期刊文献+
共找到18篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Bradyrhizobium japonicum基因工程菌株HN32中外源片段的来源检验 被引量:1
1
作者 沈辉 张忠明 +1 位作者 莫才清 周俊初 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期40-44,共5页
采用Southern转移,放射性同位素分子杂交等研究手段,对本课题组构建的一株高效固氮大豆根瘤菌HN32中的外源片段的来源进行了分析。研究结果证实:该外源片段确系来源于Sinorhizobium fredii B52菌株,并且在受体Bradyrhizobium japonicum... 采用Southern转移,放射性同位素分子杂交等研究手段,对本课题组构建的一株高效固氮大豆根瘤菌HN32中的外源片段的来源进行了分析。研究结果证实:该外源片段确系来源于Sinorhizobium fredii B52菌株,并且在受体Bradyrhizobium japonicum 22—10菌株中本不存在。 展开更多
关键词 基因工程菌 HN32 外源片段
下载PDF
载体与外源片段酶切和连接反应教具的制作
2
作者 杨柯金 《实验教学与仪器》 2021年第6期56-56,62,共2页
载体与外源片段具有概念抽象、不易表现的特点,成为基因工程教学中的重点和难点。为帮助学生更好地理解载体与外源片段酶切和连接这一知识点,可利用A4纸、剪刀、曲别针等材料制作载体与外源片段酶切和连接反应教具。从教学效果上看,该... 载体与外源片段具有概念抽象、不易表现的特点,成为基因工程教学中的重点和难点。为帮助学生更好地理解载体与外源片段酶切和连接这一知识点,可利用A4纸、剪刀、曲别针等材料制作载体与外源片段酶切和连接反应教具。从教学效果上看,该教具可直观展示限制性内切酶识别序列的结构特点,配合完成限制性内切酶的酶切反应及DNA连接酶的连接反应,有助于学生在动手过程中掌握相关学习要点。 展开更多
关键词 载体 外源片段 限制性内切酶 DNA连接酶 随机连接 定向连接
下载PDF
接合转移技术将外源DNA大片段引入变铅青链霉菌中的研究
3
作者 戴世鲲 周丹燕 +2 位作者 王广华 李翔 向文洲 《湖北农业科学》 2015年第15期3776-3778,3783,共4页
为了发展一种将150 kb及以上的外源DNA片段引入变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)中的有效方法,以大肠杆菌-变铅青链霉菌穿梭细菌人工染色体为载体,将携带完整格尔德霉素生物合成基因簇的3个150-180 kb的外源DNA片段期望以接合转... 为了发展一种将150 kb及以上的外源DNA片段引入变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)中的有效方法,以大肠杆菌-变铅青链霉菌穿梭细菌人工染色体为载体,将携带完整格尔德霉素生物合成基因簇的3个150-180 kb的外源DNA片段期望以接合转移的方式从大肠杆菌宿主菌(Escherichia coli ET12567/p UZ8002)中横向转移入变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)TK23菌株中。结果表明,接合转移技术能够有效地将携带完整格尔德霉素生物合成基因簇的3个外源DNA大片段引入到变铅青链霉菌基因组中并稳定传代。 展开更多
关键词 接合转移技术 外源DNA大片段 细菌人工染色体 变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)
下载PDF
外源DNA片段导入草菇原生质体的研究 被引量:10
4
作者 王春晖 喻初权 张志光 《食用菌学报》 1999年第4期1-6,共6页
