面向自动化铸造平台的多功能微孔板检测系统

生物分析技术正向高通量、高灵敏度、多功能方向发展,微孔板检测仪作为高通量分析的基础仪器,需要满足微量化、自动化、集成化的要求。目前国内单一功能的微孔板检测仪器技术成熟,检测精度已与国际水平相当,但多功能的微孔板检测仪还较少,大多使用进口仪器。进口产品价格昂贵,有些操作指令不公开,不易集成到自主研发的合成生物自动化铸造平台项目。本研究将对高精度吸光度检测和高灵敏度荧光检测等关键技术进行研究,开发具有吸光检测和荧光检测功能的微孔板检测仪,并自主开发控制系统及数据采集分析软件,使其易于接入自动化铸造平台。该微孔板检测仪结构紧凑,吸光检测和荧光检测模块独立,波段可扩展。通过实验测试,所研发的微孔板检测仪的吸光度检测重复性为0.3%,10 s内可完成96孔的吸光检测;荧光检测数据在皮摩尔浓度范围内线性度较好,对荧光素钠溶液的检测灵敏度大约3.9 pmol/L。此外,该系统可通过串口直接连接自动化平台集成控制系统,也可通过TCP方式进行远程通信控制。

赛默飞世尔科技推出全新、多功能微孔板读数仪提供自动、简易和多样化的微孔板检测

科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技近日推出全新、多功能的微孔板读数仪。该仪器配备界面高度直观的软件，可为生命科学研究人员提供自动化和多功能的微孔板检测。Thermo Scientific VarioskanLUX多功能微孔板读数仪配备全新的Thermo Scientific SkanIt软件，旨在简化数据采集和分析流程，并提高检测结果的重现性和可靠性。

猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。

防污染PCR-微孔板杂交检测布鲁氏菌方法研究

目的 建立防污染 PCR-微孔板杂交 - EIA检测技术 ,并用于布鲁氏菌及其模拟感染组织中细菌的检测。方法 根据布鲁氏菌 31k D热休克蛋白和外膜蛋白 2 B(OMP2 B)基因设计引物 ,筛选合适引物 ,并建立用脲嘧啶糖基化酶防污染的 PCR扩增 -微孔板杂交与酶联显色检测布鲁氏菌的方法 ,并用于模拟污染布鲁氏菌动物脏器标本的检测。结果 根据布鲁氏菌 31k D热休克蛋白和外膜蛋白 2 B基因设计的引物 ,建立了复合 PCR,同时检测 2个基因的存在 ,并发现不同引物序列对 PCR扩增敏感性影响较大 ,可以相差 10 0 0倍。用 0 .5 U的U DG可以防止 10 8产物的污染 ,微孔板杂交 -酶联显色检测比单纯 PCR-电泳敏感 10倍。将该体系用于污染动物脏器的检测 ,可以检测出反应体系中 2～ 2 0 0个细菌的存在。结论 研究的防污染 PCR-微孔板杂交 - EIA试剂克服了目前 PCR试剂运输不便、产物污染所致假阳性和判定结果欠客观的缺点 。

应用微孔板凝集试验检测鸡白痢抗体的研究

鸡白痢病的血清学检疫方法,通常是使用快速全血平板凝集反应和血清试管凝集反应。前者可用于快速定性,但敏感性较低;后者敏感性高,且可以测定抗体滴度。但此法操作费力费时,反应时间长,试剂和器具用量耗费多。给试验带来十分不便。

高通量微孔板DAMBO-P^H荧光检测一氧化氮

一氧化氮(NO)是生物体内的一种重要生物信号传导分子,广泛参与生物体内多种生理及病理过程。为建立快速高效、准确检测生物体释放NO的分析方法,本文选用高灵敏度、高选择性的NO特异性荧光探针8-(3,4-diaminophenyl)-2,6-bis(2-car-boxyethyl)-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene(DAM-BO-PH),激发波长和发射波长分别为520 nm和535 nm,以高通量微孔板(384孔)作为实验工具载体。该方法荧光强度与NO浓度在8.0×10-10~8.0×10-7mol.L-1范围内呈良好线性关系,R=0.9989,检出限为0.18 nmol.L-1,回收率为98%~102%。该方法应用于多种生物样品中释放NO的分析检测,结果令人满意。

