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体外膜氧合联合介入取栓救治蛋白C基因突变所致高危肺栓塞一例
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作者 谢玉华 张安 +1 位作者 曾瀚庆 曹云星 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期293-296,共4页
遗传性蛋白C缺陷症是由蛋白C基因突变引起的一种染色体遗传病,可导致静脉血栓形成,多与外显子4~9和内含子8的突变有关。蛋白C基因突变引起的致死性肺栓塞罕见,治疗面临巨大挑战。本文报道1例由蛋白C基因8号外显子移码突变引起的致死性... 遗传性蛋白C缺陷症是由蛋白C基因突变引起的一种染色体遗传病,可导致静脉血栓形成,多与外显子4~9和内含子8的突变有关。蛋白C基因突变引起的致死性肺栓塞罕见,治疗面临巨大挑战。本文报道1例由蛋白C基因8号外显子移码突变引起的致死性肺栓塞,采用体外膜氧合进行呼吸、循环支持,并成功实行介入取栓的救治经验,为该疾病的诊断及救治提供参考。 展开更多
关键词 蛋白C缺陷症 蛋白C基因 基因检测 肺栓塞 外膜氧合 介入取栓
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红细胞分布宽度-白蛋白比值与接受静脉-动脉体外膜肺氧合支持的急性暴发性心肌炎患儿院内死亡风险的关联性研究
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作者 周晶晶 邵钧捷 +4 位作者 岳帅 闫浩杰 史树锦 洪小杨 张然 《中国医学前沿杂志(电子版)》 CSCD 北大核心 2024年第5期59-66,共8页
目的探究红细胞分布宽度-白蛋白比值(red cell distribution width to albumin ratio,RAR)与接受静脉-动脉体外膜肺氧合(veno-arterial extracorporeal membrane oxygenation,VA-ECMO)支持的急性暴发性心肌炎(acute fulminant myocardit... 目的探究红细胞分布宽度-白蛋白比值(red cell distribution width to albumin ratio,RAR)与接受静脉-动脉体外膜肺氧合(veno-arterial extracorporeal membrane oxygenation,VA-ECMO)支持的急性暴发性心肌炎(acute fulminant myocarditis,AFM)患儿院内死亡风险的关联性。方法选取2015年7月至2022年8月于中国人民解放军总医院第七医学中心及其他6个ECMO中心因AFM接受VA-ECMO治疗的患儿125例。根据受试者操作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线)确定RAR截断值,并分为RAR<0.38组和RAR≥0.38组。采用二元Logistic回归评估RAR与院内死亡风险的关联性。结果研究期间36例(28.8%)患儿发生院内死亡。校正潜在混杂因素后,RAR每增加1个标准差,院内死亡风险增加93%(OR=1.93,95%CI:1.1~3.39,P=0.022)。与RAR<0.38组相比,RAR≥0.38的院内风险增加6.5倍(OR=7.5,95%CI:1.85~30.32,P=0.005)。限制性立方样条图显示,RAR与院内死亡风险之间存在正线性关系(Pnonlinear=0.325)。亚组分析发现,性别与RAR在评估院内死亡发生风险上存在交互作用。结论RAR升高与AFM患儿VA-ECMO院内死亡高风险相关,提示RAR可能是临床预后判断的新型分子标志物。 展开更多
关键词 静脉-动脉体外膜肺氧合 急性暴发性心肌炎 红细胞分布宽度 蛋白
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梅毒螺旋体外膜蛋白功能的研究进展
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作者 何碧莎 刘双全 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期154-156,共3页
梅毒是一种严重影响人类健康的慢性传播性疾病,是由梅毒螺旋体感染所引起。梅毒螺旋体外膜蛋白(Omp)是一类具有关键性功能的蛋白。Omp在梅毒螺旋体的免疫原性、黏附宿主细胞以及转运营养物质等方面具有非常重要的作用。本文就梅毒螺旋... 梅毒是一种严重影响人类健康的慢性传播性疾病,是由梅毒螺旋体感染所引起。梅毒螺旋体外膜蛋白(Omp)是一类具有关键性功能的蛋白。Omp在梅毒螺旋体的免疫原性、黏附宿主细胞以及转运营养物质等方面具有非常重要的作用。本文就梅毒螺旋体主要外膜蛋白的结构、功能等特性做一综述。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 外膜蛋白 稀有外膜蛋白 外膜蛋白
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外膜蛋白OmpA在蛙源米尔伊丽莎白菌致病性中的功能
