菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒的特性及其对小菜蛾幼虫的生理效应

对菜蛾盘绒茧蜂Cotesiaplutellae多分DNA病毒的特性及其对寄主小菜蛾Plutellaxylostella幼虫的生理效应进行了研究。结果表明 :菜蛾盘绒茧蜂雌蜂输卵管萼中含有大量的多分DNA病毒 (polydnavirus ,PDV) ;一个PDV内含多个核衣壳 ,最多可达 16个 ;核衣壳长 4 0～ 16 8nm ,直径 39～ 4 0nm ;PDV仅在输卵管萼细胞内复制 ;雌蜂产卵时 ,随蜂卵将PDV注入寄主血腔 ,并扩散到寄主的许多组织中 ;PDV可能先通过脱膜再侵染寄主组织。雌蜂经Co6 0 辐射处理后再寄生 (即假寄生 )小菜蛾 2龄、 3龄和 4龄初期的幼虫 ,被寄生后的寄主幼虫几乎全部不能化蛹 ,但末龄 (即 4龄 )幼虫期显著延长 ,并在寄生后期 ,幼虫胸部有褐色的短翅芽出现 ;即将化蛹的 4龄末小菜蛾幼虫被假寄生后 ,即使每头寄主被过寄生 9次 ,依然能正常化蛹 ,但不能羽化。假寄生与正常寄生后寄主的脂肪体数量和形态结构有明显的不同 ,推测在正常寄生的情况下蜂卵孵化时释放的畸形细胞及随后的幼蜂可能对脂肪体的结构产生了作用。

多分DNA病毒及其在寄生蜂与寄主关系中的作用

多分DNA病毒 (PDV)在协调寄生蜂与寄主的相互关系中起重要作用。该文就PDV的特征、PDV与寄生蜂的相互关系、PDV对鳞翅目寄主的免疫抑制及发育调节等方面进行综述。

寄生蜂多分DNA病毒基因组结构及基因表达

对存在于膜翅目茧蜂科和姬蜂科的共生体病毒———多分DNA病毒(PolydnavirusPDV)的基因组结构、及其复杂多变的基因表达方式在调节寄主生理功能方面的研究进行了综述.为反映寄生蜂与寄生昆虫的协同进化关系,充分有效利用寄生蜂防治害虫提供依据.

中红侧沟茧蜂多分DNA病毒基本特征研究

本文首次报道中红侧沟茧蜂 (Microplitismediator)雌蜂卵巢中存在多分DNA病毒 (MicroplitismediatorPlolyd navirus,MmPDV) ,初步研究了MmPDV形态和基本生理生化特征。利用蔗糖密度梯度超速离心分离纯化了MmPDV粒子 ,电镜负染显示PDV粒子分三段 ,带有一明显的尾部结构 ,大小约为 130× 35nm ;SDS PAGE电泳条带较多 ,至少可以分辨出 2 6个电泳条带 ,表明病毒粒子衣壳蛋白复杂 ;琼脂糖凝胶电泳显示MmPDV基因组至少由大小不同、丰度不等的 14个DNA分子组成 ,用 6种内切酶 (EcoRI,HindIII,BssHII,PstI,BamHI,BglI)酶切MmPDV基因组后 ,估算出MmPDV基因组大小约为 10 8kb。用雌蜂输卵管萼液注射小地老虎幼虫 ,注射后的小地老虎体重和龄期发育动态表明 。

寄生蜂多分DNA病毒的生理功能

概述了多分 DNA病毒的生理功能 ,并就其未来的研究方向及应用前景进行了讨论。

多分DNA病毒分子生物学研究进展

本文从基因组特点、生理功能、起源进化及应用前景等方面综述了近年来有关多分DNA病毒分子生物学的研究进展。

棉铃虫齿唇姬蜂多分DNA病毒对棉铃虫前胸腺结构的影响

在研究棉铃虫(Helicoverpa armigera)末龄幼虫前胸腺发育规律的基础上,采用体外注射方法研究了棉铃虫齿唇姬蜂(Campoletis chlorideae)多分DNA病毒对棉铃虫前胸腺的影响,光学显微镜下观察,注射3个雌蜂当量的0 液或4个雌蜂当量的病毒影响了棉铃虫的前胸腺细胞结构的完整性,透射电子显微镜观察发现,注射萼液或病毒使棉铃虫前胸腺细胞的细胞内通道系统明显萎缩甚至消失,细胞内圆形线粒体增多,溶酶体增多,环状的膜组织增多,有些细胞的细胞器已经裂解,细胞内堆积有大量颗粒状物质。这些现象说明,棉铃虫齿唇姬蜂的萼液或多分DNA病毒导致棉铃虫前胸腺失活并解体。