以平菇DNA为供体,草菇原生质体为受体,用PEG,CaCl_2作诱导剂,将平菇DNA导入草菇原生质体,选育出V_(157-1)菌株,该菌株在菇型、温型、酶活力及生物转化率上与亲本V_(157)有显著差异。本研究为食用菌育种提供了一条新的途径。
关键词 草菇 外源DNA片段 原生质体 导入
下载PDF
重叠PCR法构建嗜酸乳杆菌分选酶A基因外源打靶片段 被引量:1
5
作者 何嘉怡 王文文 +3 位作者 吴京 潘道东 吴振 曾小群 《宁波大学学报(理工版)》 CAS 2017年第6期21-27,共7页
为比较单步法、分步法重叠PCR在构建嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus ATCC4356分选酶A(SrtA)外源打靶片段的差异性,设计了5对具有20~25 bp互补末端的引物,分别扩增两对上下游同源臂和卡那霉素基因,先采用分步法、单步法重叠PCR构... 为比较单步法、分步法重叠PCR在构建嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus ATCC4356分选酶A(SrtA)外源打靶片段的差异性,设计了5对具有20~25 bp互补末端的引物,分别扩增两对上下游同源臂和卡那霉素基因,先采用分步法、单步法重叠PCR构建不含筛选基因的外源打靶片段SrtA-up2-SrtA-down2,比较两者优劣,随后取较优者构建含抗生素筛选基因的打靶片段SrtA-up1-Kan-SrtA-down1.结果显示单步法优于分步法,非特异性扩增少,拖尾现象少,且扩增打靶片段SrtA-up1-Kan-SrtA-down1条带单一,无非特异性扩增.即在构建两种外源打靶片段时,单步法重叠PCR优于分步法PCR,为之后构建嗜酸乳杆菌基因打靶载体、构建融合基因打下了基础. 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 外源打靶片段 单步法重叠PCR 分步法重叠PCR
下载PDF
HBV病毒样核心颗粒应用研究进展 被引量:1
6
作者 李纬东 梁布锋 《中国预防医学杂志》 CAS 2002年第2期151-153,共3页
病毒样颗粒(virus like particles,VLPs)是一种模拟病毒的颗粒形态特点,将外源基因片断产物呈递到病毒颗粒表面而形成的嵌合颗粒。它有与病毒颗粒相同的外部形态,甚至还有某些病毒受体的天然配体,同时还可将其他病原的特异性抗原等呈递... 病毒样颗粒(virus like particles,VLPs)是一种模拟病毒的颗粒形态特点,将外源基因片断产物呈递到病毒颗粒表面而形成的嵌合颗粒。它有与病毒颗粒相同的外部形态,甚至还有某些病毒受体的天然配体,同时还可将其他病原的特异性抗原等呈递在自己的表面,因而在病原体的疫苗研究和基因治疗研究中发挥着重要的作用。目前研究得较多的病毒样颗粒有HIV gag颗粒、HBc颗粒、HBs颗粒、酵母Ty颗粒等等,其中HBc VLP较受人注目。 HBc有自动组装的特性,其形成的核心颗粒有显著刺激B细胞、T辅助细胞及细胞毒T细胞产生免疫反应的能力,而且HBc颗粒在人体内没有细胞毒性作用,再加上HBc容许插入外源片段并可保持或增强外源蛋白的免疫活性,基因表达的杂合蛋白在多种表达体系中都具备颗粒形成能力,且形成的颗粒易于纯化制备。以HBc为载体的疫苗生产研究、基因治疗方法研究在国外日益受到重视。现将有关这方面的研究进展简述如下。 展开更多
关键词 VLPS 乙型肝炎病毒 外源片段 HBV 病毒样核心颗粒
下载PDF
一个花粉辐射诱导的小麦-簇毛麦相互易位染色体系的分子细胞遗传学研究 被引量:6
7
作者 别同德 汪乐 +5 位作者 何华纲 亓增军 冯高 陈全战 李海凤 陈佩度 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1432-1438,共7页