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作者 刘芳园 胡瑞雪 +3 位作者 余芳 侯家昊 于子润 顾泽茂 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期203-209,共7页
为探究外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)对米尔伊丽莎白菌致病作用的影响,以蛙源米尔伊丽莎白菌FL160902为研究对象,通过同源重组法构建OmpA缺失株△ompA,比较缺失株和野生株的生长特性、生物膜形成能力、抗血清杀伤能力、对... 为探究外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)对米尔伊丽莎白菌致病作用的影响,以蛙源米尔伊丽莎白菌FL160902为研究对象,通过同源重组法构建OmpA缺失株△ompA,比较缺失株和野生株的生长特性、生物膜形成能力、抗血清杀伤能力、对细胞的黏附能力以及对蛙的致病性差异。结果显示:△ompA的生长能力和抗血清杀伤能力与野生株无显著差异;但与野生株相比,△ompA的生物膜形成能力增加了66%,△ompA对bEnd.3细胞的黏附能力降低了61%;黑斑蛙感染试验显示,△ompA在黑斑蛙血液、脾和脑组织中的载菌量分别为(3.15×10^(8)±0.09×10^(8))、(2.11×10^(8)±0.07×10^(8))和(6.61×10^(8)±0.16×10^(8))copies/g,均显著低于野生株,且△ompA对黑斑蛙的致死率为37%,显著低于野生株的致死率(75%)。上述结果表明,ompA基因缺失不改变米尔伊丽莎白菌的抗血清杀伤能力,但增加了菌株的生物膜形成能力,减弱了菌株的黏附能力,从而降低了该菌对蛙的致病性。 展开更多
关键词 米尔伊丽莎白菌 基因缺失 外膜蛋白A 致病性
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沙眼衣原体外膜复合物蛋白B的研究进展
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作者 孙悠娴 齐蔓莉 《皮肤性病诊疗学杂志》 2024年第2期123-128,共6页
沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外... 沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外膜蛋白。OmcB在衣原体内丰富的含量以及在衣原体感染过程中表现出的强大的免疫原性,使其在帮助CT感染的诊断以及疫苗研发方面具有很好的应用前景。本文对OmcB的结构、定位及CT感染过程中的相关机理进行综述。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 外膜复合物蛋白B 免疫优势蛋白
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活化部分凝血活酶时间、血栓弹力图、纤维蛋白单体预测体外膜肺氧合治疗患者出血和血栓
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作者 邓爽 方靖舒 甘芳宴 《检验医学》 CAS 2024年第8期764-769,共6页
目的探讨活化部分凝血活酶时间(APTT)、血栓弹力图(TEG)和纤维蛋白单体(FM)在体外膜肺氧合(ECMO)患者出血和血栓中的预测价值。方法选取2023年8—12月广西壮族自治区人民医院26例行ECMO治疗的患者。根据是否发生出血和血栓分别细分为出... 目的探讨活化部分凝血活酶时间(APTT)、血栓弹力图(TEG)和纤维蛋白单体(FM)在体外膜肺氧合(ECMO)患者出血和血栓中的预测价值。方法选取2023年8—12月广西壮族自治区人民医院26例行ECMO治疗的患者。根据是否发生出血和血栓分别细分为出血组(16例)、无出血组(10例)和血栓组(5例)、无血栓组(21例)。收集所有患者临床资料,比较各组凝血参数的差异。采用Cox回归分析评估ECMO患者发生出血和血栓的危险因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估APTT、TEG、FM预测ECMO出血和血栓的效能。结果26例患者出血和血栓发生率分别为61.5%(16/26)和19.2%(5/26),相关事件发生中位天数分别为3和6 d。出血组最大APTT、平均APTT、TEG参数反应时间(R)相关参数[普通杯(CK)、肝素酶杯(CKH)、ΔR(R_(CK)-R_(CKH))]均高于无出血组(P<0.05);血栓组FM高于无血栓组(P<0.05)。最大APTT、TEG R_(CK)、TEG R_(CKH)、TEGΔR是出血的危险因素(P<0.05),校正混杂因素后,风险比(HR)分别为1.010、1.029、1.216、1.018;FM是血栓的危险因素(P<0.05),校正混杂因素后,HR为1.008。最大APTT、TEG R_(CK)、TEG R_(CKH)、TEGΔR预测ECMO患者发生出血的ROC曲线下面积分别为0.831、0.800、0.763、0.744,联合指标的ROC曲线下面积(AUC)为0.869;FM预测ECMO患者发生血栓的ROC曲线下面积为0.868。结论最大APTT、TEG R_(CK)、TEG R_(CKH)、TEGΔR可预测ECMO患者出血,联合指标预测价值最优。FM可预测ECMO患者血栓。 展开更多
