金黄色葡萄球菌外毒素及中性粒细胞对视网膜色素上皮细胞损伤作用的初步研究

目的观察金黄色葡萄球菌外毒素及中性粒细胞对视网膜色素上皮（RPE）细胞的毒性作用。方法分离人外周血中性粒细胞，和人RPE细胞株D407（RPED407）共培养，并加入金黄色葡萄球菌ATCC29213外毒素建立细菌性眼内炎体外模型。通过观察RPE细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平、流式细胞仪分析RPE细胞存活状况改变、以及Hoechst 33342／Propidium Iodide（PI）染色观察细胞核的荧光染色等方法，验证金黄色葡萄球菌外毒素及中性粒细胞埘RPE细胞的损伤作用。结果金黄色葡萄球菌外毒素单独作用RPE细胞时，细胞外LDH水平及RPE细胞的坏死细胞比率随着外毒素剂量增加而升高，但仅250、500μl组差异有统计学意义。当加入中性粒细胞共同培养后，100μl外毒素作用下，仅6h，RPE细胞外LDH水平即高于无外毒素绀，差异具有统计学意义；在6h时，流式细胞仪分析湿示，RPE细胞发生了明显的细胞凋亡，并且随着中性粒细胞数量增多而加剧，差异具有统计学意义。结论金黄色葡萄球菌外毒素对RPE细胞具有毒性作用，其机制主要以细胞坏死的方式进行。中性粒细胞超过一定数量后对RPE细胞具有损伤作用。外毒素和中性粒细胞共间参与时，对RPE细胞的毒性作用大于两者单独对RPE细胞的损害。