寄生蜂多分DNA病毒对寄主昆虫的免疫抑制作用

多分 ＤＮＡ病毒（ＰＤＶ）是在膜翅目姬蜂科和茧蜂科寄生蜂体内的一类很独特的病毒。寄生蜂产 卵时，ＰＤＶ随同卵和萼液一起被注射入寄主体内，能干扰寄主的细胞免疫和体液免疫。该病毒直接侵染 或间接作用于血细胞，主要是浆细胞和颗粒细胞，导致血细胞变圆或凋亡。ＰＤＶ也能抑制血淋巴酚氧化 酶活性，诱导抗菌因子的大量合成。最近有关研究主要集中在病毒基因的表达和伴随寄主血细胞功能失常 的分子事件上。一些寄生蜂的ＰＤＶ与其他因子，如卵巢蛋白、畸形细胞或蜂毒等协同发挥作用。

寄生蜂多分DNA病毒的基因表达产物及对寄主昆虫的生理作用

最近有关由多分DNA病毒介导的寄生蜂与寄主关系的研究主要集中在多分DNA病毒基因的表达和伴随寄主生理功能失常的分子机理上 ,本文介绍在寄生蜂作用于寄主时一些重要的PDV基因表达产物 ,包括CsPDV ,MdPDV ,CcPDV ,TrPDV ,HdPDV ,CrPDV和其它PDV的基因表达产物 ,并简叙这些基因表达产物对寄主的生理影响。

多分DNA病毒基因组全序列的测定

在寄生蜂与寄主相互作用关系中，伴随寄生蜂产卵一起注入寄主体内，与寄生蜂“共生的”多分DNA病毒(polydnavirus，PDV)是寄生蜂利用的一种最奇妙的方式。通过抑制寄主的免疫和发育，PDV能够保证寄生蜂的正常发育和羽化。法国Institut de Recherche sur 1a Biologie de I’Insecte，UFR Science et Techniques的科学家测定了茧蜂Cotesia congregate的多分DNA病毒(CeBV)基因组全序列，

烟蚜茧蜂多分DNA病毒的形态特征与生理效应

多分DNA病毒(polydnavirus,PDV)是一类共生于膜翅目姬蜂科、茧蜂科和蚜茧蜂科寄生蜂体内的昆虫病毒。在寄生过程中,伴随着蜂卵的产出,寄生蜂将PDV注入寄主体内,通过病毒基因的表达,破坏寄主的免疫,以保障后代的存活。本文首次在烟蚜茧蜂和蚜虫模式体系内发现多分DNA病毒,初步明确其形态特征和生理效应。

茧蜂病毒调控寄主细胞的NF-κB信号通路

多分DNA病毒(Polydnaviruses,PDVs)是寄生蜂的共生病毒。已有研究报道PDVs能感染寄主血细胞并有特异性表达,但是,哪些病毒的DNA片段能进入寄主细胞,并参与调控NF-κB信号通路仍然还不清楚。本研究结果初步表明,在双斑侧沟茧蜂病毒(Microplitis bicoloratus bracovirus,MbBV)感染细胞后24 h能导致细胞凋亡,vank86、vank92、ptp109病毒基因片段均能在被感染后的Spli221(斜纹夜蛾)、Sf9(草地贪夜蛾)、High Five(粉纹夜蛾)细胞的DNA中检测到,但转录水平有差异。进一步对这3个基因与NF-κB调控的下游抗菌肽基因(attacin、defensin)和免疫基因酚氧化酶原激活酶(ppA3)的相互关系研究发现:在病毒感染Spli221、Sf9、High Five细胞24 h后,检测到Spli221细胞中attacin、defensin、ppA3的转录本,attacin基因显著下调;过表达Vank86、Vank92、PTP109的Spli221细胞,由LPS刺激后检测到只表达单个病毒蛋白的Spli221细胞中的attacin、defensin、ppA3的m RNA表达水平无显著变化。研究初步揭示了MbBV病毒感染Spli221细胞后抑制NF-κB信号通路,但单个病毒蛋白不能抑制NF-κB信号通路,实验结果为进一步深入研究多个病毒基因的共同作用及其在害虫生物防治中的应用打下了基础。

