细胞外钙受体的结构特点以及临床应用的新领域

细胞外钙受体 (CaR)对调节机体细胞外钙 (Ca2 + o )平衡发挥着重要作用。CaR属于由G蛋白介导的受体 ,是由 10 79个氨基酸组成的多肽。CaR广泛分布于甲状旁腺、甲状腺C细胞、肾脏、肠、骨等参与钙调节的重要器官 ,其基因缺损可导致钙调节紊乱。由于CaR的生理意义非常重要 ,它已成为治疗钙代谢紊乱性疾病的靶点。CaR拮抗剂和激动剂可分别用于治疗甲状旁腺机能亢进、骨质疏松症和肾结石 。

电针对脑缺血大鼠VEGF及Flk-1表达和细胞外钙离子浓度的影响

目的 :观察电针对急性脑缺血大鼠血管新生和细胞外钙离子浓度的影响。方法 :33只雄性Wistar大鼠随机分成正常组、模型组和电针组各 11只。复制急性大脑中动脉缺血模型 ,电针组针刺百会和水沟穴 ,每天 1次 ,共 6次 ,免疫组织化学方法观察血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体Flk 1的表达 ;采用中医传感针测定脑组织细胞外钙离子的浓度。结果 :模型组梗死灶周围VEGF和Flk 1表达增强 (P <0 .0 5 ) ,脑组织局部细胞外钙离子浓度显著降低 (P <0 .0 1) ;电针组治疗后与模型组比较 ,VEGF和Flk 1表达增强 (P <0 .0 5 ) ,而脑组织局部细胞外钙离子浓度升高 (P <0 .0 5 )。结论 :电针可以增强急性脑缺血大鼠梗死灶周围VEGF、Flk 1的表达和升高局部细胞外钙离子浓度 ,从而减轻缺血后脑损伤 ,促进脑功能的康复。

珠网膜下腔注射2-氯腺苷对脊髓损伤后细胞外钙的影响

目的观察腺苷对大鼠脊髓损伤后脊髓组织细胞外钙的影响，探讨腺苷对脊髓损伤的保护机理。方法脊髓腹侧压迫法造成大鼠 T13脊髓中度损伤，用微透析法收集损伤前后的脊髓组织细胞外液，用原子吸收光谱分析法测定收集液中的钙离子浓度，治疗组于伤前 15 min蛛网膜下腔注射腺苷受体激动剂 2－氯腺苷（ 2－CADO），对照组注射同量的生理盐水。结果脊髓损伤后脊髓组织细胞外钙立即下降，而治疗组较对照组显著改善。结论腺苷通过抑制钙离子内流从而对脊髓起保护作用。

钙池排空操纵的外钙内流决定甘草诱导MGC-803细胞凋亡

用 EGTA螯合胞外 Ca2 +和异搏定抑制钙通道 ,研究胞外 Ca2 +在甘草诱导 MGC- 80 3细胞中的作用 .流式细胞仪检测凋亡峰和 DNA ladder分析均表明 ,EGTA和异博定阻断细胞凋亡 .分别以 PI或 Rh1 2 3活染后的相应荧光强度表示细胞膜通透性和线粒性膜电位 (ΔΨm) .结果表明 ,细胞膜通透性增强和线粒体 ΔΨm 下降均为细胞凋亡的早期事件 ,EGTA和异博定均可抑制细胞膜通透性增强 ,但 EGTA促进线粒体 ΔΨm 下降 ,而异博定作用相反 .进一步经 PI和 Hoechst33342荧光双染后同时观察细胞膜通透性和细胞核形态 .结果表明 ,凋亡细胞均可 PI着色 ,EGTA和异博定完全阻断染色质凝聚 ,但不能完全抑制细胞膜通透性变化 .借助 Ca2 +探针 Fluo- 3/AM研究凋亡时胞内游离钙的时相变化 ,发现 Ca2 +升高也是细胞凋亡的早期事件 . EGTA和异博定轻微促进凋亡早期 Ca2 +升高 ,但抑制随后 Ca2 +的继续升高 .所有结果提示 ,钙池排空操纵的外 Ca2 +内流在甘草诱导 MGC- 80 3细胞凋亡中发挥决定性的作用 .

