脱细胞基质与血管内皮细胞体外相容性的研究

目的 将猪血管内皮细胞和异体猪血管脱细胞基质相结合 ,探讨开发一种制备血管移植物的新方法。方法 分别利用 0 .1%胰蛋白酶、0 .0 2 %乙二胺四乙酸钠 (EDTA)和 1.0 % Triton X- 10 0对猪主动脉作用 2 4小时和 176小时进行脱细胞。异体猪血管内皮细胞分离出来并进行体外细胞扩增 ,再将脱细胞的血管内表面种植上血管内皮细胞。通过光镜和扫描电镜检测脱细胞血管基质是否存在细胞成分和内皮细胞是否生长其上。 结果 酶 -化学除垢剂的脱细胞方法几乎使细胞完全脱落 ,且基质纤维的三维结构变得疏松。体外扩增的异体猪血管内皮细胞可以种植在脱细胞基质上并且具有伸展和增殖功能。 结论 Triton X- 10 0和胰蛋白酶制备的脱细胞基质与异体猪血管内皮细胞具有良好的生物相容性 ,能结合到一起并在体外生成血管移植物。

珍珠层/聚乳酸组合人工骨体外相容性及降解实验研究

目的研究珍珠层/聚乳酸组合人工骨(NPCB)的体外相容性及降解特点。方法将人成骨细胞与NPCB薄片复合培养,进行形态学观察及细胞增殖测定;将NPCB薄片浸泡于生理盐水中,观测不同时期NPCB质量及浸泡液pH值的改变。结果NPCB在体外能明显促进人成骨细胞的贴附和增殖;在观测周期内,随着浸泡时间的延长,NPCB质量逐渐减小,浸泡液pH值呈现规律性变化。结论NPCB在体外具有良好的细胞相容性,并能发生生物降解。

鼠骨髓间充质干细胞诱导的成骨细胞与3-羟基丁酸/3-羟基己酸共聚物的体外相容性

目的探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导的成骨细胞与3-羟基丁酸/3-羟基己酸共聚物(PHBHHx)支架材料的体外相容性,进一步验证PHBHHx材料作为骨组织工程支架材料的可行性。方法将SD大鼠BMSCs诱导的成骨细胞与PHBHHx支架材料体外复合培养,通过扫描电镜观察细胞与材料的复合情况,用MTT法检测材料对细胞增殖的影响。结果成骨细胞在PHBHHx支架材料表面及孔隙中能较好地黏附和增殖。结论 PHBHHx与成骨细胞有良好的体外相容性,是一种性能优良的骨组织工程支架材料。

发射药与贫铀合金及电镀层的外相容性研究

发射药和包装材料在贮存过程中会自然地释放或分解出气体。通过加速试验,研究了不同温度和相对湿度条件下,这些材料及其挥发性气氛与贫铀合金材料和Ni/Zn电镀层的外相容性。试验结果表明上述材料与贫铀合金相容。

聚硫橡胶对SZQu推进剂外相容性与安定性的影响

为了探究聚硫橡胶在长期贮存过程中对SZQu推进剂外相容性和安定性的影响,使用DSC和气相色谱分别测试了在75℃条件下老化7、20、35、50、60d的3组样品(SZQu推进剂、SZQu推进剂/聚硫橡胶混合体聚硫橡胶)的热分解峰温及安定性;以热分解峰温的变化判定样品的外相容性,以中定剂及特征气体含量评判样品的安定性。结果表明,混合体系中SZQu推进剂的分解峰温随着老化时间的增加先下降后升高,老化50d后,SZQu推进剂的分解峰温比单独体系中SZQu推进剂的高;老化20d后,混合体系中SZQu推进剂的中定剂含量急剧下降,表明聚硫橡胶与SZQu推进剂的外相容性较差;长时间老化之后,聚硫橡胶组分进入到SZQu推进剂中,使分解峰温升高,聚硫橡胶消耗中定剂,使SZQu推进剂的贮存安定性下降。