菜蛾盘绒茧蜂主要寄生因子导致的寄主小菜蛾幼虫脂肪体结构的变化

在不同的寄生状态下, 菜蛾盘绒茧蜂 Cotesia plutellae 不同的寄生因子可引起寄主小菜蛾Plutella xylostella幼虫脂肪体结构发生相应的改变。显微和亚显微形态结构显示: 假寄生后多分DNA病毒和毒液对脂肪体结构的完整性没有显著影响, 但细胞内脂质体变得小而密集, 线粒体和内质网丰富, 并有糖原积累; 正常寄生后, 脂肪体结构被破坏, 多数线粒体内嵴紊乱, 脂质体也变得不规则, 特别是当幼蜂完成在寄主体内发育时, 寄主体内几乎无完整脂肪体存在。与此同时, 同批未被寄生的小菜蛾幼虫发育到4龄末期时, 体内脂肪体细胞发育正常, 已开始向蛹期细胞形态转化, 细胞内脂质体很大, 细胞器数量较多、糖原积累丰富, 而且部分细胞已成为游离态细胞。由此证明, 寄生蜂携带的寄生因子, 如多分DNA病毒、毒液、畸形细胞和幼蜂等, 均对寄主脂肪体结构的改变产生影响, 但程度明显不同。

半闭弯尾姬蜂寄生及其毒液对小菜蛾幼虫血细胞吞噬作用的影响

半闭弯尾姬蜂Diadegma semiclausum是小菜蛾Plutella xylostella的优势内寄生蜂,拥有毒液、多分DNA病毒(PDV)等寄生因子,能有效调控寄主幼虫的营养生理和免疫系统,但其毒液在这过程中的功能不明。本文利用SDS-PAGE方法分析了半闭弯尾姬蜂毒液的蛋白组分,利用寄主幼虫血细胞体外原代培养的方法,研究了小菜蛾幼虫血细胞噬菌能力在半闭弯尾姬蜂寄生后的变化情况。结果表明:半闭弯尾姬蜂毒液蛋白分子量主要集中在35～220kDa之间,少数小于15kDa,但分子量处于35～70kDa之间的蛋白含量较高,与其他寄生蜂毒液蛋白相似。半闭弯尾姬蜂毒液单独对寄主小菜蛾幼虫功能血细胞(浆血细胞和颗粒血细胞)的延展能力和吞噬功能不产生破坏作用。但半闭弯尾姬蜂寄生后短时间内,寄主功能血细胞的延展受到抑制,然而功能血细胞仍然能识别外源异物,却无法进一步吞噬外源物;寄生后24h,功能血细胞的延展力恢复,颗粒血细胞的吞噬作用可顺利完成。本研究证明了半闭弯尾姬蜂寄生能暂时性地抑制颗粒血细胞的延展性从而影响其噬菌过程。

菜蛾盘绒茧蜂卵携带的免疫抑制因子

抑制寄主昆虫的免疫反应是内寄生蜂存活的关键。菜蛾盘绒茧蜂Cotesia vestalis(Haliday)寄生小菜蛾Plutellaxylostella(L.)幼虫后,蜂卵如何逃避和抑制寄主的免疫攻击,尚未得到全面揭示。本文采用电镜技术系统观察了菜蛾盘绒茧蜂卵表面的超微结构。结果显示:蜂卵表面覆盖有纤维层和絮状的类病毒样纤丝(VLFs),同时携带了含多分DNA病毒粒子(PDV)的萼液。在寄生初期,包裹在蜂卵表面的纤维层和VLFs首先起到保护蜂卵不被小菜蛾血细胞包囊的被动防御作用。随后,PDV发挥主动的免疫抑制作用。通过假寄生手段,证明了菜蛾盘绒茧蜂PDV(CvBV)具有较持久的克服寄主免疫攻击的能力,是主要的免疫抑制因子。在假寄生后连续8d的观察时间内,菜蛾盘绒茧蜂的蜂卵均未被包囊。结果提示,在菜蛾盘绒茧蜂-小菜蛾寄生体系中,菜蛾盘绒茧蜂采取被动防御和主动攻击两种方式应对寄主小菜蛾的免疫攻击。