关键词 活化部分凝血活酶时间 血栓弹力图 纤维蛋白单体 出血 血栓 外膜肺氧合
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布鲁氏菌外膜蛋白OMP25和OMP31免疫学研究进展
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作者 张璇 郭宇 +5 位作者 高登军 沈冬梅 王旭红 戴晓光 宋小霞 王建龙 《兽医导刊》 2024年第2期31-34,共4页
布鲁氏菌病会导致家畜流产、不育等,严重损害养殖户的经济效益,同时对人类健康也产生威胁。近年布鲁氏菌病的频繁暴发对公共安全造成了巨大的威胁,因此,寻找更有效的方法来检测、预防布鲁氏菌病是关键。布鲁氏菌的外膜蛋白与布病的发病... 布鲁氏菌病会导致家畜流产、不育等,严重损害养殖户的经济效益,同时对人类健康也产生威胁。近年布鲁氏菌病的频繁暴发对公共安全造成了巨大的威胁,因此,寻找更有效的方法来检测、预防布鲁氏菌病是关键。布鲁氏菌的外膜蛋白与布病的发病机制密切相关,其中OMP25和OMP31是布鲁氏菌的主要外膜蛋白,也是布鲁氏菌的重要毒力因子。目前,已有研究采用OMP25和OMP31评估布鲁氏菌的感染状况,并成功制造了重组外膜蛋白。本文回顾国内外学者对布鲁氏菌外膜蛋白OMP25和OMP31免疫学研究现状和进展,旨在为布鲁氏菌的检测和疫苗开发提供理论支持。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 OMP25 OMP31 重组外膜蛋白
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基于沙门氏菌PagN外膜蛋白的广谱单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
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作者 孟闯 丁睿清 +5 位作者 尚月月 刘钧 徐双媛 康喜龙 焦新安 潘志明 《中国家禽》 北大核心 2023年第4期69-75,共7页
为制备针对沙门氏菌特异性外膜蛋白PagN的单克隆抗体(MAb),研究通过构建重组质粒pColdⅠ-pagN和pGEX-6P-1-pagN,利用大肠杆菌系统表达并纯化了肠炎沙门氏菌His-PagN和GST-PagN重组蛋白,免疫6~8周龄BALB/c小鼠,利用B淋巴细胞杂交瘤技术... 为制备针对沙门氏菌特异性外膜蛋白PagN的单克隆抗体(MAb),研究通过构建重组质粒pColdⅠ-pagN和pGEX-6P-1-pagN,利用大肠杆菌系统表达并纯化了肠炎沙门氏菌His-PagN和GST-PagN重组蛋白,免疫6~8周龄BALB/c小鼠,利用B淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株能稳定分泌PagN蛋白MAb的杂交瘤细胞株3B3和3F10。结果显示:3B3和3F10的亚型均为IgG2b,ELISA效价分别为1.14×10^(9)和1.32×10^(8),Westernblot分析显示其均能特异性结合His-PagN蛋白;进一步分析显示3B3和3F10可特异性识别9种不同血清型沙门氏菌,而不与9种非沙门氏菌菌株反应;全菌包板间接ELISA结果显示3F10能特异性识别不同血清型沙门氏菌,显示出用于沙门氏菌检测的潜能。研究表明制备的单克隆抗体3B3和3F10可特异性识别不同血清型沙门氏菌PagN蛋白,为沙门氏菌检测提供了重要生物材料。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PagN 外膜蛋白 单克隆抗体 反应谱
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多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵与外膜蛋白表达水平分析
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作者 黄育波 周宇麒 +4 位作者 郑文争 朱家馨 杨海玲 吴文斌 张天托 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期2122-2129,共8页
目的分析鲍曼不动杆菌对常用抗生素的敏感性,检测外排泵基因和外膜蛋白基因的表达水平,探讨上述基因表达与抗生素耐药之间的关系。方法选择下呼吸道标本分离的鲍曼不动杆菌共213株,对其进行菌种鉴定、药敏试验;根据药敏试验将其分为不... 目的分析鲍曼不动杆菌对常用抗生素的敏感性,检测外排泵基因和外膜蛋白基因的表达水平,探讨上述基因表达与抗生素耐药之间的关系。方法选择下呼吸道标本分离的鲍曼不动杆菌共213株,对其进行菌种鉴定、药敏试验;根据药敏试验将其分为不敏感组(NS组)与敏感组(S组),应用荧光定量PCR检测外排泵基因(adeB、adeJ、adeG、craA、abeM、amvA)、外膜蛋白基因(omp25、omp33-36、carO)的表达水平,比较上述基因在NS组与S组表达水平的差异。