多克隆同步筛选及验证胰腺癌肺转移细胞亚群

目的利用混合多克隆细胞亚群筛选和验证分析具有肺转移能力细胞亚群和基因。方法混合多克隆细胞亚群,分别尾静脉接种于喂饮强力霉素和对照两组裸小鼠,取小鼠肺原代培养得到具有肺转移能力的胰腺癌细胞亚群;提取基因组DNA进行PCR分析,比较两组小鼠特异基因检测率。结果体内筛选肺癌转移显示不加强力霉素组裸鼠出现肺转移症状早和严重。肺原代培养成功得到具有转移能力的胰腺癌细胞亚群,基因组DNA PCR分析表明75.0%没有喂饮强力霉素小鼠肺转移检测到SQSTM1基因,而在喂饮强力霉素小鼠只有37.5%肺转移检测到SQSTM1基因。PCR分析其他候选基因,包括sema4b,ube2k和gna13,均未检测到。证实强力霉素介导的SQSTM1基因表达导致胰腺癌细胞不同肺转移能力。结论多克隆混合同步筛选可验证得到胰腺癌肺转移细胞亚群和与其关联的基因。