5403内膛漆与TNT和RDX火炸药外相容性研究

试验模拟火炸药与内膛漆在弹体内的实际接触情况 ,通过在江津地下库内三年的贮存 ,研究了 5 40 3内膛漆与TNT、RDX火炸药的外相容性 ,为大弹生产工艺的改进。

关节软骨源性微载体与软骨细胞的体外相容性

目的评估人关节软骨源性微载体与人软骨细胞的体外粘附性。方法切取人关节软骨,对之冷冻干燥后,经粉碎机粉碎,筛取150～200μm大小的软骨粒,经0.25%的胰酶在37℃消化24h,再经1%的化学去污剂TritonX-100震荡72h,蒸馏水清洗48h后,在冻干机内再次冻干12h,经钴60灭菌后,与第6代人软骨细胞共同培养,分别在倒置显微镜下和电镜下观察即刻、2h、8h、30h的粘附情况。结果倒置显微镜下见软骨粒变为绒球状或毛刷状,将此微载体加入培养基后,即见有呈圆球形的软骨细胞与微载体相粘附,2h见微载体上粘附了大量软骨细胞,仍呈圆球形,8h见微载体上粘附的大量软骨细胞仍呈圆球形,而瓶底贴附的软骨细胞已呈现为成纤维细胞样形状,30h见软骨细胞-微载体复合体已沉降贴附于培养瓶底部,软骨细胞增殖明显并向周围伸展,而电镜下观察见粘附于微载体上的软骨细胞仍维持了软骨细胞的形状。整个观察期间均见软骨细胞增殖良好,提示制备的关节软骨源性微载体对软骨细胞无毒害作用。结论关节软骨源性微载体与软骨细胞的体外相容性良好。

纳米相羟基磷灰石胶原复合材料与人骨髓基质干细胞体外相容性的研究

目的 探讨纳米相羟基磷灰石胶原复合材料(nano HAP/Collagen,NHAC)与人骨髓基质干细胞(hBMSC)相容性,为应用组织工程方法修复骨缺损提供依据。方法 将人骨髓基质干细胞与纳米相羟基磷灰石胶原复合材料体外复合培养,进行形态学和功能测定。结果 骨髓基质干细胞能在纳米相羟基磷灰石胶原复合材料上良好地粘附、增殖、生长。细胞的活性和碱性磷酸酶活性未受到纳米相羟基磷灰石胶原复合材料的影响。结论 纳米相羟基磷灰石胶原复合材料具有良好的细胞相容性,可作为骨组织工程理想的骨载体材料。

软骨细胞与异体软骨微粒脱细胞基质体外相容性的研究

目的探索以异体软骨微粒脱细胞基质为支架构建组织工程化软骨。方法多步骤酶法将绵羊关节软骨制成微粒脱细胞基质,行大体、光镜(苏木素伊红、胶原、甲苯胺蓝染色)、扫描电镜观察,同时测定微粒的胶原、氨基葡聚糖、DNA含量。异体绵羊关节软骨细胞分离、体外扩增,并与软骨微粒脱细胞基质混合体外培养0～35d,倒置显微镜及扫描、透射电镜观察,同时测定羟脯氨酸,氨基葡聚糖,DNA含量及细胞黏附率。结果软骨微粒脱细胞基质只含有基质成分,直径0.100～0.154mm,胶原,氨基葡聚糖及DNA含量分别为204.4±3.1μg/mg,18.3±2.0μg/mg和0.042±0.013μg/mg。异体软骨细胞紧紧围绕于异体软骨微粒脱细胞基质四周,二者形成的复合物中胶原、氨基葡聚糖及DNA含量于第7d与0d相比具有统计学意义(P<0.05),分别与14d(胶原、DNA)和21d(氨基葡聚糖)达高峰,随后维持在高水平。细胞黏附率为92%。结论软骨细胞与异体软骨微粒脱细胞基质有良好的生物相容性,为组织工程方法再造软骨提供又一支架材料。