结果鲍曼不动杆菌对阿米卡星、亚胺培南不敏感率分别为89.2%、81.2%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、庆大霉素等药物的不敏感率均超过92%。adeB基因相对表达量升高(RE≥1)在各抗生素(AMK、IPM、CFP、FEP、TZP、CAZ、SXT、CIP、SCF、CN)NS组的比例高于S组,差异有统计学意义(P<0.05)。外排泵adeB基因mRNA的RE值在上述各抗生素NS组和S组之间差异有统计学意义(P<0.05),NS组adeB基因的RE值平均水平较高。外排泵adeJ、adeG、craA、abeM、amvA基因平均RE水平无升高,且经比较分析差异无统计学意义(P>0.05)。外膜蛋白omp25、omp33-36、carO基因平均RE值均超过1.0,提示相对表达量升高。结论本院鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药率较高。外排泵基因adeB过度表达在本院鲍曼不动杆菌耐药中起着重要作用;其余外排泵基因adeJ、adeG、craA、abeM、amvA和外膜蛋白基因omp25、omp33-36、carO在本研究的多数菌株耐药机制中可能不起作用。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐药 外排泵 外膜蛋白
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外膜蛋白A与鲍曼不动杆菌耐药性及炎症反应特征分析
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作者 赵丹 李尼克 +3 位作者 李雯 胡芳芳 彭春红 张湘燕 《贵州医药》 CAS 2023年第3期346-349,共4页
目的 回顾性分析鲍曼不动杆菌外膜蛋白A (OmpA)与细菌耐药性及炎症反应指标的特征,为临床鲍曼不动杆菌的防治提供依据。方法 回顾性分析我院2019年1月至2020年12月收治的53例鲍曼不动杆菌感染患者,根据药敏结果分为敏感株组、耐药株组,... 目的 回顾性分析鲍曼不动杆菌外膜蛋白A (OmpA)与细菌耐药性及炎症反应指标的特征,为临床鲍曼不动杆菌的防治提供依据。方法 回顾性分析我院2019年1月至2020年12月收治的53例鲍曼不动杆菌感染患者,根据药敏结果分为敏感株组、耐药株组,分析每组中患者临床特点及外周血中白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,PCR及RT-PCR检测每组鲍曼不动杆菌OmpA DNA及mRNA的表达,探讨两组中以上指标的变化及意义。结果 鲍曼不动杆菌临床药敏以多粘菌素B耐药率最低,为3.2%,其次为替加环素,为15.79%。53例鲍曼不动杆菌均有OmpA基因表达;耐药株组OmpA mRNA、CRP、IL-6水平均显著高于敏感株组(P<0.05);两组WBC、N%、PCT水平比较均无统计学意义(P>0.05)。耐药株组鲍曼不动杆菌OmpA mRNA的相对表达水平与PCT成正相关,r=0.379(P<0.05),与WBC、N%、IL-6、CRP无相关性(P>0.05)。结论 OmpA参与细菌耐药机制的同时,作为主要的毒力因子,促进了细菌的致炎反应。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外膜蛋白A 细菌耐药 炎症反应
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2型糖尿病心外膜脂肪组织厚度体质量指数与尿微量蛋白/肌酐的关系
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作者 张伟 孙春萍 +5 位作者 胡国平 张强 司玮 刘皆 张娜娜 吕芳 《安徽医学》 2023年第12期1452-1455,共4页
目的探究2型糖尿病患者(T2DM)心外膜脂肪组织(EAT)厚度、体质量指数(BMI)与尿微量蛋白/肌酐(ACR)的关系。方法选取2021年4月至2022年4月于合肥市第一人民医院内分泌科住院治疗的80例T2DM患者为研究对象,根据身体质量指数(BMI)水平,分为... 目的探究2型糖尿病患者(T2DM)心外膜脂肪组织(EAT)厚度、体质量指数(BMI)与尿微量蛋白/肌酐(ACR)的关系。方法选取2021年4月至2022年4月于合肥市第一人民医院内分泌科住院治疗的80例T2DM患者为研究对象,根据身体质量指数(BMI)水平,分为超重或肥胖组40例(A组)和正常体重组40例(B组),所有患者均测定EAT厚度,留取清晨尿测定尿ACR,并比较两组患者血糖、血脂、血尿酸等代谢指标及空腹C肽水平。结果A组患者EAT厚度、三酰甘油(TG)、BMI、空腹C肽、尿ACR均高于B组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平低于B组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者病程、年龄、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)等指标差异均无统计学意义(P>0.05);Pearson相关性分析显示,EAT厚度与BMI、尿ACR、TG、血尿酸(BUA)呈正相关(r=0.266,0.189,0.468,0.428,P<0.05),与HDL-c呈负相关(r=-0.337,P<0.05);多元线性逐步回归分析显示,尿ACR与BMI、EAT存在危险因素关联。结论T2DM患者BMI、EAT厚度与尿ACR相关,BMI、EAT厚度可能是T2DM尿ACR升高的危险因素。 展开更多
