(PCR)方法进行 HPV-DNA 检测。结果:0.05μg/ml CA 组织混悬液与50%疣毒净外洗液作用7天后 PCR-HPV-DNA 检测全部阴性。结论:疣毒净外洗液对离体 CA 组织中的 HPV-DNA 可能有某种化学性的降解破坏作用。

李元文教授从毒论治皮肤病经验

李元文教授认为,大凡致病邪气均有化毒、产毒、聚毒、酿毒的特性,加上环境恶化,人体正气偏虚,毒邪在皮肤病的发病上已经成为主要的致病因素。皮肤病从毒论治也成为目前临床上重要的治疗法则。解毒法可以广泛应用于皮肤病的治疗。

生理动力学模型及其在健康风险评估中的应用进展和展望

基于生理的动力学(physiologically based kinetic,PBK)模型是一种用于模拟化学物质在有机体(如人类和其他动物物种)中的生物过程(吸收、分布、代谢和排泄,简称ADME)和推导体内、外剂量或靶器官剂量的工具。相较于PBK在药物研发的不同阶段的广泛应用,近几年来PBK在化学物质管理中应用的发展更为迅速。在过去十几年中,化学品安全管理领域的不同国际组织和权威机构相继发布了关于合理构建和使用PBK模型的指导文件。本文主要总结了人类/哺乳动物的PBK模型构建、化学物质健康风险评估中常用的软件和平台,以及PBK模型软件在化学物质管理中的应用和相关案例,简述了基于PBK和体外-体内外推(IVIVE)方法在下一代健康风险评估中的应用潜力,并对PBK在中国化学物质管理应用中需要解决的科学问题进行了讨论,以期为PBK在我国化学物质管理应用提供借鉴。

圆环病毒2型人工感染猪的排毒情况及体内分布规律的初步研究

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,它给养猪业带来巨大的经济损失。本研究利用PCR及荧光定量PCR检测猪人工感染猪圆环病毒2型后的排毒及体内分布规律。结果表明,感染猪可以通过呼吸道和消化道进行排毒,而且病毒持续存在;PCV2病毒主要存在于病猪的淋巴结、肾脏、肺脏中,在肝脏和脾脏中也少量存在。

托毒生肌法结合胫骨皮瓣修复小腿创伤感染性骨皮缺损166例

目的:观察托毒生肌法结合胫骨皮瓣修复小腿大面积感染性骨皮缺损的疗效。方法:采用托毒生肌外洗方(黄芪、黄连、黄岑、黄柏、乳香、没药、红花、大黄、三七、皂刺、白芷、猪苓、煅龙骨、防风等)结合皮瓣移植治疗创伤感染性骨皮缺损166例。结果:总有效率86.14%。结论:本方法对本病有益气活血,托毒生肌,敛疮愈溃,修复皮损的功效。

“百株”作为农药解毒降毒剂的研究报告

“百株”作为农药解毒降毒剂使用是起作用的。研究结果表明 ,在 1升 pH8的溶液中 ,使用 1%浓度的“百株” ,处理 30min ,可使 36mg敌百虫降解 2 4.7mg ,解毒降毒效果约达 6 0 %以上。

从获得性脑淀粉样血管病病机探讨“毒损脑络”的新内涵

获得性脑淀粉样血管病作为近年来发现的脑血管疾病,其传播途径与医源性因素相关。本文以获得性脑淀粉样血管病为研究对象,深入探讨王永炎院士提出的“毒损脑络”理论在中风病研究中的新应用及其深层含义。从“毒损脑络”的视角出发,综合分析获得性脑淀粉样血管病的发病原因及其病理机制,强调了外毒、伏毒和浊毒等在本病发病机制中的重要性,揭示了“毒损脑络”为获得性脑淀粉样血管病的核心病机,在此基础上,提出了“毒损脑络”的新内涵:一为“毒”既包括内毒也包括外毒,二为“毒损脑络”新内涵的具体延伸,指导了中风病理论研究、临床治疗、预防策略的完善,也促进对中风病的深层次理解。从“毒损脑络”认识获得性脑淀粉样血管病的方法不仅展现了中医学理论与现代生物医学的有效融合,也为临床诊治本病提供了思路与参考。

李元文教授治疗白癜风经验浅谈

白癜风的发病概为"内毒"、"外毒"。内毒实为肝气郁结甚,气郁化毒,治法为解郁化毒,调和营卫;外毒为环境中的各种污染,致病特点为本虚标实,治宜健脾补肾,解毒消斑;"内外毒"相合者,脾肾亏虚为本,肝郁血瘀为标,临证健脾、补肾之时,疏肝理气活血是关键。自拟解毒消白合剂,临证加减,达调理化毒之效。

Study on Explants Sterilization and Callus Induction of Aquilegia oxysepala

[Objective] The aim was to study the explants sterilization and callus induction of Aquilegia oxysepala.[Method] the seeds of Aquilegia oxysepala were sterilized by different kinds and concentrations of disinfectants,and the pollution rate and pollution speed were investigated so as to find the best way to build sterile seedling setup.Taking the roots,stem segments and leaves of the sterile seedlings from Aquilegia oxysepala seeds as explants,the optimum explants and medium were screened by adding MS basic medium with different hormone proportions.[Result] The best germicidal treatment was as follows：explants were soaked in 75% alcohol for 30 s firstly,washed by sterile water for 5 times,then soaked in 0.2% mercuric chloride liquid for 2 min,finally washed by sterile water for 5 times again.The sterilization treatment could get the lowest pollution rate,the highest germinating capacity and the best sterile seedling.Roots were the optimum explants for the callus induction of Aquilegia oxysepala,meanwhile the optimal medium was MS＋0.6 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L 6-BA.[Conclusion] The research provides technical support for the large scale production of Aquilegia oxysepala and also makes a contribution to the medicinal and ornamental value of Aquilegia oxysepala.

Analysis of Th1/Th2 and Tc1/Tc2 Balance from Peripheral Blood in Patients with Secondary Early Syphilis

Objective: To understand the change of Th1/Th2 and Tc1/Tc2 balance in patients with secondary early syphilis. Methods: Peripheral blood Th and Tc cell subpopu-lations were examined by three-color flow cytometry in 30 patients with secondary early syphilis and 20 healthy subjects. Results: Percentages of CD3+ CD4+ T cells and the ratio of CD4+CD8+ and NK cells in syphilitic patients were significantly lower than in the control group (P<0.001), but no statistical difference was found in percentages of CD8+ and CD19+ cells between the two groups (P > 0.05). The percentage of Th1 cells and ratios of Th1/Th2 and Tc1/Tc2 in syphilitic patients were clearly decreased as compared to those in controls (P<0.001-0.01), whereas percentages of Tc0 and Tc2 cells in syphilitics was higher than those in controls(P<0.001). Conclusion: There could be a disturbance of cellular immunity and the relatively intact function of humoral immunity in secondary syphilis. It is postulated that the polarization toward development of Th2 and Tc2 cells and their associated cytokines might be involved in the incomplete clearance of treponemes and the development of chronic infection.