锌-2银-0.4镁多孔合金支架的体外生物相容性、成骨性及抗菌性能评价

目的制备锌-2银-0.4镁(Zn-2Ag-0.4Mg)多孔合金支架并研究该支架的体外相容性、成骨性及抗菌性能。方法实验采用纯银和纯镁在Ar+2%六氟化硫(SF_(6))保护、650℃条件下,熔炼成为锌-2银-0.4镁多孔合金,分为锌组、锌银组、锌银镁组、对照组,采用噻唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测试细胞毒性。采用鬼笔环肽法进行细胞骨架染色,采用茜素红染色及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)测量检验其成骨性能,并采用金葡菌共培养的模式检测其抗菌性能。结果比较对照组、锌组、锌银组、锌银镁组体外相容性、成骨性及抗菌性能,结果表明锌银镁合金组细胞毒性最低,细胞骨架染色、细胞迁移实验、ALP表达水平更高,茜素红染色矿化面积比率更高,体外抗菌测试更好。结论镁的加入提高了材料的成骨性能,银的加入显著提高了材料的抗菌性能,两种元素的加入提高了纯锌的细胞相容性和成骨特性。因此,锌银镁合金有望成为骨科种植体新的选择材料,特别是在骨缺损修复领域。

钛酸钾生物薄膜/钛合金生物复合材料的制备及其体外生物相容性

用仿生化学方法制备钛酸钾生物薄膜/Ti-15Mo-3Nb生物复合材料,然后通过模拟体液培养试验、动态凝血试验及体外细胞培养试验对Ti-15Mo-3Nb和钛酸钾生物薄膜/Ti-15Mo-3Nb生物复合材料的体外生物相容性进行研究,以验证钛酸钾作为一种新型的生物活性涂层材料的可行性。对比试验的结果表明:(1)在模拟体液培养实验中,Ti-15Mo-3Nb表面未见钙磷沉积,表现为生物惰性,而呈多孔网状结构的钛酸钾生物薄膜具有很强的钙磷吸附能力,表现出很好的生物活性;(2)以动态凝血时间为指标,钛酸钾生物薄膜>Ti-15Mo-3Nb,表现出良好的血液相容性;(3)细胞培养实验表明,二者均具有良好的细胞相容性,但在细胞培养初期钛酸钾生物薄膜具有更好的细胞附壁生长趋势,这将有利于损伤部位的早期愈合。钛酸钾生物薄膜/Ti-15Mo-3Nb生物复合材料表现出更好的生物相容性和生物活性。

蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解及体外生物相容性的研究

探讨蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解性能和生物相容性,为其临床应用奠定基础。通过静电纺丝仪,将RGD-重组蛛丝蛋白(p NSR16)、聚己内酯(PCL)、明胶(Gt)、壳聚糖(CS)共混形成的纺丝液进行电纺,制得(p NSR16/PCL/CS)/(p NSR16/PCL/Gt)支架,并将其植入SD大鼠腿部肌肉中,通过肉眼外观观察、组织切片HE染色评价等方法,评价蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解情况。分析支架浸提液对间充质干细胞集落形成、细胞分裂指数、台盼蓝拒染率、细胞毒性和细胞周期的影响,评价血管支架的生物相容性。血管支架在整个植入期内不断降解,(p NSR16/PCL/CS)/(p NSR16/PCL/Gt)支架降解程度更深,纤维断裂严重,12周时失重率为20.3%,其降解速度明显快于(PCL/CS)/(PCL/Gt)支架,后者在12周时仅降解了13.2%。在(p NSR16/PCL/CS)/(p NSR16/PCL/Gt)支架浸提液培养条件下的大鼠骨髓MSC集落生成率、平均集落面积和分裂指数都显著高于(PCL/CS)/(PCL/Gt)支架组。血管支架毒性等级均低于1级,无细胞毒性。与血管支架浸提液复合培养的MSC生长状态良好,台盼蓝拒染率高于95%,复合培养48 h后,细胞G0/1期比例降低,S、G2/M期比例均升高。蛛丝蛋白复合材料小直径血管支架的体内降解和生物相容性良好,应用于临床具有一定的可行性。