关键词 2型糖尿病 外膜脂肪厚度 尿微量白蛋白/肌酐
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鲍曼不动杆菌OmpA蛋白的生物学特性分析
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作者 赵丹 李尼克 +3 位作者 李雯 彭春红 赵德刚 张湘燕 《贵州医药》 CAS 2024年第3期339-344,共6页
目的提取临床分离的鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(OmpA)的基因,并进行生物学预测和分析。方法查询鲍曼不动杆菌OmpA基因序列,设计特异性PCR引物,以提取的鲍曼不动杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增OmpA片段。回收目的片段,采用生物信息学软件分析O... 目的提取临床分离的鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(OmpA)的基因,并进行生物学预测和分析。方法查询鲍曼不动杆菌OmpA基因序列,设计特异性PCR引物,以提取的鲍曼不动杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增OmpA片段。回收目的片段,采用生物信息学软件分析OmpA蛋白的生物学特性。结果12株鲍曼不动杆菌多位点序列分型(MLST)序列分析有6个ST分型,分别是ST 208、ST 229、ST 191、ST 195、ST540、ST 1145,鲍曼不动杆菌OmpA基因序列全长为1070 bp的,单核苷酸多态性(SNP)位点较少,预测蛋白为跨膜蛋白,具有6种三级结构,均由β-桶状结构组成的保守结构域。结论临床分离的不同鲍曼不动杆菌株OmpA蛋白为结构相对保守的跨膜蛋白,具有维持细胞的形状和稳定性,参与细菌耐药机制及免疫原性作用。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外膜蛋白A 空间结构 跨膜结构
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布鲁氏菌外膜蛋白16单克隆抗体的制备及初步应用 被引量:2
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作者 翟云逸 袁野 +7 位作者 李俊玫 田路路 刁梓洋 李彬 陈家露 周栋 靳亚平 王爱华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2083-2091,共9页
旨在制备布鲁氏菌外膜蛋白16(OMP16)单克隆抗体,建立OMP16抗体竞争ELISA方法,为布病临床防控提供免疫血清学检测手段。本研究选取保守性高、免疫原性良好的布鲁氏菌OMP16,经原核表达获得携带GST或His标签的重组OMP16(rOMP16)。利用杂交... 旨在制备布鲁氏菌外膜蛋白16(OMP16)单克隆抗体,建立OMP16抗体竞争ELISA方法,为布病临床防控提供免疫血清学检测手段。本研究选取保守性高、免疫原性良好的布鲁氏菌OMP16,经原核表达获得携带GST或His标签的重组OMP16(rOMP16)。利用杂交瘤技术筛选可稳定分泌OMP16特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,经亚型鉴定、细胞核型分析和抗体交叉反应性试验分析单抗性质。制备小鼠腹水并纯化,方阵滴定法建立布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法。结果表明,成功构建OMP16原核表达系统,经表达、纯化获得rGST-uOMP16和rHis-OMP16。筛选到1株遗传稳定的OMP16特异性杂交瘤细胞株,命名为B7;经鉴定,该抗体亚型为IgM-κ型,可识别目的蛋白,与标签蛋白无交叉反应。建立了布鲁氏菌OMP16抗体竞争ELISA方法,该方法与试管凝集试验检测结果相比总体符合率为90.53%,显示出良好的一致性。本研究有望为布鲁氏菌病的临床防控提供特异性高、敏感性好的免疫血清学检测方法。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 外膜蛋白16 原核表达 单克隆抗体 竞争ELISA
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冠心病患者D-二聚体/纤维蛋白原比值与心外膜脂肪层厚度的相关性分析 被引量:9
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作者 丁云蕾 赵银红 +2 位作者 何敏 曹丽萍 张振权 《中国心血管病研究》 CAS 2023年第2期149-154,共6页
