外源神经酰胺处理对青椒果实抗冷性的影响

为研究外源物质处理对青椒果实抗冷性的影响,本试验采用不同浓度的外源神经酰胺(0、200、400μmol/L)处理青椒果实,测定贮藏期间青椒果实冷害指数、相对电导率、MDA、叶绿素、Vc、可溶性蛋白含量、POD、CAT和APX等生理指标,探究外源神经酰胺处理对青椒果实抗冷性的影响。结果表明:在4℃贮藏条件下,外源神经酰胺处理可有效抑制青椒果实冷害的发生。200和400μmol/L外源神经酰胺处理均有效抑制了青椒果实冷害指数的升高,延缓了相对电导率增加,抑制了青椒果实MDA含量的积累,维持了细胞膜的完整性;同时外源神经酰胺处理延缓了青椒果实叶绿素、Vc和可容性蛋白的降解,增强了POD、CAT和APX活性,增强了青椒果实的抗冷性,其中以400μmol/L外源神经酰胺处理的青椒果实抗冷性最好。

1Hz低频重复经颅磁刺激联合外源性神经生长因子对脑卒中后肢体运动功能障碍的影响

目的 探讨1Hz低频重复经颅磁刺激(rTMS)联合外源性神经生长因子(NGF)对脑卒中后肢体运动功能障碍的影响。方法 将128例脑卒中后肢体功能障碍患者随机分为对照组和联合组,每组64例。所有患者均接受外源性NGF治疗,在此基础上联合组给予健侧皮层1Hz低频rTMS,对照组给予假刺激。对比分析两组运动诱发电位潜伏期(MEP-CL)、中枢运动传导时间(CMCT)、上下肢改良Ashworth痉挛评定量表(MAS)分级、上下肢Fugl-Meyer (FMA)评分、功能独立性量表(FIM)评分、Berg平衡量表评分的差异。结果 治疗后,两组MEP-CL及CMCT均缩短(P <0.05),但联合组变化程度优于对照组(P<0.05)。治疗后两组上下肢MAS分级均有改善,且联合组改善程度优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组上下肢FMA、FIM及Berg评分均有提高,但联合组上升更多(P<0.05)。结论 1Hz低频rTMS联合外源性NGF治疗脑卒中后肢体功能障碍的疗效优于NGF单用,表现在提高皮质兴奋性以及改善肢体痉挛症状、运动功能、功能独立性、平衡能力等方面。

外源性神经生长因子在脑血肿灶周围组织中的表达及对神经功能恢复的影响

目的:观察外源性神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)在血肿灶周组织中的表达及其对神经功能恢复的影响,为脑出血基因治疗提供理论依据。方法:健康家犬24只,随机分为3组:NGF组12只:注血后0.5h,将NGF2000AU立体定向导入血肿灶周区;脑出血组8只:只注血,不注药;对照组4只:除麻醉外,不注血和注药。在脑出血后1,3,10,28d四个时间点进行以下检测:①Purdy评分:观察临床神经功能恢复情况。②NGF检测:采用免疫组化SP法。以细胞胞浆呈棕黄色着色为阳性细胞,检测外源性NGF在血肿灶周脑组织中的有效表达。结果:①Purdy评分:NGF组1,3d评分与脑出血组比较差异无显著性意义(P>0.05),但10,28d评分犤(2.84±1.53)分,(2.15±1.13)分犦显著好于脑出血组犤(3.74±1.08)分,(3.32±1.46)分犦(P<0.05)。②NGF在血肿灶周组织中的表达:NGF组血肿灶周免疫阳性细胞3d时大量出现,染色较深。持续10d,而脑出血组表达量少且持续时间短(P<0.05)。结论:外源性NGF立体定向导入血肿灶周区,能够在血肿灶周组织中有效表达,且能明显促进脑出血后神经功能的恢复。