PCR-微孔板杂交-ELISA法检测巨细胞病毒感染

建立PCR-微孔板杂交-ELISA法检测人血清标本中巨细胞病毒DNA。将5’端标记生物素的PCR扩增产物与5’端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2min,55℃,1min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合显色。本试剂检测灵敏度为2.5×104 copies/mL,比传统PCR和ELISA敏度性高,特异性强,与单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型,风疹病毒、EB病毒、腺病毒核酸无交叉反应,批内CV为8.9%,批间CV为10.5%。该法可用于定性和定量检测HCMV DNA。

PCR-ELISA微孔板杂交技术检测结核杆菌DNA

目的 采用PCR ELISA微孔板杂交技术检测结核杆菌DNA。方法 采用PCR技术扩增结核杆菌DNA ,并将扩增产物加入预先包被结核杆菌探针的微孔板 ,再加入结核杆菌显色探针 ,同时进行微孔板核酸夹心杂交ELISA显色。共检测肺部疾病患者痰标本 5 10例。结果 该法的灵敏度为 5 9.3% ,特异性为 95 .0 % ;阳性预测值为 96 .3% ,阴性预测值为 5 1.4 %。结论 PCR ELISA微孔板杂交技术可快速、准确地检测结核杆菌DNA ,是结核病早期诊断和鉴别诊断的可靠实验室方法。

大型板孔零件形位误差检测系统的误差分析

现代工业生产中对机械产品几何参数互换性要求日趋完善,形位公差在机械工业中应用非常普遍,而在形位公差中圆度、圆柱度公差对零件的影响尤为重要。因此生产中应十分重视合理地控制这些圆柱形零件的圆度、圆柱度误差。如图1所示为20孔平板大型零件。

PCR-微孔板核酸杂交技术检测肺炎衣原体研究

建立一种新的PCR ELISA技术模式 ,简便、特异、敏感地检测肺炎衣原体 ,为肺炎衣原体的检测提供一种有效的新方法。采用链霉亲和素包被于聚乙烯微孔板 ,生物素标记的引物扩增目的DNA片段与荧光素标记的探针在微孔板内进行分子杂交 ,抗荧光素标记的辣根过氧化物酶可以与之结合 ,再加入底物即可产生颜色反应 ,通过测定其吸光度来进行结果判断。新建立的PCR ELISA方法与其它相关的六种病原体无交叉反应 ,临床标本检测检出率高 ,呼吸道感染者标本 42份检出率达 2 1 95 % ,肺炎患者标本 465份检出率为 42 1 5 % ,比套式PCR方法及其它检测方法的检出率都高。应用新建立的PCR ELISA方法检测肺炎衣原体特异、敏感 ,结果客观、稳定、可靠 ,对肺炎衣原体引起的疾病的诊断有十分重要的意义。

微孔板杂交定量检测食管端粒酶活性研究

目的 :研究端粒酶在切除食管癌标本中的活性。方法 :采用端粒酶重复扩增 (TRAP) -微孔板杂交法 ,对 15 0例切除食管癌标本癌中央组织、癌旁 1cm、3cm、以及 5～ 6 cm处 4块组织进行端粒酶活性分析。结果 :端粒酶在食管癌组织中央部位的阳性检出率为 98% ,癌旁 1cm处组织中的阳性率为 72 % ,癌旁 3cm处的阳性率为 42 % ,癌旁 5～ 6 cm处的正常组织阳性率为 4%。结论 :端粒酶活性在切除食管癌标本中的差异性分布对判断食管癌切除范围以及预后等具有一定的指导意义。