利用60Coγ--射线处理小麦-簇毛麦6V单体添加系花粉,并给中国春授粉,在一个M1单株减数分裂中期Ⅰ检测到一个由2条小麦-簇毛麦易位染色体和一条完整小麦染色体构成的三价体,说明参与易位的2个小麦片段均来自同一条小麦染色体,推测两条易... 利用60Coγ--射线处理小麦-簇毛麦6V单体添加系花粉,并给中国春授粉,在一个M1单株减数分裂中期Ⅰ检测到一个由2条小麦-簇毛麦易位染色体和一条完整小麦染色体构成的三价体,说明参与易位的2个小麦片段均来自同一条小麦染色体,推测两条易位染色体由相互易位产生。将其中涉及外源大片段的易位染色体称为外源大片段易位(largealien segment translocation,LAST),涉及外源小片段的称为外源小片段易位(small alien segment translocation,SAST)。对后代中两个易位染色体均纯合的植株(LAST″+SAST″,2n=44)进行顺次C-分带和GISH研究,结果表明外源大片段易位染色体为T7BS-6VS.6VL,外源小片段易位染色体为T6VS-7BS.7BL,易位断点分别位于7B染色体短臂约FL0.60处及6V染色体短臂约FL0.70处。在M2代群体中检测到7种染色体组成类型,比例为3(LAST″+SAST″)∶20(LAST′+SAST′)∶2(LAST″+SAST′)∶1(LAST′+SAST″)∶1LAST′∶2SAST′∶22(0型),其中外源大片段和外源小片段易位染色体往往相伴出现。抗病鉴定结果显示抗白粉病基因位于外源大片段易位染色体T7BS-6VS.6VL上。对LAST′+SAST′型(2n=43)M2代单株花粉母细胞减数分裂的GISH研究结果显示,88.5%的后期Ⅰ或末期Ⅰ细胞中出现T6VS-7BS.7BL和T7BS-6VS.6VL的共分离。此外,在个别后期Ⅰ细胞中观察到外源大片段易位染色体T7BS-6VS.6VL发生落后和着丝粒断裂现象,并在LAST′型单株(2n=42)的自交后代中筛选到一个通过着丝粒断裂-融合产生的外源小片段插入易位T7BL.6VS-7BS,这为利用外源大片段易位进一步创制携带抗病基因的小片段插入易位提供了新的思路。还分别获得了T7BS-6VS.6VL和T6VS-7BS.7BL的纯合易位系。 展开更多
关键词 普通小麦 簇毛麦 6V 相互易位 外源片段易位 外源片段易位 片段插入易位 白粉病抗性
下载PDF
玉米×二倍体多年生类玉米后代的GISH分析 被引量:4
8
作者 魏文辉 覃瑞 +2 位作者 宋运淳 郭乐群 谷明光 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 2000年第6期745-750,共6页
通过对玉米自交系旅 9与二倍体多年生类玉米 ( Zea diploperennis,DP)远缘杂交 ,其杂种与玉米回交 ,回交一代 ( BC1 )孤雌生殖 ,获得了具有 DP性状的两个稳定株系 a2 - 1和 a2 - 6 .对其中的外源渗入片段进行了荧光原位杂交物理定位 ,... 通过对玉米自交系旅 9与二倍体多年生类玉米 ( Zea diploperennis,DP)远缘杂交 ,其杂种与玉米回交 ,回交一代 ( BC1 )孤雌生殖 ,获得了具有 DP性状的两个稳定株系 a2 - 1和 a2 - 6 .对其中的外源渗入片段进行了荧光原位杂交物理定位 ,确定了 a2 - 1中外源渗入片段在第 1染色体长臂近末端 ,第 2 ,8染色体长臂中部 ,以及第 6染色体短臂中部 .a2 - 6中外源渗入片段在第 1染色体长臂近末端 ,第 2 ,8染色体长臂中部 .对两株系中渗入片段在染色体上的物理位置的特点 ,位置与抗病性之间的关系 。 展开更多
关键词 二倍体多年生类玉米 外源渗入片段 抗病基因 基因组原位杂交
下载PDF
CRISPR系统结构与功能研究进展 被引量:3
9
作者 蒋伟 黎满香 +1 位作者 田世成 颜运秋 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第10期82-86,共5页