SZQu推进剂与其他部件的外相容性研究

采用差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry,DSC)分别测定了在75℃条件下老化了7、50 d的SZQu推进剂与缩醛漆、丁腈橡胶、聚硫橡胶、纸垫、隔热层等接触材料的外相容性,利用傅里叶红外光谱分析仪进一步测试了外相容性较差体系中的SZQu推进剂性能。根据傅里叶红外光谱中SZQu推进剂的基团变化,确定了接触材料是否对SZQu推进剂性能产生影响。结果表明:根据DSC曲线和评价相容性的标准,SZQu推进剂与丁腈橡胶、聚硫橡胶的外相容性较差,评定为轻微敏感;SZQu推进剂与缩醛漆、纸垫、隔热层的外相容性良好;结合傅里叶红外光谱曲线,进一步判断出聚硫橡胶对SZQu推进剂性能有较大影响,丁腈橡胶对SZQu推进剂性能影响不大。

基因转染BMSC与BGC的体外生物相容性的实验研究

目的 研究人骨形态发生蛋白 - 2 (humanbonemorphogeneticprotein - 2 ,hBMP - 2 )基因转染的兔骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells,BMSCs)与生物活性陶瓷 (Bioactiveglassceramics,BGC)体外培养条件下的生物相容性。方法 抽取成兔胫骨骨髓组织 ,置于含 10 %胎牛血清的高糖DMEM培养基中培养 ,脂质体法介导将hBMP - 2基因转入培养的BMSCs ,G4 18筛选 ,取阳性克隆 ,继续培养。分为实验组 (转染的细胞与BGC复合 ) ,对照组 (单纯转染的细胞 ) ,不同时间用倒置相差显微镜观察。MTT法进行细胞增殖测定 ,并进行细胞微量蛋白含量和碱性磷酸酶的定量检测。结果 原位杂交证实基因转染成功 ,形态特征及生物学行为证实转染的细胞无致瘤性 ,转染的BMSCs体外培养时复合或不复合BGC均生长良好 ,BGC利于细胞的贴附、生长与增殖 ,并对细胞的功能无不良影响。结论 基因转染的BMSCs可以作为一种新型的种子细胞 ,BGC是较理想的骨组织工程支架材料 ,基因转染的BMSCs复合BGC用于骨缺损的修复 ,具有广阔的临床应用前景。

新型稀土镁合金螺钉体内促骨修复及体外生物相容性研究

为测试新型稀土镁合金的生物相容性及降解产物致敏性;评价新型稀土镁合金螺钉对骨伤模型的治疗效果,基于NZ30K镁合金添加Mn元素制成新型稀土镁合金,并通过后期加工制成不同规格的螺钉.将稀土镁合金螺钉浸入磷酸盐缓冲液中制作浸提液,于大鼠后肢背部皮下注射,观察浸提液皮下致敏性.将螺钉打磨制成圆片植入到大鼠皮下,观察皮下降解产气情况,以可吸收骨蜡作为对照同位置皮下植入.建立兔骨损伤模型,将稀土镁合金植入,定期拍摄X光检查螺钉降解情况,按照时间顺序分别于8周、12周、16周处死实验兔制作肝肾切片、骨切片,评价肝肾毒性及体内降解情况;同期以ZA75镁合金为基础添加0.3%Mn元素制成新镁合金,作为对照组对比稀土镁合金对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化效果.将浸提液过滤稀释后添加至细胞培养板中,加入成骨诱导液培养, Westernblot蛋白电泳实验测定骨保护蛋白(OPG)表达情况.新型稀土镁合金浸提液未表现出致敏性,皮下降解结果显示植入初中期有气腔产生,中后期气腔消失,镁合金完全降解;组织切片显示,兔股骨螺钉植入在前中期有一定肝肾毒性,植入中期促骨生长效果相较于前期更为明显,植入后期未见明显肝肾毒性,螺钉降解完全,植入部位骨质增强;兔股骨植入降解结果显示植入前期未观察到明显的促进骨生长效果,螺钉与骨质嵌合紧密,植入中期促骨生长修复效果呈现,局部骨组织出现膨隆包裹住螺钉降解产物,植入后期螺钉完全降解,植入位置有一小孔未闭合,股骨近端明显膨隆;蛋白电泳实验显示,新型稀土镁合金浸提液可增加OPG表达,具有良好的生物相容性.基于NZ30K开发的新型稀土镁合金在动物实验及细胞实验阶段表现出良好的生物相容性,可为临床应用提供一定参考.

羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料的制备及体外生物相容性

背景:利用传统固相复合工艺难以将纳米级羟基磷灰石粉体与聚苯硫醚进行复合,从而无法发挥纳米材料的优势,并且目前缺少羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料生物相容性的相关研究。目的:应用液相复合工艺制备纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料,评价其体外生物相容性。方法:应用液相复合工艺制备纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料粉体和片材,利用红外光谱分析仪及扫描电镜分析复合材料的成分结构;利用接触角测试仪评估材料的亲水性,利用兔血及L929小鼠成纤维细胞进行材料的溶血实验及体外细胞毒性实验。结果与结论:通过液相复合工艺制备的羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料混合均匀,结合紧密;聚苯硫醚粉体的接触角为81.25°,而纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料粉体接触角为16.1°;聚苯硫醚片材的接触角为83.5°,纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料片材的接触角为42.5°,对比可知,纳米羟基磷灰石的加入明显改善了单纯聚苯硫醚材料的亲水性能。纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料的溶血率为1.66%(<5%),提示材料血液相容性良好;L929细胞在材料浸提液中生长良好,CCK-8法检测提示体外细胞毒性属无毒范畴(0至1级)。以上结果表明羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料制备成功,体外生物相容性良好。

丝素蛋白对可注射磷酸钙骨水泥细胞相容性的影响

背景:已有的研究证实在磷酸钙骨水泥中添加适量的丝素蛋白能增加其抗压强度同时仍保持其可注射性,但制备的丝素蛋白/磷酸钙骨水泥复合材料是否仍具良好的生物相容性尚不确切。目的:将人骨髓间充质干细胞与丝素蛋白/磷酸钙骨水泥复合材料共培养,评价该材料的细胞相容性。设计、时间及地点:对比观察体外实验,于2007-09/2008-03在苏州大学附属第一医院骨科实验室完成。材料:磷酸钙骨水泥由上海瑞邦公司提供。丝素蛋白由苏州大学材料学院提供。方法:应用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞,条件培养基优化分离培养。浸提法制备丝素蛋白/磷酸钙骨水泥复合材料及磷酸钙骨水泥的浸提液。用MTT法测定丝素蛋白/磷酸钙骨水泥及磷酸钙骨水泥浸提液培养人骨髓间充质干细胞的活力,绘制生长曲线、计算第1,3,5,7天的相对增殖率并进行毒性分级;流式细胞仪检测丝素蛋白/磷酸钙骨水泥及磷酸钙骨水泥浸提液培养第4天的人骨髓间充质干细胞的细胞周期及倍体情况;扫描电镜观察丝素蛋白/磷酸钙骨水泥复合材料与人骨髓间充质干细胞共培养后第1,3,5,7天细胞的黏附及增殖情况。主要观察指标:①细胞毒性分级。②细胞周期。③细胞黏附、增殖情况。结果:丝素蛋白/磷酸钙骨水泥及磷酸钙骨水泥浸提液培养的人骨髓间充质干细胞具有良好的活力,其毒性分级均为0或1级;流式细胞仪检测见两组细胞均为二倍体细胞,未见异倍体细胞,两组G0/G1期、S期、G2/M期及细胞增殖指数差异无显著性意义(P>0.05);扫描电镜见人骨髓间充质干细胞在丝素蛋白/磷酸钙骨水泥复合材料上能黏附、生长,并随时间的推移材料表面的细胞数呈增长趋势。结论:人骨髓间充质干细胞与丝素蛋白/磷酸钙骨水泥具有良好的体外细胞相容性。

