外酶C3转移酶转基因表达对小梁细胞的影响

目的:探讨腺病毒载体介导的外酶C3转移酶(exoenzyme C3 transferase,C3)表达对体外培养的正常或地塞米松处理的人类小梁细胞的作用.方法:构建C3和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒表达载体(AdC3GFP).用AdC3GFP转导人类正常或经地塞米松处理的小梁细胞.观察(1)小梁细胞肌动蛋白、粘着斑蛋白(vinculin)、β-链蛋白(β-catenin)的变化;(2)地塞米松能否诱导小梁细胞形成肌动蛋白交联网(cross linked actin networks,CLANs)结构以及AdC3GFP对CLANs的影响.以仅表达GFP的腺病毒载体(AdGFP)作为对照.结果:与对照相比,AdC3GFP转导小梁细胞后3～4d细胞出现肌动蛋白细胞骨架裂解,相应粘着斑蛋白阳性的粘着斑减少和β-链蛋白染色丧失.与非转导细胞相比,AdGFP转导细胞肌动蛋白细胞骨架,粘着斑蛋白和β-链蛋白染色均与非转导细胞类似.经地塞米松处理的小梁细胞形成典型CLANs结构,AdC3GFP可降解肌动蛋白及已形成的CLANs结构.结论:C3基因表达产物可降解小梁细胞肌动蛋白和细胞连接以及由地塞米松诱导的小梁细胞CLANs形成.提示C3基因治疗可能是青光眼降眼压治疗的有效方法.