基于抑菌活性的纳他霉素微孔板生物检测法

为快速测定大量纳他霉素样品含量,基于其抑菌活性建立了一种新型的微孔板生物检测法。结果表明,裂殖酵母AS2.637为最适敏感指示菌,优化的敏感指示菌初始浓度为105～106cfu/mL,纳他霉素样品加入时间为0 h,培养时间为8 h。微孔板中纳他霉素浓度在0.95～2.14 mg/L与抑菌率呈较显著的线性关系,微孔板生物检测法与HPLC法测定的结果无显著差异,该方法具有处理量大、操作简单、平行性好等特点,可用于发酵过程中纳他霉素产量的定量和突变菌的高通量快速筛选工作。

用紫外-荧光微孔板酶检测技术测定两种土壤的酶活性

【目的】土壤酶活性是土壤质量的重要指示指标,本文对土壤酶的快速检测方法进行了探讨。【方法】采用荧光微孔板酶检测技术,测定土壤硫酸酯酶、磷酸酶、β-葡萄糖苷酶和肽酶活性,采用紫外微孔板酶检测技术测定多酚氧化酶和过氧化物酶活性。【结果】结果表明,采自农田的赤红壤的硫酸酯酶、磷酸酶和肽酶活性高于紫色土和采自矿山的赤红壤的相应的酶活性;矿山赤红壤的多酚氧化酶和过氧化物酶活性在三者中最高;紫色土的β-葡萄糖苷酶活性高于赤红壤的β-葡萄糖苷酶活性。【结论】紫外-荧光微孔板酶检测技术可快速测定土壤中酶的活性。

基于Labview的喷丝板微孔刀具自动检测仪的研究

介绍了喷丝板微孔刀具检测仪的检测原理;对喷丝板微孔刀具检测仪的自动化检测系统进行了研究,该检测系统硬件主要由工业计算机、三轴精密运动平台、运动控制卡、图像采集系统等组成;系统软件采用美国NI公司的Labview作为开发平台,根据喷丝板微孔刀具的特点设计了刀具检测流程,并对软件设计过程中的各种注意事项进行了阐述。结果表明:该检测仪运行可靠、每个参数的检测速度可达10 s,检测微孔直径长度精度可达±1μm,检测角度精度可达±0.5°,有效的解决了喷丝板微孔刀具的自动化检测。

智能手机微孔板分析仪的开发与HSA的定量检测

研究开发了基于智能手机的便携式96微孔板检测技术与仪器,并利用所开发仪器实现了人血清白蛋白(HSA)的高通量快速定量检测。该文首次通过设计大孔径聚焦透镜和均匀面光源,利用智能手机实现了对通用96微孔板的全范围准确成像,结合开发的手机应用程序可实现对检测样本的自动分析。所开发分析仪对HSA标准样品的检测结果与酶标仪检测结果具有高度的线性关系,相关系数为0.9893,证明其具有良好的准确性与可靠性。开发的分析仪的检测范围为21.45~60.06 g/L,对病人血清样品中HSA的检测结果与医院使用的生化分析仪检测结果一致,证明分析仪可用于临床中HSA的检测。该仪器具有成本低和体积小的特点,可推广至经济不发达地区、基层医疗机构和普通用户家中,对疾病的现场快速诊断具有重要意义。

全自动微孔测量仪及智能数据处理系统的研究

本论文在于探讨一种全自动的微孔测量仪器,测量仪器采用三轴联动运行模式,将测针统一安装于支撑臂上,利用伺服电机驱动丝杠,丝杠与测头通过齿轮啮合,进而产生驱动力,同时,支撑臂的位移通过光栅尺的读数,将测针所在的空间位置,通过计算机软件读取。进一步,通过Z轴方向的光栅尺,将孔深的技术指标读取。通过改善测针的空间移动方式,针对不同深度的台阶孔。测量其圆孔孔。

微孔板化学发光免疫分析法检测人血清中三碘甲状腺原氨酸

化学发光免疫分析法（Chemjlumillescence immunoassay,CLIA）基于放射免疫分析的基本原理，将酶的化学发光与免疫反应结合起来而建立的一种临床诊断方法．它综合了免疫分析和化学发光检测的优点，灵敏度高、线性范围宽、标记物的有效期长、无放射性危害、可实现全自动化等。