皂苷提取物宫血宁缩宫作用与细胞外钙内流关系的研究

目的探讨皂苷类提取物宫血宁引起的大鼠离体子宫收缩作用与细胞外钙内流的关系。方法应用离体子宫张力测定法,观察不同Ca2+浓度及Ca2+通道阻滞剂对宫血宁引起的大鼠离体子宫收缩作用的影响。结果无钙的台氏平衡液中,宫血宁的浓度从25μg/ml增至200μg/ml都不能引起大鼠离体子宫节律性收缩;在半钙和全钙的台氏平衡液中宫血宁能引起大鼠离体子宫节律性收缩,并与宫血宁的剂量呈显著正相关;Ca2+通道阻滞剂能明显抑制宫血宁和缩宫素引起的子宫收缩,但同缩宫素相比,宫血宁引起的子宫收缩对Ca2+通道阻滞剂更敏感。结论皂苷类提取物宫血宁的缩宫作用依赖于细胞外钙的存在,其作用机制可能是通过促进平滑肌细胞外钙内流来实现的。

胞外钙信使

胞外钙信使张骁宋纯鹏王天仕（河南大学生物系开封，４７５００１）细胞信号传导是膜脂上受体结合信息分子后引起核内反应的整个过程。按照Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄ（１９７２）建立的模型，环境刺激及其诱导产生的激素等胞外信使（第一信使）作用于细胞膜上，通过膜上受体、...

细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究

为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Westernblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺,负性变构调节剂Calhex231,通过钙荧光探针(Fura-2/AM)负载HUVEC检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。结果显示:(1)HUVEC中有CaR的表达。(2)在Fura-2/AM负载HUVEC中加入精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0.24±0.01,先加入Calhex231作用1min后再加入Calhex231+精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。由此可知,CaR调节HUVEC游离钙离子浓度。

小凹蛋白-1和细胞外钙敏感受体在人脐静脉内皮细胞小凹共定位研究

前期研究发现小凹蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)和细胞外钙敏感受体(extracellular Ca2+-sensing receptor,CaR)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)膜上有共定位,且Cav-1下调CaR介导的钙内流。本实验探讨HUVECs中Cav-1与CaR的亚细胞定位,可为进一步机制研究提供理论依据。以3~4代HU-VECs随机分为2组:(1)对照组;(2)甲基-β-环糊精(MβCD)处理组,分别采用蔗糖密度梯度离心和Western blot技术提取含小凹膜碎片和检测Cav-1和CaR蛋白的表达。结果显示,(1)MβCD处理组HUVECs细胞中Cav-1和CaR蛋白的表达与对照组相比无差异(P>0.05)。(2)MβCD处理组小凹区Cav-1和CaR蛋白的表达低于对照组(P<0.05)。由此可知,Cav-1和CaR蛋白共定位于HUVECs的小凹区,MβCD可抑制两者在小凹的共定位。

细胞外钙受体及其在心血管系统中的作用

细胞外钙受体也称为钙敏感受体(extracellular calcium sensing receptor,CaR),对调节机体细胞外钙的平衡发挥着重要作用。该受体不仅分布在甲状旁腺、骨、肾、肠这些与钙转移和钙稳态调节有关的器官,还广泛分布于许多其他与钙的稳定无关的组织细胞中,并通过PLC,PIK和MAPK等细胞内信号转导途经起着除钙稳态调节以外重要的细胞内作用,如保护细胞抗凋亡、细胞增殖等生物学作用,在心血管系统中,CaR也有重要的生理病理作用,本文综述了近些年关于CaR的结构、功能和信号转导及它在心血管系统中的作用。