目的探究冠心病患者D-二聚体/纤维蛋白原比值(D/F)与心外膜脂肪层厚度(EAT)的相关性。方法选择2020年9月~2021年9月于四川省科学城医院心血管内科因疑似冠心病住院并行冠状动脉造影检查的257例患者为研究对象,采用计算机产生随机数法以3... 目的探究冠心病患者D-二聚体/纤维蛋白原比值(D/F)与心外膜脂肪层厚度(EAT)的相关性。方法选择2020年9月~2021年9月于四川省科学城医院心血管内科因疑似冠心病住院并行冠状动脉造影检查的257例患者为研究对象,采用计算机产生随机数法以3∶1的比例分为训练集(193例)和测试集(64例)。根训练集据患者有无冠心病分为冠心病组(118例)和非冠心病组(75例)。通过单因素和多因素分析冠心病的独立危险因素。依据病情程度将冠心病组患者分为轻度组(30例)、中度组(46例)和重度组(42例)三个亚组,探究各危险因素与病情程度的关系。通过Pearson分析各相关因素与病情程度的关系,并分析不同病情程度患者D/F和EAT的相关性。依据独立危险因素构建列线图预测模型,并对模型进行验证。结果体重指数(BMI)、Gensini积分、EAT、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)和D/F为冠心病的独立危险因素(P<0.05)。D/F和EAT与Gensini积分呈显著正相关关系(P<0.05),不同病情程度的冠心病患者的D/F和EAT之间均存在显著正相关关系(P<0.05),且随着病情严重,相关关系越强。而非冠心病人群中D/F和EAT之间不存在显著相关关系(P>0.05)。利用独立危险因素构建列线图预测模型,训练集和测试集的一致性指数(C-index)分别为0.843(95%CI 0.825~0.860)和0.845(95%CI 0.798~0.872),ROC曲线下面积(AUC)分别为0.851(95%CI 0.839~0.872)和0.847(95%CI 0.832~0.869),模型具有较好的区分度,校准曲线评价结果提示模型准确性较高。结论BMI、Gensini积分、EAT、D-D、FIB和D/F为冠心病的独立危险因素,冠心病患者的D/F和EAT具有显著的正相关关系,且病情越严重,相关关系越强。 展开更多
关键词 D-二聚体/纤维蛋白原比值 外膜脂肪层厚度 冠心病 相关性分析 列线图模型
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布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法的建立及免疫原性评估 被引量:1
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作者 邓肖玉 徐锦凤 +4 位作者 何金科 谢珊珊 王勇 王震 陈创夫 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期107-114,共8页
目的建立布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法,评价OMP10在小鼠体内的免疫效果。方法本研究表达和纯化了布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,通过Western Blot进行验证,建立了OMP10间接ELISA检测方法,然后将OMP10与弗氏佐剂和LDH佐剂配伍成2种... 目的建立布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法,评价OMP10在小鼠体内的免疫效果。方法本研究表达和纯化了布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,通过Western Blot进行验证,建立了OMP10间接ELISA检测方法,然后将OMP10与弗氏佐剂和LDH佐剂配伍成2种亚单位疫苗,免疫小鼠后检测抗体水平、脾脏淋巴细胞的增殖水平、CD4^(+)和CD8^(+)T细胞比值以及细胞因子分泌,最后通过攻毒试验评估OMP10的免疫保护效果。结果OMP10作为诊断抗原的特异性和符合率均高于70%;免疫小鼠后2种亚单位疫苗均能产生高滴度的IgG抗体,CD4^(+)/CD8^(+)T的比值均高于PBS对照组,IFN-γ高于PBS对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),但IL-4未发生明显变化,表明OMP10能够诱导很好的体液免疫及Th1型免疫应答。免疫保护结果显示,2种亚单位疫苗免疫组小鼠脾脏指数和脾脏载菌量低于布鲁氏菌M5感染组,差异具有统计学意义(P<0.01),表明OMP10蛋白配伍的亚单位疫苗对布鲁氏菌M5感染小鼠具有高度的保护作用。结论外膜蛋白OMP10在布鲁氏菌诊断和疫苗方面具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 外膜蛋白OMP10 间接ELISA 抗体水平 细胞因子 免疫保护
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黄喉拟水龟肺炎克雷伯菌外膜蛋白A的原核表达与纯化 被引量:2
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作者 莫超迪 覃呈欢 +3 位作者 戴龙喜 韩鹏夫 纪月鑫 韦友传 《广东农业科学》 CAS 2023年第3期137-143,共7页
