基于网络药理学与分子对接和体外试验探讨车前草治疗肝癌的作用机制

目的采用网络药理学结合分子对接及体外试验验证,探究车前草治疗肝癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法通过TCMSP和SwissTarget Prediction数据库获取车前草主要活性成分及潜在靶点,构建“成分-靶点”网络。检索DisGeNET和GeneCards数据库获取肝癌相关的疾病靶点,运用String数据库结合Cytoscape软件对交集靶点进行PPI网络分析,选取车前草主要活性成分与核心靶点进行分子对接验证。进一步通过体外肝癌Hep3B细胞试验验证车前草活性成分抗肿瘤活性,采用CCK-8试验、平板克隆形成试验及软琼脂克隆形成试验检测增殖抑制作用,采用K-LISAAKT活性试剂盒检测AKT活性水平,采用qRT-PCR检测mRNA的表达。结果车前草的活性成分有山萝花苷、6羟基木犀草素、豆甾醇、黄芩苷、豆甾醇棕榈酸酯、谷甾醇、木犀草素、黄芩素、高车前素和β-谷醇棕榈酸酯;获得车前草和肝癌交集基因168个,PPI网络图表明交集基因之间关系密切,其中潜在靶标为AKT1、TNF、ESR1、EGFR等;富集分析得到GO功能316个,以及相关通路94条,相关的通路主要有PI3K-AKT信号通路等;分子对接结果显示,主要活性成分木犀草素与核心靶点(AKT1、EGFR、TNF、ESR1、SRC、MAPK3)结合稳定。体外试验结果显示,木犀草素对肝癌细胞具有抑制增殖作用,干预肝癌细胞克隆形成以及降低AKT信号通路的活性,且BCL2、FASL等凋亡相关基因mRNA表达升高。结论车前草能够通过多靶点、多通路治疗肝癌,其主要活性成分为木犀草素。木犀草素可能通过抑制AKT1等关键靶点从而抑制PI3K-AKT信号通路,进而达到抑制肝癌细胞增殖、促进凋亡的作用,具有潜在的抗肝癌活性。

玉米肽的醒酒活性体外试验及其醒酒机理研究

为研究玉米肽的醒酒机理,找到筛选高醒酒活性玉米肽的便捷的体外试验方法,考察了在体外试验中,玉米肽对乙醇脱氢酶(ADH)活力的影响及对羟基自由基(.OH)的清除作用,并与动物试验比较,结果显示三种方法基本吻合。玉米肽在体外试验中可激活ADH,具有良好地抑制.OH的能力,玉米肽中含有较高比例的丙氨酸、亮氨酸,尤其是亮氨酸。结论:可以通过测定玉米肽对ADH的激活率及对.OH的抑制率这两个体外试验,从不同蛋白酶酶解玉米肽及不同水解度的玉米肽中筛选出高醒酒活性肽。玉米肽的醒酒作用机制与其能激活ADH、清除.OH及其较高比例的丙氨酸、亮氨酸组成有关。

不同茶样冲泡浸出液对NO_2^-清除作用的体外试验研究

本实验以绿茶、乌龙茶等八个茶样为试材,在体外模拟胃液 pH 条件下,测定自然冲泡下不同浓度茶样浸出液对 NO-2的清除率。结果表明,各茶样对 NO-2均有良好的清除效果,在较低的固液比时清除率随浓度的增加而增加;在 8 个茶样中,以下关沱茶、乌龙茶和绿茶对 NO-2清除效果最好;多酚类是主要活性成分,但清除作用仍受多因素影响;固液比 1∶50~1∶100 为饮茶的较好浓度。

茶及茶多酚对NO_2^-清除作用的体外试验研究

茶鲜叶、绿茶和茶多酚在体外模拟胃液pH条件下对NO2-有很强的清除作用,清除率随处理时间延长而升高。在各处理茶多酚浓度为0.01%～0.16%范围内,其清除率分别超过81.0%,91.7%和77.3%,茶鲜叶和绿茶提取液的清除效果优于同浓度的纯茶多酚。在不同pH条件下,纯茶多酚对NO2-的清除率呈"凹形"曲线变化,在pH4～5之间清除率较低,而鲜叶及绿茶提取液对NO2-的清除率受pH变化的影响较小。