自然界中的微生物总是通过各种各样的保护机制,使它们能够与恶劣的环境及侵袭性核酸共存。许多微生物都能通过基于基因序列特异性的方式抵抗核酸入侵。CRISPR(clustered regularly inter-spaced short palindromic repeats)即是属于这... 自然界中的微生物总是通过各种各样的保护机制,使它们能够与恶劣的环境及侵袭性核酸共存。许多微生物都能通过基于基因序列特异性的方式抵抗核酸入侵。CRISPR(clustered regularly inter-spaced short palindromic repeats)即是属于这种保护机制之一。该位点是由独特的DNA间区间隔开的短的重复序列组成,并与一些被称为CRISPR相关蛋白(CRISPR association protein)的蛋白质共同作用,形成一套完整的自我保护机制。这种高变位点能从外源片段中摄取约36bp的短片段,从而建立可遗传的、DNA介导的"特异性免疫保护机制"。 展开更多
关键词 CRISPR位点 噬菌体 质粒 外源基因片段
下载PDF
远缘杂交早代稳定小麦导入了外源DNA片段并发生了DNA重排 被引量:7
10
作者 张连全 刘登才 +1 位作者 颜泽洪 郑有良 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第4期318-325,共8页
在植物界,多倍体植物非常普遍.具有A,B,D三个部分同源染色体组的普通小麦是异源多倍体物种的一个典型代表.近几年,模拟普通小麦的起源过程进行的研究表明,从四倍体小麦注入节节麦整个基因组形成异源六倍体小麦的早期阶段,DNA序列和基因... 在植物界,多倍体植物非常普遍.具有A,B,D三个部分同源染色体组的普通小麦是异源多倍体物种的一个典型代表.近几年,模拟普通小麦的起源过程进行的研究表明,从四倍体小麦注入节节麦整个基因组形成异源六倍体小麦的早期阶段,DNA序列和基因表达发生了可能有利于遗传“二倍化”的变化.利用普通小麦-黑麦远缘杂交自然结实的早代稳定特异小麦99L2研究发现:(ⅰ)99L2至少导入了两个黑麦染色体上的DNA片段,表明可能存在不同于传统的小麦-外源染色体配对重组的外源DNA导入机制;(ⅱ)99L2自身的DNA序列发生了变化,表明外源DNA部分片段注入小麦染色体组过程中,也可能导致小麦自身DNA序列发生变化. 展开更多
关键词 小麦 黑麦 远缘杂交 早代稳定 基因组进化 外源DNA片段 外源DNA导入 普通小麦 DNA重排 早代
原文传递
Using Subtracted AFLP to Efficiently Mark an Alien Chromosome Fragment in Wheat Background 被引量:7
11
作者 柴建芳 吴志明 +2 位作者 赵和 Andre LAROCHE 王海波 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第4期379-383,共5页
为解决AFLP中样品间共同片段对多态性片段识别的干扰 ,作者建立了一种“减法AFLP”标记技术 ,并运用这种技术成功对小麦中的外源染色体片段进行了标记。运用该技术 ,样品间的共同扩增片段显著减少 ,在非变性聚丙稀酰胺凝胶上带型差异十... 为解决AFLP中样品间共同片段对多态性片段识别的干扰 ,作者建立了一种“减法AFLP”标记技术 ,并运用这种技术成功对小麦中的外源染色体片段进行了标记。运用该技术 ,样品间的共同扩增片段显著减少 ,在非变性聚丙稀酰胺凝胶上带型差异十分明显 ,多态性片段很容易分辨。其真实性通过将其中两条成功转换成外源染色体片段特异的SCAR标记得到了验证。减法AFLP标记技术的建立为标记作物中的外源染色体片段提供了一种有效手段。 展开更多
关键词 subtracted AFLP subtractive hybridization AFLP alien chromosome fragment WHEAT
下载PDF
胡萝卜遗传转化体系的建立 被引量:3
12
作者 郭蓉 张金文 +2 位作者 刘玲 李兴涛 杨慧 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期535-539,共5页