外源性神经生长因子治疗脑梗死的临床观察

目的对不同病程阶段的脑梗死患者使用外源性神经生长因子,通过疗效观察来推测外源性神经营养因子治疗脑梗死最佳时机。方法采用随机分组法,对不同时期脑梗死患者使用外源性神经生长因子,观察疗效。结果急性期使用外源性神经生长因子的脑梗死患者,其神经功能缺损平均减少分数明显高于恢复期使用的患者(P<0.05)。结论外源性神经生长因子有对脑梗死患者急性期病情改善及促进其神经功能缺损恢复的作用,将为缺血性脑血管病提供新的治疗策略。

外源性神经节苷脂对神经干细胞增殖分化的作用

目的:探讨外源性神经节苷脂(GM1)对从大鼠分离培养的神经干细胞(NSCs)增殖及分化的作用。方法:①利用无血清培养技术从胎鼠大脑皮质和海马分离培养原代细胞,加血清诱导其分化。②在NSCs培养基和DMEM/F12培养基中加入不同浓度的GM1,观察GM1对NSCs增殖和分化的作用。结果:①与不含GM1的NSCs培养基相比,在NSCs培养基中加入低浓度的GM1,NSCs的生长无明显改变,随着GM1浓度的增加,NSCs克隆球体积逐渐减小,细胞逐渐死亡;②在DMEM/F12培养基中单独加GM1而不加血清,NSCs克隆球均未见继续生长,也未见分化,而是迅速的死亡。结论:①在NSCs培养基中,低浓度(12.5μg/ml)GM1对NSCs的增殖无明显影响,但较高浓度的GM1对NSCs的增殖有抑制作用。②DMEM/F12培养基中单独加GM1,而不加血清和其他生长因子,既不能诱导NSCs分化,也不利于NSCs的继续生长。

外源性神经生长因子对三叉神经感觉神经细胞凋亡的影响

目的 探讨三叉神经下颌支损伤后外源性神经生长因子 (NGF)对感觉神经元细胞凋亡及神经电生理的影响。方法 制作大鼠三叉神经下颌支离断硅胶管桥接动物模型 ,采用TUNEL法观察NGF局部应用三叉神经感觉核区神经元细胞凋亡的变化 ;采用肌电位仪观察三叉神经感觉核区感觉神经元电生理 (动作电位潜伏期Lat,波幅Amp ,传导速度CV)的变化。结果 外源性NGF治疗组三叉神经感觉核神经元细胞的凋亡数量明显少于单纯桥接吻合对照组。术后 30d ,NGF治疗组与单纯桥接吻合对照组相比 ,感觉神经元动作电位潜伏期短、波幅度、传导速度快。结论 外源性NGF在损伤局部应用 ,可在一定程度上抑制神经元细胞凋亡 ,促进神经电生理的恢复 ,从而对三叉神经损伤后神经的修复具有一定的促进作用。

外源性脑源性神经营养因子通过抑制tau蛋白磷酸化减少细胞凋亡

目的观察外源性脑源性神经营养因子(BDNF)对tau蛋白过磷酸化及神经元凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法将培养的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)分为正常对照组;冈田酸(OA)组:浓度为40 nmol/L的OA处理24 h;BDNF组:OA处理24 h后加入浓度为50 ng/mL的BDNF处理15 min;LY294002组:OA处理24 h后加入BDNF(50 ng/mL)及LY294002(40 nmol/L)共同处理15 min;K252a组:OA处理24 h后加入BDNF(50 ng/mL)及K252a(40 nmol/L)共同处理15 min。通过MTT检测细胞存活率、流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western blot检测Ser199/202、pSer199/202及bcl-2表达。结果 MTT实验显示OA组、LY294002组及K252a组细胞存活率较正常对照组及BDNF组明显减低(P<0.01);BDNF组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。流式细胞仪检测显示OA组、LY294002组及K252a组细胞凋亡率较正常对照组及BDNF组明显增加(P<0.01);BDNF组与正常对照组之间无统计学差异(P>0.05)。Western blot显示OA组、LY294002组及K252a组pSer199/202表达较正常对照组及BDNF组明显增多(P<0.01),Ser199/202及bcl-2表达较对照组及BDNF组明显减少(P<0.01),BDNF组与正常对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论外源性BDNF可通过抑制tau蛋白磷酸化减少细胞凋亡。

