日本血吸虫多价分子疫苗的保护性免疫力研究

本实验将从日本血吸虫成虫分离纯化出的２８ｋＤａ、３１／３２ｋＤａ及９７ｋＤａ蛋白混合组成多价分子疫苗免疫小鼠，再行攻击感染，观察其保护性免疫力。结果：疫苗加佐剂组成虫减虫率、肝组织减卵率及肠壁组织减卵率分别为５０．３％、７２．０％和８１．５％，均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）；实验组肝虫卵肉芽肿较对照组炎症反应程度轻，虫卵肉芽肿周长及面积均低于对照组（Ｐ＜０．０１）。结果提示，由日本血吸虫成虫２８ｋＤａ、３１／３２ｋＤａ及９７ｋＤａ蛋白联合组成的多价分子疫苗，具有较高的减虫率、减卵率及抑制虫卵肉芽肿形成的作用。

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符；其蛋白含量分别为０．３５ｍｇ／ｍｌ，０．４ｍｇ／ｍｌ和０．３ｍｇ／ｍｌ；Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ均为单一反应区带；ＥＬＩＳＡ反应滴度分别为１∶６４０、１∶１２８０和１∶３２０。结果说明，由制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗析方法制备的日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白多价分子疫苗，具有纯度高、制备快、回收率高等优点。

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其抗原性的研究

目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28KD、31/32KD及97KD蛋白。经BCA法检测蛋白含量,SDS-PAGE检测蛋白纯度和分子量,Western-blot及ELISA检测其抗原活性。结果:日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;West-ern-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:由制备型SDS-PAGE和电渗析方法制备的日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。