【目的】克隆黄喉拟水龟肺炎克雷伯菌外膜蛋白A(KpOmpA)基因,构建重组质粒并诱导其表达,纯化获取重组蛋白KpOmpA,为黄喉拟水龟抗肺炎克雷伯菌的相关疫苗研究奠定基础。【方法】以黄喉拟水龟肺炎克雷伯菌DNA为模板,克隆获得KpOmpA基因后... 【目的】克隆黄喉拟水龟肺炎克雷伯菌外膜蛋白A(KpOmpA)基因,构建重组质粒并诱导其表达,纯化获取重组蛋白KpOmpA,为黄喉拟水龟抗肺炎克雷伯菌的相关疫苗研究奠定基础。【方法】以黄喉拟水龟肺炎克雷伯菌DNA为模板,克隆获得KpOmpA基因后与pET-32a表达载体连接;将构建的重组质粒pET-32aKpOmpA转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,通过SDSPAGE电泳检测KpOmpA重组蛋白的表达情况,并对重组蛋白进行可溶性分析;经Ni-IDA琼脂糖纯化树脂柱纯化KpOmpA重组蛋白,应用Western blot方法鉴定纯化蛋白。【结果】KpOmpA基因CDS序列全长为1071 bp,推定编码356个氨基酸,与其他肺炎克雷伯菌的OmpA氨基酸序列同源性超过99%,高度保守。重组质粒pET-32a-KpOmpA经双酶切、测序确认基因序列无移码或突变,表明重组质粒成功构建。转化后的BL21感受态细胞经终浓度为1 mmol/L IPTG在37℃下诱导4 h后进行SDS-PAGE检测,结果表明,KpOmpA重组蛋白大量表达,以包涵体形式存在,分子量约为57 kD。经Ni-IDA琼脂糖纯化树脂柱纯化,获得较高纯度的重组蛋白。Western blot检测结果显示有57 kD的条带,表明KpOmpA重组蛋白能被小鼠抗His-tag单克隆抗体识别。【结论】成功构建了重组质粒pET-32a-KpOmpA,在大肠杆菌表达系统中诱导其表达,并纯化得到较高纯度的KpOmpA重组蛋白,为制备预防肺炎克雷伯菌感染的疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 黄喉拟水龟 肺炎克雷伯菌 外膜蛋白A 原核表达 重组蛋白 蛋白纯化
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水产品腐败希瓦氏菌外膜脂蛋白受体结构、功能及基因表达分析 被引量:1
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作者 周文萱 李秋莹 +3 位作者 崔方超 檀茜倩 孙彤 励建荣 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期131-140,共10页
外膜脂蛋白受体LolB是革兰氏阴性菌运输脂蛋白的关键因子。采用生物信息学方法和实时荧光定量PCR技术探究水产品腐败希瓦氏菌LolB的理化性质、结构和功能及其在不同环境中的基因表达变化。结果表明:lolB基因具有较高的序列保守性;其蛋白... 外膜脂蛋白受体LolB是革兰氏阴性菌运输脂蛋白的关键因子。采用生物信息学方法和实时荧光定量PCR技术探究水产品腐败希瓦氏菌LolB的理化性质、结构和功能及其在不同环境中的基因表达变化。结果表明:lolB基因具有较高的序列保守性;其蛋白LolB分子质量约为23 ku,是稳定的亲水性蛋白,含有信号肽,具有21个磷酸化位点,不具有跨膜结构。LolB的二级结构以无规则卷曲和β-折叠为主,三级结构呈β桶状结构。预测到LolB与脂蛋白转运系统的LolA、LolC和LolE家族跨膜蛋白、ABC转运相关蛋白及增加细胞膜刚性、维持胞壁质稳定性的催化型裂解转糖酶等多种蛋白质存在相互作用。荧光定量PCR结果表明:lolB基因在菌体受到一定程度的饥饿、乙醇、渗透压及高温胁迫时上调表达,而随着胁迫程度增加呈先升后降的表达趋势;4℃条件下,lolB基因表达模式与对照组相似;外源信号分子C6-HSL诱导lolB高表达,并和LolB蛋白的Leu51残基通过π-烷基存在相互作用。研究结果旨在为解析LolB在腐败希瓦氏菌中的功能和水产品腐败希瓦氏菌的靶向抑制提供新思路。 展开更多
关键词 腐败希瓦氏菌 外膜蛋白定位系统 外膜蛋白受体LolB 实时荧光定量PCR 生物信息学分析 环境胁迫
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外膜蛋白OmpU对副溶血弧菌耐药性的影响
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作者 孟祥宇 王建莉 +3 位作者 黄丹阳 周晴 檀昕 王小元 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期62-71,共10页
为了研究外膜蛋白OmpU对副溶血弧菌耐药性的影响,作者构建了副溶血弧菌中高丰度外膜蛋白OmpU缺失的突变株ΔompU。通过最小抑菌浓度(MIC)检测发现ΔompU对12种抗生素的耐药性发生变化,其中对氨苄青霉素的耐药性增加幅度最高。定量反转录... 为了研究外膜蛋白OmpU对副溶血弧菌耐药性的影响,作者构建了副溶血弧菌中高丰度外膜蛋白OmpU缺失的突变株ΔompU。通过最小抑菌浓度(MIC)检测发现ΔompU对12种抗生素的耐药性发生变化,其中对氨苄青霉素的耐药性增加幅度最高。定量反转录PCR显示,在氨苄青霉素刺激下,野生型副溶血弧菌与ΔompU中肽聚糖合成基因转录水平普遍下调,而编码β内酰胺酶的基因VP_RS17515在野生型中转录水平高于ΔompU。结果表明,副溶血弧菌通过表达β内酰胺酶并降低肽聚糖合成速度的方式应对氨苄青霉素刺激,而OmpU通过改变细胞膜通透性来影响氨苄青霉素的渗入。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 外膜蛋白 氨苄青霉素 耐药机制