胞外钙对豚鼠耳蜗Deiters细胞钾电流的调制

为观察胞外钙对豚鼠耳蜗单个离体Deiters细胞钾电流的调控作用并探讨其机制,实验记录了:Deiters细胞在正常细胞外液和无钙外液中的全细胞钾电流(whole cell K+ currents,Ik),并分析了其电生理学特性的改变。结果观察到,Deiters 细胞与在正常细胞外液中相比,在祛除细胞外液中的Ca2+后,IK电流幅值明显增加,弦电导值亦明显增加,但其平衡电位未明显改变。在无钙外液中,Ik电流的反转电位向超极化方向明显移位,更接近于按照Nernst方程得出的K+理论平衡电位;而且其稳态激活曲线亦向超极化方向明显移位,但其激活趋势与正常相比无明显改变。此外,观察了Deiters细胞中钙抑制性钾电流的电流-电压关系和电导-电压关系,发现两者均呈“S”形,提示此钙抑制性钾电流可能存在2种不同的钾电导成分。由此,推测可能有两种机制参与胞外钙对Deiters细胞钾电流的调控:(1)Deiters细胞中的IK通道可能存在一个Ca2+敏感结构域,胞外Ca2+可能通过改变此结构域而对IK电流产生调制;(2)Deiters细胞中可能存在一种新型的双相门控性钾通道或钾通道耦联型受体或是一种新型的钾通道亚型,祛除胞外Ca2+可激活此新型钾电导而对IK电流产生调制。由此推测,在听觉形成过程中,胞外钙浓度下降可以对Deiters细胞的全细胞钾电流产生调制,从而更有利于Deiters细胞内K+外流,进而有效地缓冲外毛细胞周围的K+浓度;而且还可以使Deiters细胞产生更快的复极化并有利于维持其静息状态。

淋巴细胞外钙内流机制

钙离子作为生物体的“第二信使”,其浓度的变化作为一个重要的生理信号,影响着细胞诸多生理功能,所以研究胞内钙浓度的调节机制有着十分重要的意义。对于非兴奋细胞——淋巴细胞的胞钙调节机制,国内报道甚少。因此,该文将对淋巴细胞的外钙内流机制的提出、验证及其机理做一简要介绍,并提出了这一研究领域可能的发展前景。

升高细胞外钙离子能抑制和促进细胞凋亡的发生

钙离子是细胞分裂、生长、死亡过程中重要的信号传导分子 .为研究胞外钙离子与细胞凋亡的关系 ,将Ca2 + (5～ 7mmol)加入无血清培养液观察钙离子对无血清诱导人胚肺二倍体细胞株KMB17凋亡的影响 ;并将Ca2 + (5～ 7mmol)加入含体积分数为 2 %血清的脊髓灰质炎病毒 (poliovirus)生长培养液中 ,研究胞外钙离子对poliovirus诱导凋亡的影响 .经光学显微镜、荧光显微镜、细胞流式仪、电子显微镜分析 ,结果表明 :①加入钙离子的无血清培养未出现凋亡 ,而未加入钙离子的无血清培养则诱导典型的细胞凋亡症状 :细胞圆缩、细胞核浓缩破裂、核染色质凝缩后分布于核膜边缘呈新月状、在G0 /G1峰前出现典型的凋亡峰 .②与此相反 ,在po liovirus的培养液加入钙离子则反而促进poliovirus诱导的人胚肺二倍体细胞株KMB17凋亡的发生 ,表现在加入钙离子后 2 4h就出现凋亡 ,而未加入钙离子的在 48h后才出现凋亡 .首次报道同一细胞株在不同条件下 ,升高胞外钙离子即能抑制凋亡 ,又能促进凋亡 .

