中国大陆日本血吸虫品系的研究——Ⅵ.多位点酶电泳分析

本文对中国大陆的安徽、湖北、广西、四川、云南5地日本血吸虫的自然隔离群体进行了多位点酶电泳分析。检测了GDH、G6PD、LDH、MDH、PGI、PGM、SOD 7种同工酶的9个基因位点,其中LDH-1、LDH-2、MDH和PGM位点存在两个以上不同等位基因。结果显示多态位点所占的比例为44.4％,说明在大陆境内日本血吸虫的自然隔离群体中存在着不同程度的遗传多态现象。

天山根瘤菌（Rhizobium tianshanense）全细胞蛋白电泳和多位点酶电泳分析

用全细胞可溶性蛋白电泳和多位点酸电泳对１５株天山根瘤菌（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｔｉａｎｓｈａｎｅｎｓｅ）和其它１０株快慢生根瘤菌进行聚类分析，结果表明Ｒ．ｔｉａｎｓｈａｎｅｎｓｅ种内菌株关系密切而与其它种不同。分析时将全细胞蛋白电泳图谱分为２５４等份，根据每等份内条带的有无进行聚类，结果与数值分类基本一致，说明用该方法对全细胞蛋白电泳结果进行聚类可以作为根瘤菌的分群手段；用所有出现的１０９种迁移率对１７种多位点酶的电泳结果作聚类分析，得到与全细胞蛋白电泳相似的结果。

多位点酶切联合SSCP方法检测结核杆菌inhA基因突变

目的 建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变。方法 收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株。抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性内切酶Hae Ⅱ酶切,酶切片段用单链多态构象分析(SS-CP)方法检测其单链构象。发现单链构象改变的PCR产物进行DNA测序。结果 48株菌株中,25株敏感株中未见inhA基因单链构象差异,23株耐药株中inhA基因突变率为21.8％。新发现的错义突变有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T。结论 应用限制性内切酶Hae Ⅱ改良的聚合酶链反应—单链多态构象分析(PCR—SSCP)技术适用于结核临床菌株inhA基因突变的筛选。inhA基因突变位点呈多样性。

多位点酶电泳在黄芪根瘤菌分类中的应用

报导了分析根瘤菌各种多位点酶的电泳缓冲系统和染色方法，并对黄芪根瘤菌进行了分类研究，结果表明：采用多位点酶电泳图谱进行聚类可得到与数值分类基本一致的结果，证实这是一种行之有效、简便快速的分类方法．

志贺菌多位点酶电泳分析

目的 :研究志贺菌基因型和群体遗传学结构。方法 :采用多位点酶电泳 (MEE)法对江西铜鼓县及郑州近 5a分离的 5 9株志贺菌散发株进行多位点酶基因分类和群体遗传学研究。共测定 4种代谢酶。结果 :5 9株菌共分为 4 6个电泳型 (ETs) ,聚类分析显示 4 6个ETs 归属于 1 0个克隆系 (CLa～CLj)。两地菌株分属几个紧密相连的克隆系 ,不同年代的菌株有优势克隆系存在。群体遗传结构分析表明 ,被测 4种代谢酶基因位点均具多态性 ,平均杂合度 (h) 5 .5 ,平均遗传多态值 (H) 0 .6 37。两地菌株h和H之间差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :每个酶基因位点都有一个优势等位基因 ,提示在志贺菌进化演变过程中以自然选择为主 ,不同年代的宋内菌聚在一个亚克隆系内 。

海南快生根瘤菌蛋白、多位点酶及质粒电泳

在本室以前的研究中，海南快生根瘤菌具有分类上的多型性。其一部分归于已知各根瘤菌种，另有一部分菌株构成独立的表观群及相应的ＤＮＡ同源群（亚群Ⅱ和Ⅳ）。本文采用不同的电泳方法，分析了海南快生根瘤菌和已知根瘤菌种的代表共５５个菌株的全细胞蛋白、酯酶、过氧化物酶及质粒组成。结果表明：同一亚群的菌株间有相似的蛋白图谱，种群之间有较明显的差异，根瘤菌中普遍存在酯酶，酶带的数量和迁移率具有菌株专一性，更适合于苗株的鉴别。过氧化物酶只在部分菌株中观察到，亚群Ⅱ与亚群Ⅳ的菌株均显示一条酶带，但二者之间的相对迁移率有明显差别。质粒电泳中，大多数海南快生菌中存在着大质粒，分子量范围是２０－４０００Ｋｂ，同一亚群中的不同菌株间具有一定相似性，这些结果为海南快生型根瘤菌的分类提供了一些辅助证据。

多位点酶电泳在禽病原性大肠杆菌遗传相关性研究中的应用

多位点酶电泳在禽病原性大肠杆菌遗传相关性研究中的应用高崧，刘秀梵（扬州大学农学院动物医学系，扬州２２５００９）大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｔ）是引起人和家畜肠道外感染的常见病原。在禽类，它们通常首先感染呼吸道，透过粘膜后进人血液，并引起包括...

