降解毒死蜱多功能菌株的构建及其对土壤的修复作用

将实验室保存的有机磷降解酶基因mpd连接到自杀性质粒pUT-Km1上,构建重组质粒pUT-M,通过三亲杂交,将mpd整合到越南伯克氏菌B418的染色体上,获得多功能工程菌株。实验证明工程菌株的原有解磷、解钾、固氮活性没有改变;48 h后对溶液中毒死蜱降解率达到65%;对室内模拟污染土壤有一定的降解能力,20 d对土壤中的毒死蜱降解率达91%。

一株多功能菌株的发掘、鉴定及解磷条件优化

从菌糠鸡粪堆肥中筛选高效的解磷菌并优化其解磷能力,发掘多功能微生物资源以实现农业废弃物的有效利用。利用无机磷选择培养基从堆肥中筛选高效解磷菌,结合形态学观察、生理生化试验、分子生物学鉴定,对菌株进行鉴定。利用单因素和响应面试验优化菌株的解磷培养条件;通过解磷、解钾和产吲哚乙酸能力的测定确定菌株的堆肥潜力。筛选得到一株高效解磷菌株Pb1,经鉴定发现菌株隶属于Bacillus smithii strain;培养条件为葡萄糖15.0 g/L、硫酸铵3 g/L、磷酸三钙7.0 g/L、无机盐0.48g/L、温度55.0℃、摇床转速225 r/min、初始pH 7.0、装液量60.0 mL/250 mL、接种量3.0%(V/V)时,菌株Bacillus smithii Pb1的解磷能力最强;进一步通过响应面优化发现,当磷酸三钙6.4 g/L、摇床转速207 r/min、装液量65.0 mL/250 mL时,菌株Pb1培养3 d,发酵液中溶磷量可达534.68 mg/L,是优化前的1.58倍。同时,发现B.smithii Pb1解有机磷、解钾、产吲哚乙酸能力,分别为238.99 mg/L、81.06 mg/L、23.26 mg/L。菌株B.smithii Pb1在高温(55℃)条件下展现出了解无机磷、有机磷、解钾和产吲哚乙酸的能力,为菌株B.smithii Pb1开发成好氧堆肥菌剂奠定基础。

森林土壤中多功能降解菌的分离筛选及鉴定

【目的】本研究旨在为土壤微生物资源的开发与利用提供理论基础。【方法】从采自四川汶川的高山森林土壤中分离可培养细菌,采用透明圈法等对其多项降解功能进行鉴定,筛选能够同时降解纤维素、蛋白质、淀粉、油脂和过氧化氢的多功能菌株,对其进行形态学和分子生物学鉴定。【结果】共分离到40株可培养细菌,其中21株为多功能菌株,菌株N14对纤维素的降解能力最强,菌株N12对蛋白质的降解能力最强,菌株N32对淀粉的降解能力最强,菌株N12、N16、N19、N20对油脂的降解能力较强,菌株N19对过氧化氢的分解能力最强。经鉴定,这些多功能菌株分别属于芽孢杆菌属(Bacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、泛菌属(Pantoea)、假单胞菌属(Pseudomonas)。【结论】本研究结果表明该地区高山森林土壤具有较高的可培养细菌多样性,并且其中的功能菌数量多且降解能力较高,因此,该结果在高山森林土壤资源菌的应用方面奠定了较好的研究基础。

番茄根际禾谷镰刀菌拮抗细菌的鉴定及功能特性

通过番茄根际土壤细菌及内生细菌的分离共筛选到85株细菌。通过两点对峙法筛选禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)的拮抗菌株,根据生长速率法计算抑菌率,结果表明,6株生防细菌对禾谷镰刀菌都有抑制作用。选取其中2株FQD25、FQC7进行发酵液对禾谷镰刀菌的抑菌试验,结果表明,发酵液抑菌效果FQD25>FQC7。以抑菌效果好的FQD25为供试菌株制备发酵液,测定对另外4种病原菌的抑制活性。结果表明,对4种病原真菌均具有不同程度的影响。进一步对菌株FQD25的功能特性进行研究,结果表明,菌株FQD25具有固氮、解磷、产蛋白酶的功能及对四环素和链霉素具有抗性。通过FQD25发酵液土壤处理及多菌灵处理的室内盆栽试验表明,FQD25、多菌灵、清水的病情指数分别为50、59、85;FQD25发酵液和多菌灵1500倍液防效分别为41.17%、30.58%。通过菌落形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA分子生物学鉴定分析,初步鉴定菌株FQD25为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。