外源性神经生长因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨外源性神经生长因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立结扎颈总动脉的大鼠视网膜缺血再灌注模型。分缺血再灌注组、缺血再灌注+外源性神经生长因子组。每组按再灌注时间的不同分为缺血再灌注1、6、12、24、48、72h 组。同时记录各期大鼠视网膜电图(electroretinogram,ERG)a、b波波幅,通过透射电镜观察各期视网膜的超微结构。结果缺血再灌注+外源性神经生长因子组各时期 ERGa、b 波波幅高于缺血再灌注组。视网膜超微结构显示缺血再灌注+外源性神经生长因子组细胞受损情况明显好于缺血冉灌注组。结论外源性神经生长因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤具有保护作用。

外源性脑源性神经营养因子对Alzheimer大鼠行为学的影响及其作用机制

目的观察外源性脑源性神经营养因子(BDNF)对Alzheimer大鼠脑内突触素表达的影响及对大鼠行为学的作用,探讨其可能的作用机制。方法健康成年雄性Wistar大鼠60只,随机平均分为正常对照组、假手术组、冈田酸(OA)组、BDNF组、K252a组和LY294002组。按照大鼠脑立体定位图谱定位,于海马CA3区注射点,在每侧海马假手术组大鼠注射2μL生理盐水,OA组注射2μL OA(0.2μmol/L),BDNF组注射2μL OA+2μL BDNF(50 ng/mL),K252a组注射2μL OA+2μL BDNF+2μL K252a(4μmol/L),LY294002组注射2μL OA+2μL BDNF+2μL LY294002(4μmol/L)。通过水迷宫试验检测大鼠行为学改变,通过Western blot检测大鼠脑内突触素、pThr231的表达。结果定向航行实验显示,OA组及K252a组大鼠逃避潜伏期较正常对照组、假手术组、LY294002组及BDNF组明显延长(P<0.01),BDNF组及LY294002组大鼠逃避潜伏期较正常对照组及假手术组也明显延长(P<0.01),正常对照组与假手术组比较无统计学差异(P>0.05)。空间探索实验结果显示,OA组及K252a组大鼠跨越平台次数较正常对照组、假手术组、LY294002组及BDNF组明显减少(P<0.01)。Western blot结果表明,OA组、LY294002组、K252a组pThr231表达较正常对照组及BDNF组明显增多(P<0.01),BDNF组与正常对照组比较无统计学差异(P>0.05);OA组和K252a组突触素表达较正常对照组、BDNF组及LY294002组明显减少(P<0.01)。结论 OA海马内注射可引起tau蛋白过磷酸化,从而导致突触结构功能障碍,引起大鼠空间认知障碍。外源性BDNF可通过激活TrkB受体补充缺乏的神经营养因子,减少tau过磷酸化,增加突触可塑性,促进突触形成,改善认知功能障碍。

外源性神经生长因子早期干预对减轻重度窒息新生儿脑损伤程度的临床研究

目的:探究重度窒息新生儿采用外源性神经生长因子早期干预对其脑损伤程度的影响。方法:选取56例重度窒息新生儿,随机分为2组,对照组采用脑蛋白水解物与胞二磷胆碱治疗,观察组在对照组前提下及早采用外源性神经生长因子治疗。并对两组重度缺氧缺血性脑病(HIE)发生率、临床结果、行为神经评分、血清髓鞘碱性蛋白(MBP)与酸性钙结合蛋白S-100水平进行对比。结果:两组治疗后HIE临床分度与临床结果的对比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组7~8 d、14~16 d行为神经评分不足35分明显低于对照组,超过35分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前MBP与S-100水平的对比,差异无统计学意义(P>0.05);生后7~8 d,两组MBP与S-100水平均有一定下降,且观察组的下降幅度明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重度窒息新生儿采用外源性神经生长因子早期干预,可使新生儿脑损伤程度明显明显减轻。