霍乱弧菌O1群菌株多位点酶电泳分析

为更准确区分霍乱弧菌Ｏ１群不同菌株的流行病学意义，应用多位点酶早泳法对来自不同国家，地区，时间和人群的霍乱弧菌Ｏ１群菌４７１株进行分型和分子生物学数值分类分析。结果；通过１１种酶基因位点的检测，４７１株Ｏ１群霍乱弧菌可以分为７１个ＥＴ型，ＥＴ１－ＥＴ２８为噬菌体－生物分型所区分的流行株，其中ＥＴ１－ＥＴ６为古典型菌，ＥＴ７包括大多埃尔托流行株和部分古典型菌株；

宁夏沙坡头地区根瘤菌特性分析:Ⅱ.多位点酶电泳酶谱分析

本试验对分离自宁夏沙坡头地区的17株根瘤菌和16株已知参比菌进行了16种多位点酶电泳分析。将所得数据做聚类分析表明，分离自沙坡头地区的根瘤菌中，有12株相似性较高，不同于已知参比菌，而独立成群，这与数值分类结果吻合。其分类地位需进一步研究确定。试验发现，异柠檬酸脱氨酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氨酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、黄嘌呤脱氢酶、磷酸葡萄糖变位酶、葡萄糖磷酸异构酶、超氧化物歧化酶等酶谱更有利于区分不同的根瘤菌种群。

多位点酶电泳法在菌痢暴发中的应用

从广州、江门两地分离到７９株Ｆ２ａ，采用多位点酶电泳（ＭＥＥ）技术对该菌的６种代谢酶进行了检测。结果表明，７９株Ｆ２ａ共分为１０个电泳型（ＥＴ），存在一个优势型（ＥＴ１）和一个次优势型（ＥＴ２），以及８个非优势型。该现象说明，ＥＴ１型是引起菌痢暴发和流行的优势克隆。用ＭＥＥ方法检测表型一致的Ｆ２ａ，可发现二者之间具有差异。

多位点酶电泳技术及其在脑膜炎奈瑟氏菌分类中的应用

1959年Market和Mller系统地综述了酶的多种形式,并首先提出了同工酶(isozyme或isoenzyme)的概念,随后很多学者在性状与结构,酶电泳技术、染色方法与原理及数据分析等方面进行了深入的研究,在真核细胞的种群遗传学和分类学中取得了较大进展,近年来已广泛应用到原核细胞中,并被发展成多位点酶电泳技术,本文将对该技术及其在脑膜炎奈瑟氏菌分类的应用作一综述。

多位点酶电泳法在分子流行病学中的应用

多位点酶电泳是研究真核生物群体遗传学和分类学的标准方法。80年代后被用于细菌的分类学、群体遗传学和分子流行病学方面的研究,并取得良好效果。本文就这一方法在分子流行病学中的应用作一概述。

霍乱弧菌非O1群菌株多位点酶电泳分型

对非Ｏ１群霍乱弧菌进行准确分型和分类，是目前亟待解决的重要问题。应用多位点酶电泳地对来源不同的９８株非Ｏ１群乱弧菌进行１２个酶基因位点的检测和分子分型研究。结果：９８例非Ｏ１群霍乱弧菌可以分为５９个ＥＴ型，每个型别所包含的菌株数较少。

多位点酶电泳法分析鸭吸虫遗传差异性

棘口吸虫是可导致人兽共患病的最普遍的肠道寄生虫。在医学上比较重要的4种棘口吸虫中卷棘口吸虫和似锥低颈吸虫已在泰国家禽的体内发现。这两种吸虫在形态上非常相似，无法从形态学的角度进行区别鉴定。玛哈沙拉坎大学的科研人员采用多位点酶电泳技术对这两种吸虫进行了鉴定。