中草药抗癌的体外试验

以抑制细胞增殖为检测指标，用人体癌细胞株为供试体，比较了ＡｌａｍａｒＢｌｕｅＡｓｓａｙ（ＡＢＡ）检测方法，３Ｈ胸苷标记（３ＨＴ）检测方法和５溴２脱氧尿苷标记（５ＢｒｄＵ）酶联免疫检测方法的效果，对虎杖、穿心莲、仙鹤草和白花蛇舌草等４种中草药的抗癌活性进行了测试。结果显示ＡＢＡ作为一种检测细胞增殖的方法，具有快速、易操作和重复性好的特点。比较被测试的几种人体癌细胞株，以肠腺癌细胞株ＳＷ６２０对４种中草药提取物的反应最为敏感，而乳腺癌细胞株ＭＣＦ７的反应较弱。４种中草药提取物对肝癌细胞株ＨｅｐＧ２均有不同程度的明显的增殖抑制作用，而对肠腺癌细胞株ＬＳ１８０的增殖抑制作用只有在较高的浓度下才表现出来。仙鹤草和白花蛇舌草提取物对肠腺癌细胞株ＨＴ２９在实验浓度范围内无抑制作用，而仙鹤草提取物对肠腺癌另一细胞株ＳＷ６２０的增长抑制作用却很强。

水牛唾液对瘤胃消化代谢影响的体外试验研究

从 6头装有瘤胃瘘管的公水牛收集瘤胃液和唾液 ,加干草粉作底物 ,进行体外厌氧培养。每隔 2h采样测pH、挥发性脂肪酸 (VFA)、氨氮 (NH3 N)、微生物粗蛋白 (MCP) ,并在培养结束后测干物质 (DM)和酸性洗涤纤维 (ADF)消失率。结果显示 ,与人工唾液相比 ,唾液使草粉DM和ADF消失率分别提高 17 95 % (P <0 0 1)和 15 30 % (P <0 0 1) ;培养液中MCP、NH3 N、总挥发性脂肪酸 (TVFA)分别增加 9 16% (P >0 0 5 ) ,12 2 4% (P >0 0 5 )和10 5 4% (P <0 0 5 ) ,乙酸和丙酸比例及pH无明显差异。上述结果表明 ,体外培养条件下 ,唾液能明显促进瘤胃微生物消化DM和ADF产生VFA ,并有促进MCP合成和NH3

输血后静脉输液港所需冲洗液量的体外试验研究

目的探讨输血后需要多少冲洗液量和如何冲洗才能冲净静脉输液港内残留的血液。方法用静脉输液港输完100 ml悬浮红细胞后,用输血器直接接生理盐水自然输注冲管和用10 ml注射器抽吸生理盐水进行脉冲式冲管,观察冲洗液量及输液港内血液的残留量。结果用输血器直接接生理盐水自然输注冲管者,输入生理盐水200 ml后,输液港的穿刺座内仍有沉积性血迹。用10 ml注射器抽吸生理盐水进行脉冲式冲管,当冲洗到5 ml后输液港的穿刺座和导管清亮。结论用静脉输液港输血或输入两种不相容药物时必须用10 ml生理盐水进行脉冲式冲管,才能冲净输液港内的残留物,保证永久性导管的通畅。

体外试验中不同粗精比对山羊瘤胃细菌氨态氮利用效率的影响

利用体外发酵法研究了4种粗精比(10∶0、8∶2、6∶4和4∶6)底物对山羊瘤胃细菌产量、15NH3-N利用效率的影响。结果表明:混合培养液的pH值与氨态氮浓度在8h内急剧下降,而后至24h呈缓慢下降;经24h培养的细菌产量在8∶2、6∶4和4∶6组中差异不显著(P>0.05),但都极显著地高于10∶0组(P<0.01);细菌体15N丰度以8∶2及4∶6组较高,显著高于10∶0和6∶4组(P<0.05);细菌体15N富集量以8∶2组最高,底物547.43μg15N中有120.44μg被细菌体富集,显著高于10∶0组(P<0.05),但6∶4、4∶6组与10∶0组间差异均不显著(P>0.05)。细菌赖氨酸的相对百分组成随精饲料比例的增加而显著增加,胱氨酸在粗饲料组(10∶0)显著高于其它组,但各精饲料添加组间差异不显著,组氨酸以8∶2组为最高,显著高于10∶0组,但与其它精饲料添加组间差异不显著(P>0.05)。

拒染法恶性肿瘤药物体外试验的改进

台盼兰拒染法测定肿瘤细胞对化疗药物的敏感和耐受情况,方法简单而快速,但细胞活力结果偏高。本文将染料改为固绿,同时加鸭红细胞作为内标,以矫正细胞崩解和增殖导致的细胞活力偏高,从而对台盼兰拒染法进行改进。