静脉给予外源性神经干细胞聚集在APP小鼠脑内老年斑周围

目的研究静脉给予的外源性神经干细胞在淀粉样前体蛋白(APP)小鼠脑内的分布及可能起到的作用。方法采用14d小鼠胚胎的神经干细胞,经体外扩增、分化后,静脉注射到阿尔茨海默病动物模型——APP转基因小鼠体内,1周后通过磁共振成像(MRI)及激光共聚焦显微镜观察APP小鼠脑内外源性移植神经干细胞的分布。结果外源性标记的神经干细胞可通过血-脑屏障进入APP小鼠脑内,聚集在β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积周围,部分外源性细胞内出现Aβ信号。结论外源性神经干细胞可能在病变区神经元修复或Aβ清除方面起到一定的作用。

外源性神经节苷脂相关性吉兰—巴雷综合征的发病机制及诊治研究进展

吉兰―巴雷综合征(GBS)是一种以快速进行性四肢麻木无力为特点的急性炎性脱髓鞘性多发性多神经根神经病。随着外源性神经节苷脂在临床的广泛应用,该药引起的副作用也逐渐显现,外源性神经节苷脂相关性GBS是其最严重的并发症,临床上主要表现为轴索型GBS,以四肢弛缓性瘫痪为首发症状,表现为急性、严重且快速进展的周围神经受累,较其他轴索型GBS病情重,恢复时间长,预后差。目前发病机制尚不明确。静脉注射人免疫球蛋白是其具有循证医学证据的治疗方法,目前已取代血浆置换成为GBS首选治疗方法,推荐剂量为0.4 g/(kg·d),连续静滴5 d,大剂量激素治疗的效果还有待进一步探讨。早发现、早诊断、尽早停用外源性神经节苷脂、及时应用人血免疫球蛋白冲击治疗和康复治疗,可改善预后。

外源性NGF对坐骨神经损伤后脊髓前角细胞CNTF表达的影响

目的 探讨坐骨神经损伤后脊髓前角细胞睫状神经营养因子 (CNTF)表达变化及外源性神经生长因子(NGF)与CNTF表达的关系。方法 采用大鼠坐骨神经损伤动物模型 ,分为给药组和对照组 ,每只大鼠又分为损伤侧组 (L组 )和健侧组 (R组 )两个亚组。用原位杂交、免疫组化技术检测CNTF的表达水平 ,观察各组在 1d、7d、1 4d、2 1d及 2 8d时的变化。用计算机图像自动处理系统进行定量分析研究。结果 给药组损伤侧脊髓前角细胞中CNTF表达水平除 1d、7d组外其余均多于对照组 (P <0 .0 5 ) ;而两组健侧脊髓前角细胞中CNTF表达水平无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 ①外源性NGF能促进坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中CNTF表达水平的增加 ;而对健侧CNTF表达水平无明显作用。②坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中CNTF表达水平在最初的 3周内逐渐下降 ,然后开始恢复 ,但至第 4周尚未恢复到开始时的水平 ;而两组健侧CNTF表达水平则无明显差异 (P >0 .0 5 )。

外源性神经生长因子对背根神经节中TrKA及其mRNA表达的影响

目的探讨靶肌肉注射外源性神经生长因子对背根神经节中TrKA及TrNA表达的作用.方法 大鼠坐骨神经损伤后采用硅管桥接,在靶肌肉内注射外源性NGF200μ/天,术后 3、7、14及28天进行背根神经节中TrKA的免疫组织化学检查,术后7天组进行TrKA mRNA原位杂交检查.对照组采用相同的动物模型,以生理盐水进行靶肌肉注射.结果 应用NGF靶肌肉注射后,背根神经节中TrKA的表达明显增加,与对照组相比具有显著性差异(P<0.01).结论 靶肌肉注射NGF能逆转神经损伤所造成的TrKA表达下调,表明靶肌肉注射可作为NGF的有效给药途径.