多位点酶电泳法在新疆伤寒沙门氏菌分类和群体遗传学研究中的应用

采用多位点酶电泳（ＭＥＥ）法对新疆近１１年分离的１５４株伤寒沙门氏菌进行部分多位点醇基因型分类和群体遗传学研究．共测定分析７种代谢酶．研究结果表明，上述菌株共分为６９个电泳型（ＥＴ），分属１０个克隆系（ＣＬａ～ＣＬｊ），其中８０株爆发菌株分属２１个ＥＴｓ，３个ＣＬ（ＣＬｅ、ｆ和ｊ），以ＥＴ１７、２０、２１、２４、２６和２７为主，占６１．３０％，ＣＬｆ为优势克隆系，菌株占９５．００％；７４株散发菌株分属４８个ＥＴｓ，归为９个ＣＬ（ＣＬａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ），没有发现菌株较为集中的ＥＴ，主要克隆ＣＬｈ内菌株占４７．３０％，显示爆发和散发均可由多个ＥＴ型和克隆菌株引起，但爆发荫株的ＥＴ分布更为集中，有明显优势克隆．对上述菌株群体遗传结构分析表明：被测７种代谢酶基因位点均具有多态性，平均杂合度（ｈ）为６．１４，平均遗传多态值（Ｈ）为０．３５．不同来源菌株相比ｈ和Ｈ均无显著性差异（Ｐ均大于０．０５）．表明新疆不同来源的伤寒沙门氏菌可能来自同一群体．结果还显示每个酶基因位点都有一个优势等位基因，提示在伤寒沙门氏菌的进化演变过程中以自然选择为主。

两种多位点聚合酶链反应技术在结核分枝杆菌复合群鉴定中的价值

目的评价多位点聚合酶链反应(PCR)在儿童结核分枝杆菌复合群鉴定中的临床价值。方法收集经初步鉴定为结核病分支杆菌的临床分离株,分别经传统PNB/TCH鉴定,以及选择7基因位点16SrRNA、Rv0577、IS1561、Rv1510、Rv1970、Rv3877/8及Rv3120,及4基因位点ropB、RD1、RD8(present)、RD8(deleted),采用聚合酶链反应(PCR)对其进行扩增和鉴定。结果共收集204株临床分离菌株,传统PNB/TCH鉴定结果为,结核分枝杆菌199株,牛结核分枝杆菌3株,非结核分枝杆菌2株。4位点PCR鉴定结果为,结核分枝杆菌196株,牛结核分枝杆菌2株,卡介苗3株,非结核分枝杆菌3株。7位点PCR鉴定结果为,结核分枝杆菌191株,牛结核分枝杆菌2株,卡介苗3株,非洲分枝杆菌Ⅰ型4株,山羊分枝杆菌和田鼠分枝杆菌各1株,非结核分枝杆菌2株。结论两种PCR方法均较传统方法简便快捷,且均可较快的鉴定结核分枝杆菌复合群更多的亚种。7位点能鉴定出除非洲分枝杆菌Ⅱ型以外的所有儿童结核分枝杆菌复合群的亚种。4位点在鉴定卡介苗菌株中更加迅速简便。

中国三种柱锈菌在酶蛋白墓因水平上的群体遗传结构

从我国不同地区不同松树上采集代表茶生柱锈菌Cronartiumribicola、柔软柱锈菌Cflaccidum及栎柱锈菌C.quercuum的134个菌株的孢子，用多位点酶电泳法分析了其3种酶系统6个基因位点上的群体遗传结构。结果显示3种柱锈菌间酶蛋白基因的流动已绝少发生而表现为生殖隔离，从遗传背景上支持了这3个种的成立。我国东北地区的C.ribicola群体遗传性质高度均一（平均遗传杂合度He＝0．007），暗示本菌侵入并扩散于该地区的历史很短。来自不同守主的C.flaccidum和C．quercuum菌株，均以樟子松上的菌株遗传变异水平最高（He分别为0．154和0.160），据此推测它们可能最先起源于樟子松。上述随寄主而异的群体遗传差异可能是寄生专化性分化在基因水平上的反映。

两类木蹄层孔菌在酶蛋白水平上的遗传分化

木蹄层孔菌（Ｆｊｏｍｅｓ ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）在中国东北和日本存在子实体形态不同、寄主范围明显有别的两个类型：小型和大型。用多位点分析方法研究了两者间的遗传分化状况。从两类４１个菌株的４种酶系统中检测出９个基因位点，其中８个位点上的绝大多数酶谱型都不为两者所共有，显示两个类型间的基因交流已极少发生。根据酶谱型频率得出两者间的遗传距离Ｄ＝０．９６５，属于典型的种间遗传分化。上述酶基因分化证据结合子实体形态的显著差异，提示两类木蹄层孔菌是各自独立的种。两个类型的群体在遗传多样性参数上无显著差异，可能暗示两者在起源演化上的同步性。酯酶系统有２个位点上的酶谱为不同类型所特有且稳定而清晰，可作为分子标记用于两类木蹄层孔菌的无子实体鉴定。