双氢青蒿素对阴道毛滴虫作用的体外试验研究

目的 观察双氢青蒿素体外抗阴道毛滴虫作用。方法 将阴道毛滴虫与不同质量浓度的双氢青蒿素共同孵育 2 4 h、4 8h、72 h后 ,观察双氢青蒿素体外抗阴道毛滴虫作用。结果 最低杀灭剂量为 2 .5 m g/m l,最低抑制剂量为 1.2 5 m g/ml。结论 双氢青蒿素体外对阴道毛滴虫具有较强的杀灭作用 。

拉索式血管分流装置设计及体外试验

目的 :研制一种拉索式血管分流装置,用于处理四肢血管离断并缺损时肢体远端的临时缺血。方法 :设计一种新型拉索式单向绞索扣,装置内卡齿间距0.5 mm,有止退功能,只能越扎越紧,更方便快捷并牢固固定血管与分流管。用拉索式绞索扣合并硅胶管连接缺损血管两端,通过血管爆破压、抗拉生物力学试验比较其与常规缝线结扎合并硅胶管连接方法的效果差异。结果:经拉索式绞索血管分流装置固定的血管在血管爆破压、抗拉生物力学方面均优于传统缝线并硅胶管分流装置,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:该拉索式绞索血管分流装置可简单有效地恢复离断并缺损的四肢血管,快速恢复远端肢体缺血,为后送至有条件的医院进行血管移植创造有利条件。

尿酸盐沉积机理的体外试验

尿酸盐沉积机理的体外试验１）王健邓茂先李前勇黎晓敏贾仁勇谢珍（四川畜牧兽医学院荣昌６３２４６０）痛风（ｇｏｕｔ）通常是指由营养性、传染性及中毒性因素所致家禽内脏或关节的尿酸（盐）沉积，是家禽的常见病，不同年龄的各种家禽均可发生。尿酸是禽类蛋白质及嘌呤...

金丝桃素和盐酸赖氨酸抗疱疹病毒作用体外试验研究(英文)

目的:通过评价金丝桃素、盐酸赖氨酸体外抗疱疹病毒活性,为进一步研究疱疹后遗神经痛(PHN)以及继发抑郁的治疗提供更多理论支持。方法:采用对病毒所致细胞病变(CPE)抑制法,观察金丝桃素和盐酸赖氨酸对Vero细胞和2BS细胞的细胞毒性,以及对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和水痘-带状疱疹病毒(VZV)的抗病毒活性。结果:金丝桃素对HSV-1和VZV抑制的最小有效浓度和治疗指数相同,分别为0.39mg/L和32;盐酸赖氨酸对HSV-1和VZV抑制的最小有效浓度都是19.5mg/L,治疗指数分别为64和129。结论:金丝桃素和盐酸赖氨酸在体外具有抗HSV-1和VZV作用。

苦丁茶对NO_2^-和·OH清除作用的体外试验研究

以粗壮女贞苦丁茶[Ligustrum rbutum(Roxb)B lum e]、大叶冬青苦丁茶(IlexlartifoliaThunb)为试材,在体外模拟胃液pH条件下,对比研究了不同冲泡条件下苦丁茶浸出液对NO2-和.OH的清除效果。结果表明,不同处理的茶样对NO2-的清除作用多随冲泡温度上升或冲泡时间延长而增强;磨碎冲泡的清除效果比直接冲泡好;大叶冬青苦丁茶对NO2-的清除作用优于粗壮女贞苦丁茶。但粗壮女贞苦丁茶对.OH的清除作用较大叶冬青苦丁茶好,直接冲泡对.OH的清除效果略比磨碎冲泡好,较好的冲泡温度在80~90℃。

壳聚糖/肝素共价包被先天性心脏病介入封堵材料血液相容性的体外试验研究

目的:体外评价壳聚糖/肝素(Chi/Hep)共价包被先天性心脏病介入封堵材料的血液相容性。方法:实验分成血液对照组、未包被组、基础包被组(壳聚糖)、Chi/Hep包被组,其中按肝素浓度又分为低又分为低、中、高(0.1、1.0、10.0g/L)3个剂量组。Chi/Hep共价交联于试验用镍钛金属表面,通过血液溶血试验,观察红细胞细胞毒性;动态全人血接触试验检测各样本部分凝血活酶活化时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原、凝血酶时间(TT)、D-二聚体观察其抗血栓性能;扫描电子显微镜观察镍钛金属表面血小板黏附、聚集。结果:实验各组红细胞、白细胞、血小板计数均在正常范围内且组间未见明显差异,实验组溶血率均小于5%。Chi/Hep包被组APTT、PT、TT、均明显延长,其余各组两两比较未见明显差异,肝素浓度包被之间差异亦无显著性。扫描电镜显示,Chi/Hep包被组金属表面少量血小板黏附。结论:Chi/Hep包被先天性心脏病介入封堵材料有利于预防血栓形成,减少血栓形成风险。

阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体的制备及体外试验

目的研制阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体,并研究分析其体外药物缓释性能及对OS-9001骨肉瘤细胞的抑制能力。方法按Urist等的方法制备异体脱钙骨基质骨粒,通过冻干、真空吸附等处理,将阿霉素载入其中并与骨水泥按1:1比例复合,制得阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体,对该缓释体进行体外药物释放及其浸出液的体外抑瘤试验。结果该缓释体第1天释放量为总含量的19.23%,其第1、20、40及70天的浸出液对OS-9901骨肉瘤细胞的抑制率分别为64.27%、41.68%、28.71%及24.32%。结论该缓释体具有良好的缓释功能,在70d内对OS-9901骨肉瘤细胞维持良好有效的抑制率。

奥美拉唑对胃癌上皮细胞株、幽门螺杆菌及空泡毒素作用的体外试验

目的 :通过奥美拉唑对胃癌上皮细胞、幽门螺杆菌 (Hp)菌株生长及空泡毒素 (VacA)毒性的影响 ,探讨其临床应用价值。方法 :应用不同浓度奥美拉唑和细胞、细菌及VacA共孵育方法观察细胞、细菌的生长状况及空泡毒性的变化。结果 :(1)当奥美拉唑浓度 >10 0mg·L- 1时 ,细胞 10 0 %死亡 ;低于4 0mg·L- 1时 ,光镜下未见上皮细胞的形态学改变。(2 )当奥美拉唑≥ 10 0mg·L- 1时 ,细菌生长完全被抑制 ;低于 30mg·L- 1,细菌的生长不受影响。 (3)低浓度奥美拉唑 (10～ 4 0mg·L- 1)能部分抑制Va cA毒素对SGC 790 1的空泡作用 ,但不抑制毒素对HeLa细胞的空泡毒性作用。结论 :抑制Hp生长所需的奥美拉唑浓度对胃上皮细胞也有损伤作用 ,对空泡毒素无显著的抑制作用 ,临床上只能应用低剂量奥美拉唑 ,通过抑制胃酸分泌治疗酸相关疾病 。

乳酸菌分解草酸体外试验与影响因素

目的研究乳酸菌菌种在体外培养基中的草酸分解能力和耐草酸生长能力。方法鉴定6种市售品牌酸奶所含的乳酸菌菌种。将不同品牌的酸奶分别接种在MRS培养基中,37℃、5%CO2培养48h,平板计数法分别测得乳酸菌的浓度,选择乳酸菌浓度最高的酸奶品牌作为研究对象。将各纯菌种和从选定的品牌酸奶中培养所得的混合乳酸菌分别接种在3种不同草酸浓度的MRS液体培养基中,设置空白对照组,培养72h后检测培养基中乳酸菌数量的变化,铬酸钾氧化甲基红催化光度法测量草酸浓度变化。结果市售品牌酸奶均含有3种乳酸菌(保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌),其中味全牌酸奶所含乳酸菌数量最多。经过72h培养,所有培养基中的草酸浓度都有不同程度的下降,但乳酸菌组的降幅明显大于对照组,其中嗜酸乳杆菌组的降幅最大。环境草酸浓度越高,乳酸菌的草酸分解绝对量也越大,但相对分解率越低,乳酸菌繁殖速度减慢。结论市售酸奶中所含的乳酸菌种均具有草酸分解能力,并随着环境草酸浓度的增加而增加;但高草酸浓度使乳酸菌的生长趋缓。

荣昌猪盲肠微生物消化粗纤维的体外试验研究

将羧甲基纤维素(CMC)、稻草粉、稻草秆作底物,分别与5头空怀荣昌母猪的盲肠内容物上清液一起,进行体外液体或半流体培养,以灭菌的上清液培养作空白对照,观察荣昌猪盲肠微生物对粗纤维的消化能力.试验结果:CMC培养液中有还原糖产生,并在培养20～24h达到峰值;培养72h后,稻草粉、稻草秆液体和半流体培养,试验组干物质(DM)、酸性洗涤纤维(ADF)、纤维素(CL)消失率均高于空白对照组;半流体培养,稻草粉DM、ADF、CL净消失率和稻草秆DM净消失率都明显高于液体培养;两种培养状态下的稻草粉DM净消失率都高于稻草秆.结果表明:体外培养条件下,荣昌猪盲肠微生物有较强的消化粗纤维的能力;