细胞外钙受体在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中细胞外钙受体(CASR)mRNA及蛋白表达水平变化及其意义。方法采用免疫组化方法和免疫荧光及RT-PCR技术分别检测妊娠期高血压疾病患者65例(妊娠期高血压组22例,子痫前期轻度组24例,重度组19例)及健康足月孕妇30例(对照组)胎盘组织中CASR的定位、mRNA及蛋白表达水平。结果(1)CASR主要位于胎盘细胞滋养细胞、绒毛滋养细胞及血管内皮细胞上。(2)妊娠期高血压组患者胎盘组织中CASR的mRNA表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(q=7.07,P=0.0004)。子痫前期轻度组和子痫前期重度组,两组比较,差异也有统计学意义(q=20.96,P<0.0001)。(3)CASR的蛋白在妊娠期高血压组患者胎盘组织中表达水平为59.0532±8.039,对照组为54.8585±4.3035,两组比较,差异无显著性(q=0.08,P=0.7759)。而子痫前期轻度组、子痫前期重度组两组比较,差异有统计学意义(q=16.18,P<0.0001)。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中CASR的mRNA表达激活及CASR的蛋白异常表达,导致妊娠期高血压疾病的发病和胎盘病理改变的发生发展。

细胞外钙受体相互作用蛋白的研究进展

细胞外钙受体(CaR)为G蛋白偶联受体超家族中的成员,它的大部分作用是以Gαi,Gαq和Gα12/13为中介的,但由G蛋白α亚基介导的作用并不能完全解释CaR的生物学效应。与CaR相互作用蛋白如抑制蛋白、G蛋白受体激酶、受体激活修饰蛋白、丝蛋白、钾通道、小窝蛋白等结构和信号蛋白赋予CaR独特的信号转导特征,并能够更充分说明CaR在不同组织和细胞中所发挥的作用。本文将对上述几种与其相互作用蛋白及它们所产生的生物学效应做一综述。

细胞外钙受体(CAS)调控植物光合作用及逆境响应的研究进展

细胞外钙受体(Calcium-sensingreceptor,CAS)是一种定位在类囊体膜上的特异性蛋白,通过感知胞外Ca2+浓度的变化调控胞内Ca2+响应,进而影响下游一系列信号活动,使植物体对外界环境作出反应。综述了植物CAS发现历程、结构、定位以及影响植物的气孔开闭、参与光合作用,调控逆境响应等方面研究进展,以期为深入研究植物中CAS调控逆境响应的生物学功能提供参考。

细胞外高钙致鸡肾小管上皮原代培养细胞损伤的试验研究

建立了鸡原代肾小管上皮细胞的培养方法,作为高钙对肾小管损害的体外研究模型。在此模型上应用不同浓度的钙进行处理,通过MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法观察对细胞活性和细胞膜的损伤情况。结果表明,分别用 2.5(试验组Ⅰ)、4.0(试验组Ⅱ)、5.5(试验组Ⅲ)、7.0(试验组Ⅳ)、8.5(试验组Ⅴ)和10.0mmol·L-1(试验组Ⅵ)Ca2+处理细胞,各组的细胞活性与对照组相比均显著降低(P<0.01),且细胞外钙浓度越高,细胞活性降低越明显。但用不同浓度的Ca2+处理细胞,对培养液中LDH的活性影响不明显。这些结果说明,细胞外高钙能够直接损害肾小管上皮细胞,但不是通过损伤细胞膜的方式来实现的。

经外周中心静脉置管补钙防止新生儿钙液外渗的应用观察

目的观察新生儿经外周中心静脉置管补钙对钙液外渗的保护作用,探求一条有效防止钙液外渗的新途径。方法将127例新生儿按照补钙途径分为外周静脉组和外周中心静脉置管组,其中外周静脉组62例,外周中心静脉置管组65例,观察两组钙液外渗的发生率。结果外周静脉组有6例出现不同程度的钙液外渗,而中心静脉置管补钙的患儿中,未有钙液外渗发生,差异具有统计学意义。结论与传统外周静脉补钙相比,经外周中心静脉置管补钙更为安全,可有效减少钙液外渗的发生,减少医疗纠纷。