以新黑田五寸胡萝卜下胚轴为外植体,研究对胡萝卜抗性植株的影响因素及目的基因的整合情况,建立了较为完善的转化体系。实验结果表明:以胡萝卜下胚轴为材料,用苗龄7d,共培养2d,浸染15min的体系,Kan抗性芽的分化频率可达52%。获得抗性愈... 以新黑田五寸胡萝卜下胚轴为外植体,研究对胡萝卜抗性植株的影响因素及目的基因的整合情况,建立了较为完善的转化体系。实验结果表明:以胡萝卜下胚轴为材料,用苗龄7d,共培养2d,浸染15min的体系,Kan抗性芽的分化频率可达52%。获得抗性愈伤培养基:B5+0.1mg/L2,4-D+0.2mg/LKT+75mg/LKan+500mg/LCef,抗性芽诱导培养基:B5+100mg/LKan+500mg/LCef;抗性植株生根培养基:B5+0.1mg/LIBA+75mg/LKan+300mg/L:Cef;对转基因植株进行了PCR分子学检测,初步证明外源基因已整合到胡萝卜基因组中。 展开更多
关键词 胡萝卜 遗传转化体系 外源基因片段
下载PDF
转基因植物中载体骨架序列的安全性隐患及解决方案 被引量:4
13
作者 王利华 苏乔 包永明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第5期38-42,共5页
载体骨架序列等非目的基因外源DNA片段整合入植物染色体中有可能引发的安全性问题已成为近年来植物基因工程研究的热点之一。总结了载体骨架序列整合进植物染色体的现象、由此引发的安全性隐患和机理 ,以及解决该问题的研究思路和方法 。
关键词 转基因植物 安全性 载体骨架序列 植物基因工程 外源DNA片段
下载PDF
基于改进的多色荧光原位杂交技术的染色体分析 被引量:2
14
作者 孔令娜 冯祎高 +4 位作者 孙冰晓 张慧 刘晓雪 陈颖 张瑞奇 《中国农学通报》 2020年第12期97-103,共7页
为了提高多色荧光原位杂交(M-FISH)技术的鉴定效率,简化M-FISH操作程序,探索和建立新的M-FISH实验及观察体系,本研究以‘荆辉1号’(普通小麦辉县红-荆州黑麦双二倍体)、‘南农9918’(普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6AL)、‘扬麦22’(... 为了提高多色荧光原位杂交(M-FISH)技术的鉴定效率,简化M-FISH操作程序,探索和建立新的M-FISH实验及观察体系,本研究以‘荆辉1号’(普通小麦辉县红-荆州黑麦双二倍体)、‘南农9918’(普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6AL)、‘扬麦22’(普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6DL)以及‘ST5V#4S-1’(普通小麦-簇毛麦小片段易位系)等为试验材料,以2个寡核苷酸探针[(GAA)10、pAs1-1]和物种基因组DNA探针作混合探针进行M-FISH分析。结果表明在一次原位杂交中同时使用3种探针,既可以识别出小麦背景中所有的外源染色体或染色体片段,又可以根据(GAA)10和pAs1-1在染色体上的杂交信号分布精确鉴定出小麦和外源染色体(片段)的具体身份。这种改进的M-FISH技术可有效用于小麦及其近缘植物染色体的鉴定,并有助于快速构建物种基于FISH的分子核型。 展开更多
关键词 多色荧光原位杂交 混合探针 普通小麦 近缘植物 外源染色体(片段)
下载PDF
转基因大穗小麦与受体小麦差异基因的初步研究 被引量:1
15
作者 李静 李艳红 +2 位作者 陆雪莹 张志强 吴思雅 《广东蚕业》 2021年第7期13-16,共4页
文章以转基因大穗小麦和春麦761幼苗叶片为实验材料,采用化学发光生物素探针标记Southern杂交法检测转基因大穗小麦中的特异性外源DNA片段,为进一步研究分析转基因大穗小麦中该特异性外源DNA片段奠定基础。结果表明,大赖草生物素标记探... 文章以转基因大穗小麦和春麦761幼苗叶片为实验材料,采用化学发光生物素探针标记Southern杂交法检测转基因大穗小麦中的特异性外源DNA片段,为进一步研究分析转基因大穗小麦中该特异性外源DNA片段奠定基础。结果表明,大赖草生物素标记探针与转基因大穗小麦酶切总DNA杂交有一条特异性杂交条带,片段长度约为750 bp~1000 bp,与春麦761酶切总DNA杂交后为空白,推测特异性条带所显示的外源性DNA片段来自大赖草总DNA。 展开更多