棉铃虫齿唇姬蜂研究概况

棉铃虫齿唇姬蜂是棉铃虫的主要寄生性天敌。综述了其生物学特性、大量饲养及田间控害作用、寄主选择行为、与植物的关系、多分DNA病毒以及植物次生物质和农药对棉铃虫齿唇姬蜂的影响等,以期为该蜂的保护利用提供参考。

二种寄生蜂寄生抑制小菜蛾精巢生长和精子束形成的比较研究

我们曾发现菜蛾盘绒茧蜂Cotesia vestalis和半闭弯尾姬蜂Diadegma semiclausum寄生严重阻碍小菜蛾Plutellaxylostella幼虫的精子发生。本研究着重比较2种蜂寄生对小菜蛾精巢生长和精子束形成的影响,以探明寄生因子对昆虫生殖调控的作用途径。采取过寄生和假寄生方法,对2种蜂各自寄生后的小菜蛾精巢生长体积,精子发生和形成过程中生精细胞、精子束的显微形态变化进行了比较。结果表明:茧蜂和姬蜂寄生均明显降低小菜蛾精子束的数量,严重阻碍了寄主幼虫的精子发生和精子形成。姬蜂寄生造成小菜蛾精巢畸形,而茧蜂则造成小菜蛾精子束畸形,且茧蜂对小菜蛾精巢生长的抑制程度明显强于姬蜂。过寄生造成寄主寄生性去势程度加剧,茧蜂和姬蜂过寄生后的小菜蛾精巢体积分别为0.005mm3和0.008mm3,仅为各自只寄生1次后精巢体积的33.1%和36.3%。假寄生后,发现只有寄生蜂母代物质存在的前提下,对小菜蛾精巢生长的抑制程度基本模拟了正常寄生时的状态,说明多分DNA病毒(polydnavirus,PDV)和毒液发挥了主要作用。由此推断分属姬蜂属PDV和茧蜂属PDV的2类PDV功能基因对小菜蛾精巢生长发育的调控机制可能存在较大差异。

GENOMIC FEATURES OF COTESIA PLUTELLAE POLYDNAVIRUS

Polydnavirus was purified from the calyx fluid of Cotesia plutellae ovary. The genomic features of C. plutellae polydnavirus (CpPDV) were investigated. The viral genome consists of at least 12 different segments and the aggregate genome size is a lower estimate of 80kbp. By partial digestion of CpPDV DNA with BamHI and subsequent ligation with BamHI-cut plasmid Bluescript, a representative library of CpPDV genome was obtained.

寄生蜂的秘密武器

寄生蜂以其他昆虫为宿主营寄生生活,是昆虫中进化程度最高的类群,更是控制农林害虫的重要物种。在长期的进化中,寄生蜂产生了许多克敌制胜的秘密武器,如多分DNA病毒、毒液和畸形细胞等。这些寄生因子在抑制宿主免疫系统的攻击、调节宿主的生长发育、保证寄生蜂成功寄生的过程中发挥重要作用。

二种寄生蜂寄生对不同虫龄小菜蛾精巢的影响

为探明寄生蜂引起寄主寄生性去势的机制,本文选取携带不同多分DNA病毒(Polydnavirus,PDV)的2种内寄生蜂与共同寄主小菜蛾Plutella xylostella(L.)为寄生体系,研究不同虫龄小菜蛾被寄生后雄性生精细胞、精子束形态和精巢发育体积变化,系统比较寄生性去势程度和分别拥有2类PDV的寄生蜂在寄主精子发生和形成过程中的作用。结果表明:携带Bracovirus PDV的菜蛾盘绒茧蜂Cotesiave stalis(Haliday)或拥有Ichvovirus PDV的半闭弯尾姬蜂Diadegma semiclausum Hellén寄生对不同虫龄小菜蛾的精子发生和形成过程均产生明显的抑制作用,表现为不能产生精子束或精子束数量减少,但抑制程度以寄生低龄寄主时最明显。2种蜂寄生均能抑制小菜蛾精巢体积的增长,但对低龄寄主的抑制程度明显强于高龄寄主,寄生性去势程度取决于寄生时寄主虫龄。相比而言,寄生不同虫龄小菜蛾时,茧蜂引起小菜蛾寄生性去势的程度均强于姬蜂。