荧光假单胞菌SlyB的原核表达、抗原性分析及抗血浆杀菌作用

采用生物信息学方法分析SlyB的理化性质,分子克隆表达纯化获得SlyB蛋白并免疫小鼠制备SlyB抗血清,Western blotting检测抗血清特异性与效价,免疫酶联法模拟SlyB抗血清对鱼类主要致病菌的体外免疫识别作用,Western blotting分析SlyB蛋白抵抗鱼血浆的杀菌作用。结果显示:SlyB蛋白在假单胞菌属和杆菌属间同源性较好;获得SlyB最佳诱导表达条件;验证SlyB抗血清特异性较好,效价达到1∶12800;ELISA显示SlyB抗血清对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌和溶藻弧菌存在免疫识别作用,Western blotting表明SlyB蛋白对细菌抵抗鱼血浆的杀菌作用呈下调趋势。表明SlyB蛋白具有较好的抗原性,在蛋白亚单位疫苗上有应用前景。