外源性去除神经对结肠炎大鼠的治疗作用及可能作用机制

目的 探讨外源性去除神经对结肠炎大鼠的治疗作用及可能作用机制。方法 选取32只大鼠随机分为正常组、结肠炎组、去神经组、去神经+结肠炎组,每组8只。给予结肠炎组、去神经+结肠炎组大鼠饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液以建立结肠炎模型,其他两组大鼠正常饮水。建模1周后,外源性去除去神经组和去神经+结肠炎组大鼠部分支配结肠的神经,其他两组不做处理。术后14 d,取各组大鼠结肠组织,行HE染色观察病理学变化,检测分泌型免疫球蛋白A(SIgA)表达水平;取各组大鼠外周血,检测白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平,以及巨噬细胞M1/M2比值。结果 与正常组相比,结肠炎组大鼠的结肠腺体被破坏,可见大量炎性细胞浸润;而与结肠炎组相比,去神经+结肠炎组大鼠结肠组织可见少量炎性细胞浸润,腺体结构较为规则。与正常组相比,结肠炎组和去神经组大鼠结肠组织的SIgA表达水平降低,血清IL-1β和IL-18水平、外周血M1/M2比值均增加(均P<0.05);而与结肠炎组相比,去神经+结肠炎大鼠结肠组织的SIgA表达水平升高,血清IL-1β和IL-18水平、外周血M1/M2比值降低(均P<0.05)。结论 外源性去除神经可能通过上调保护性SIgA表达、抑制机体的免疫炎症反应,发挥治疗结肠炎的作用。在明确诊断和掌握适应证的基础上,去神经可能是治疗结肠炎的潜在方法。

补阳还五汤促进神经干细胞治疗脑缺血损伤的研究进展

补阳还五汤是具有补气活血通络功效的名方,对缺血性脑损伤后中风后遗症的好转和致残率的减少有着重要的作用。而近年,由于成功地在体外培养了神经干细胞,致使治疗脑损伤应用神经干细胞移植术成为可能。神经干细胞的移植可整合宿主细胞、取代受损细胞、重建神经环路,产生营养因子使休眠的受体细胞发挥代偿,并且移植的神经干细胞可以透过血脑屏障分化成与宿主细胞相同的细胞整合到原神经网中。当前神经干细胞移植作为基因治疗技术已经在动物试验中取得一定进展,说明此策略对缺血性脑病的治疗有着广阔的前景。

外源性NGF对脑脊液中氨基酸含量的影响

目的 观察外源性神经生长因子 (NGF)对实验动物脑脊液中氨基酸含量的影响 ,用以探讨NGF对脑神经细胞生物效应的作用机制。方法 应用反相高效液相色谱 (HPLC)荧光检测方法 ,测量经不同途径(Vi、M、鼻饲 )供给外源性NGF1周后 ,家兔脑脊液中氨基酸含量的变化。结果 试验组脑脊液中的兴奋性氨基酸 (AST、Glu)明显减少 (P <0 0 1) ,抑制性氨基酸 (Ala、Gly)差异不显著 (P >0 0 5 )。而营养性氨基酸 ,特别是具有生物效应的His、Ser、TyT 等均有明显增加 (P <0 0 5 )。结论 NGF进入体内可分解成小分子 ,并可通过血脑屏障调节脑内氨基酸浓度和神经细胞功能 。

神经生长因子在骨创伤愈合中的作用

骨创伤愈合是一个复杂的过程,受到多层面、多途径的调节,神经因素在骨折愈合过程中具有重要作用,近来发现正常骨组织和骨折骨痂中有神经生长因子及其受体的表达,局部给予外源性神经生长因子对骨折修复具有促进作用,具体机制不明。本文就神经生长因子在骨创伤愈合中的作用作一综述。

兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内c-ret mRNA表达的变化

目的 探讨兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内c-retmRNA表达的变化。方法 用组织原位杂交方法观察兔坐骨神经损伤修复 1 ,3,7,1 4 ,30 ,6 0d后c -retmRNA在骶交感神经节内的表达。结果 兔坐骨神经损伤修复 3d后 ,在损伤侧骶交感神经节内c -retmRNA表达明显上调 ,在损伤后 7d达高峰 ,损伤后 1 4d与 30d仍维持较高水平 ,损伤后 6 0d基本恢复到正常水平。结论 C -retmRNA在兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内表达的变化 ,提示在坐骨神经损伤修复后给予外源性胶质源性神经营养因子 (GDNF)可能有利于交感神经纤维的再生。