药用水基磁流体的一步法制备及其细胞相容性研究

目的制备药用水基磁流体并评价其细胞相容性。方法利用微乳液制备技术,以一步表面活性剂处理法制备药用水基磁流体,并使用透射电镜和光子相关光谱仪研究其形态和粒径分布;分别采用四甲基偶氮唑盐比色试验、乳酸脱氢酶释放试验测定不同浓度药用水基磁流体对正常人肝细胞株(L-02)的体外细胞相容性;运用红外光谱法、热重法、差示热重法、差示扫描量热法对所制备的单层与双层正癸酸包覆的磁流体固态样品进行表征。结果药用水基磁流体粒径在10nm^20nm之间;其放置1y未见发生相分离及明显的数均粒径变化;其对L-02细胞不具有毒性,细胞相容性好。结论药用水基磁流体可用于磁性靶向给药系统。

西罗莫司-聚三亚甲基碳酸酯改性镁合金的降解和药物释放行为

背景:冠状动脉镁合金支架腐蚀速率及药物释放的双重调控是目前镁合金支架需要解决的重要课题。可降解载药聚合物涂层作为一种有前途的改性策略引发了广泛关注。目的:研究可降解载药聚合物涂层修饰对镁合金降解的影响,以及镁合金降解对可降解载药聚合物涂层药物释放的影响。方法:制备不同的药物聚合物溶液,溶液S1:西罗莫司0.01 g、聚三亚甲基碳酸酯0.005 g、二氯甲烷1 mL;溶液S2:西罗莫司0.01 g、聚三亚甲基碳酸酯0.01 g、二氯甲烷1 mL;S3:西罗莫司0.01 g、聚三亚甲基碳酸酯0.02 g、二氯甲烷1 mL;S2-1:西罗莫司0.01 g、聚三亚甲基碳酸酯0.01 g、0.001 g聚乙二醇400、二氯甲烷1 mL;S2-2:西罗莫司0.01 g、聚三亚甲基碳酸酯0.01 g、0.002 g聚乙二醇400、二氯甲烷1 mL。将5种药物聚合物溶液涂覆在AZ31镁合金表面制备涂层,对比涂层在镁合金基底上的药物释放行为差异,以及各涂层对镁合金腐蚀能力的影响;探索基底对西罗莫司-聚三亚甲基碳酸酯涂层的影响;考察各修饰镁合金的体外细胞相容性与血液相容性。结果与结论:①西罗莫司-聚三亚甲基碳酸酯涂层的修饰可以大幅增强镁合金的耐腐蚀能力,随着载药涂层的药物释放,涂层中形成微观水通道,涂层的腐蚀防护能力逐渐下降;浸泡后期金属降解产生的碱性微环境对药物释放起到一定的加速作用;涂层中药物占比的升高或聚乙二醇的加入会加快药物释放速率,但也加快了金属腐蚀速率;以上结果说明镁合金降解和药物涂层降解之间具有一定的双向促进效应,即镁合金的降解促进药物涂层的降解,而药物涂层的降解造成的孔隙也反过来进一步加快镁合金的降解。②5种药物涂层可有效抑制人血管内皮细胞与人血管平滑肌细胞的增殖与贴附,既不会引发溶血反应,也不影响内外源凝血机制(不同涂层参数的影响效果有小幅度的差异)。

粉末冶金制备TNZS基生物材料的体外组织相容性

采用高能球磨与冷压烧结相结合的粉末冶金法制备了TNZS、5%TiO_2/TNZS及5%HA/TNZS(质量分数,下同)生物材料,并研究了TiO_2和HA的添加对TNZS体外组织相容性的影响。结束表明:3种TNZS基生物材料均无细胞毒性;5%TiO_2/TNZS和5%HA/TNZS表面在1,3,5和7 d的细胞相对增殖抑制率CPIR值大幅低于TNZS组,TiO_2和HA的添加显著提高了TNZS材料表面的细胞增殖速度,增强了其细胞增殖能力,更有助于诱导成骨细胞的体外增殖;3种TNZS基材料表面贴附的成骨细胞伪足伸展状态良好,而5%TiO_2/TNZS表面贴附的成骨细胞分布更加均匀。