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鱼类致病荧光假单胞菌外膜蛋白LolB多克隆抗体制备、鉴定与免疫活性分析
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作者 晁嘉 简思杰 +4 位作者 孙薇 陈锐 丁锐 陈琛 刘祥 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1521-1533,共13页
以荧光假单胞菌的外膜蛋白LolB为研究对象,评价其免疫学功能。生物信息学分析各菌株间LolB的亲缘关系;分子克隆构建LolB蛋白的表达菌株并确定最佳诱导表达条件;SDS-PAGE切胶纯化LolB蛋白并免疫红鲫;Western blotting检测红鲫LolB血清的... 以荧光假单胞菌的外膜蛋白LolB为研究对象,评价其免疫学功能。生物信息学分析各菌株间LolB的亲缘关系;分子克隆构建LolB蛋白的表达菌株并确定最佳诱导表达条件;SDS-PAGE切胶纯化LolB蛋白并免疫红鲫;Western blotting检测红鲫LolB血清的特异性与效价,ELISA体外模拟红鲫LolB血清与荧光假单胞菌的相互识别作用,免疫因子(ACP、AKP、LZM、IgM)与细胞吞噬作用测定,抗氧化因子(CAT、SOD、MDA、GSH-Px)、炎症因子(IL-1β、TNF-α)表达分析及组织病理学探究LolB蛋白的免疫保护作用。结果显示,LolB在假单胞菌属间同源性和亲缘性更近,LolB抗血清可能提供交叉免疫保护作用。原核表达纯化LolB蛋白,获得最佳诱导表达条件。红鲫LolB抗血清具有较好特异性,效价达1∶200;且抗血清与荧光假单胞菌在体外存在相互识别作用;免疫因子以及细胞吞噬作用均呈上升趋势,表明LolB激活红鲫的非特异性免疫。红鲫免疫LolB蛋白攻毒荧光假单胞菌后,抗氧化因子以及炎症因子呈下降趋势,表明LolB蛋白具有抗氧化和消炎作用;组织病理学切片显示LolB蛋白保护红鲫的肾脏、脾脏、肠道的完整性。荧光假单胞菌LolB具有良好的免疫原性,有望成为渔用疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 外膜蛋白LolB 主动免疫 组织病理学 红鲫
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嗜水气单胞菌外膜蛋白AHA2991的原核表达、纯化与免疫原性研究 被引量:1
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作者 简思杰 晁嘉 +4 位作者 孙薇 陈春琳 陆娟 刘勇 刘祥 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第4期876-884,共9页
【目的】评价嗜水气单胞菌外膜蛋白AHA2991的免疫学功能,为探索嗜水气单胞菌渔用疫苗候选抗原提供理论依据。【方法】通过生物信息学分析AHA2991氨基酸序列,揭示不同菌株间的亲缘关系;分子克隆构建AHA2991表达菌株并确定最佳诱导条件;... 【目的】评价嗜水气单胞菌外膜蛋白AHA2991的免疫学功能,为探索嗜水气单胞菌渔用疫苗候选抗原提供理论依据。【方法】通过生物信息学分析AHA2991氨基酸序列,揭示不同菌株间的亲缘关系;分子克隆构建AHA2991表达菌株并确定最佳诱导条件;包涵体洗涤及SDS-PAGE切胶纯化获得AHA2991并免疫红鲫;Western blotting检测AHA2991红鲫血清的特异性与效价;ELISA模拟AHA2991红鲫血浆与嗜水气单胞菌的体外相互识别作用;酸性、碱性磷酸酶(ACP、AKP)测定与细胞吞噬作用评价AHA2991非特异性免疫功能;组织病理学切片探究AHA2991免疫对红鲫内脏的影响情况。【结果】AHA2991蛋白家族在不同菌株间具有同源性,不同菌株间亲缘关系较近,尤其在气单胞菌间亲缘关系更近;AHA2991的最佳诱导条件为:菌液浓度OD600=1.0,IPTG终浓度0.1 mmol/L,在28℃下诱导8 h。红鲫AHA2991抗血清具有良好的特异性,其效价为1∶800;体外AHA2991血浆对嗜水气单胞菌具有识别作用,滴度可达1∶3200;ACP、AKP指标及细胞吞噬作用均显示AHA2991激活红鲫非特异性免疫;组织病理学切片表明AHA2991免疫对红鲫内脏结构无影响。【结论】嗜水气单胞菌AHA2991具有良好的免疫原性,有望成为嗜水气单胞菌渔用疫苗的候选抗原成分。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 外膜蛋白AHA2991 红鲫血浆 组织病理学 主动免疫
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