关键词 转基因大穗小麦 外源DNA片段 生物素标记探针 SOUTHERN杂交
下载PDF
利用SSR标记检测渗入普通小麦的冰草遗传物质 被引量:1
16
作者 吴昆仑 《青海大学学报(自然科学版)》 2007年第6期49-51,54,共4页
以日本普通小麦品种Fukuhokomugi为母本,以冰草(Agropyron cristatumL.)为父本远缘杂交的后代再与其他普通小麦品种(系)杂交选育出8个遗传背景较复杂的小麦-冰草衍生种质材料。选取332对可扩增出冰草Z559特征带型的SSR引物,以8个小麦-... 以日本普通小麦品种Fukuhokomugi为母本,以冰草(Agropyron cristatumL.)为父本远缘杂交的后代再与其他普通小麦品种(系)杂交选育出8个遗传背景较复杂的小麦-冰草衍生种质材料。选取332对可扩增出冰草Z559特征带型的SSR引物,以8个小麦-冰草衍生材料及其所有亲本为模板进行PCR扩增。结果发现,13对SSR引物可分别在参试的所有8个小麦-冰草衍生材料中扩增出冰草Z559的特异PCR产物,说明在这些材料中都含有冰草的外源染色体片段,即四倍体冰草Z559的遗传物质已经转移到了普通小麦的遗传背景中。 展开更多
关键词 普通小麦 冰草 SSR标记 外源染色体片段
下载PDF
生物固氮
17
作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第5期81-81,共1页
961871 紫云英根瘤菌5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒外源片段的酶切图谱[中]/农广…//武汉大学学报.~1995,41(4).-469~474 对来源于紫云英根癌茵7653R总DNA基因文库的5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒pNR102,pNR103,pNR108,pNR... 961871 紫云英根瘤菌5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒外源片段的酶切图谱[中]/农广…//武汉大学学报.~1995,41(4).-469~474 对来源于紫云英根癌茵7653R总DNA基因文库的5个互补结瘤菌株所分离到的重组质粒pNR102,pNR103,pNR108,pNR203和pNR213, 展开更多
关键词 重组质粒 紫云英根瘤菌 酶切图谱 外源片段 基因文库 武汉大学学报 总DNA 生物固氮 菌株 酶切分析
下载PDF
葡萄基因编辑的魔法“剪刀”——CRISPR/Cas9 被引量:2
18
作者 段伟 《生命世界》 2018年第4期24-25,共2页
基因编辑是近年来发展起来的对基因组进行精确修饰的一种技术,可实现特定DNA碱基或片段的敲除、外源DNA片段的敲入等,是农作物基因功能研究和遗传改良的重要辅助工具。它就像一把神奇的剪刀,可以根据育种需求精确地“裁剪”或“缝制”... 基因编辑是近年来发展起来的对基因组进行精确修饰的一种技术,可实现特定DNA碱基或片段的敲除、外源DNA片段的敲入等,是农作物基因功能研究和遗传改良的重要辅助工具。它就像一把神奇的剪刀,可以根据育种需求精确地“裁剪”或“缝制”控制性状的基因。目前,这把魔力“剪刀”主要有3种“剪法”技术:锌指核酸酶(zinc-finger nuclease,ZFN)、转录激活子样效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nucleases, 展开更多
关键词 基因组 剪刀 编辑 外源DNA片段 魔法 葡萄 辅助工具 遗传改良
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部