苦参碱诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响

为了探讨苦参碱诱导多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响,将苦参碱与RPMI8226细胞共培育,采用CCK-8法观察细胞生长,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,双染色流式细胞仪检测细胞膜表面CD44、CD44v6、CD54和CD106的表达。结果表明,苦参碱对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,其发生率随着药物浓度增加而增加;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多,S期相对减少,但G2/M期细胞数无明显改变;苦参碱作用于RPMI8226细胞48小时导致CD44和CD54表达减少,但CD44v6和CD106表达无明显改变。结论:苦参碱通过诱导凋亡和细胞周期阻滞抑制RPMI8226细胞的生长,同时降低CD44、CD54等细胞黏附分子表达。

丹参酮诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及其对CD_(54)、VEGF表达的影响

目的探讨丹参酮抑制多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞生长及其对细胞黏附分子CD54和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将丹参酮与RPMI8226细胞共培育,采用MTT法观察细胞生长,AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面CD54和VEGF的表达。结果表明丹参酮对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效关系;丹参酮诱导RPMI8226细胞凋亡,丹参酮作用于RPMI8226细胞48h导致VEGF和CD54表达减少。结论丹参酮抑制RP-MI8226细胞的生长诱导其凋亡,同时降低VEGF、CD54等细胞黏附分子表达。

蛋白酶体抑制剂诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及对Notch1和NF-κB表达的影响

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的发生、发展与骨髓微环境关系密切,有多种信号通路参与。Notch信号是造血微环境调节造血细胞增殖分化的重要信号通路,其中Notch1与血液肿瘤的发生、发展较为密切。骨髓瘤是高度依赖NF-κB的恶性肿瘤,后者与肿瘤细胞的发生和转移、增殖和凋亡、耐药相关。已证实NF-κB2家族是Notch信号通路的一个靶基因。蛋白酶体抑制剂Bortezomib已获美国FDA批准用于治疗难治及复发多发性骨髓瘤,但其诱导骨髓瘤细胞凋亡的机制尚未完全明确。本研究探讨bortezomib诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和对Notch1、NF-κB表达水平的影响,采用透射电子显微镜检、流式细胞术及原位缺口末端标记技术观察药物对MM细胞凋亡的影响,用RT-PCR法和免疫荧光细胞化学染色分析分别检测细胞凋亡时Notch1及NF-κB的表达情况。结果表明:RPMI8226细胞高表达Notch1和NF-κB;随着bortezomib作用浓度的增高,RPMI8226细胞出现典型的凋亡改变,Notch1的表达逐渐降低,NF-κB在胞核表达减少,胞浆表达增多。这种改变在浓度升高到一定数值时与对照相比具有显著性差异(p<0.05)。结论:bortezomib治疗多发性骨髓瘤机制中有Notch1和NF-κB两条通路的参与,二者可能存在一定的联系,提示Notch1信号可能作为MM治疗的潜在靶点,为相关新药的研发提供一定实验基础。

Ad-NK4增强人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞对硼替佐米化疗敏感性的作用

目的:观察Ad-NK4能否增强RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:细胞-基质粘附实验和RPMI 8226细胞-ECV 304细胞粘附实验检测Ad-NK4对RPMI 8226细胞粘附的影响;Western blot检测粘附和侵袭相关蛋白MMP2、MMP3、MMP7、VEGF表达的变化;MTT法检测Ad-NK4对细胞增殖的影响;PI流式细胞术检测Ad-NK4对细胞凋亡的影响;Western Blot检测Cleaved caspase-3、BAX和BCL-2蛋白表达水平的变化。结果:两种细胞粘附实验均显示Ad-NK4可显著抑制RPMI 8226细胞粘附,且与Erk信号通路和JAK/STAT信号通路显著相关(P<0.05);Ad-NK4能明显降低RPMI 8226细胞MMP-2、MMP-3和VEGF蛋白的表达水平(P<0.05),但对M M P-7的蛋白表达水平无明显影响(P>0.05)。Ad-NK4和BOR联用的细胞抑制率和诱导凋亡比例均显著高于单用Ad-NK4或BOR。同样,Ad-NK4和BOR联用组Cleaved caspase-3和BAX蛋白水平均明显高于单独作用组,而BCL-2蛋白水平却相反,同时在联用组BAX/BCL-2比率增加。结论:通过活化Caspase-3和上调BAX/BCL-2比率的途径,Ad-NK4可增强BOR体外抗骨髓瘤RPM I 8226细胞作用。

薯蓣皂苷元对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞株增殖、侵袭、迁移影响及机制

目的观察薯蓣皂苷元(Dio)对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞株增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数期RPMI8226细胞分1、2、3、4、5组,1、2、3、4、组分别加入10、20、30、40μmol/L浓度的Dio、5组为MM细胞置于单纯培养基中,不做任何处理。分别于培养24、48、72 h在490 nm波长的酶标仪中检测各孔光密度值(OD值),观察细胞增殖抑制情况。将RPMI8226细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组、硼替佐米(BTZ)浓度组、对照组,高、中、低浓度组分别加入16、12、8μL的40、30、20μmol/L的Dio,BTZ组加入10 nmol/L的BTZ 2μL,对照组不做任何处理,采用细胞迁移实验观察各组细胞迁移能力,采用细胞侵袭实验观察各组细胞侵袭能力,采用ELISA检测各组细胞上清白细胞介素6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)、IL-8蛋白。结果随培养时间增加,1、2、3、4组细胞OD值增加(P均<0.05)。随作用浓度增加,细胞OD值增加(P<0.05)。与对照组比较,其余各组迁移、侵袭细胞数减少(P均<0.05);与BTZ组比较,高、中、低Dio浓度迁移、侵袭细胞数减少(P均<0.05).与对照组比较,其余组IL-6、VEGF、IL-8相对表达量减少(P均<0.05);与BTZ组比较,高、中、低Dio组IL-6、VEGF、IL-8相对表达量减少(P均<0.05)。结论 Dio可抑制RPMI8226细胞的增殖、迁移、侵袭,其机制可能与其下调细胞IL-6、VEGF、IL-8表达相关。

丹参酮诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡并降低其VEGF表达

目的观察丹参酮抑制多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞生长及其对VEGF表达的影响。方法将丹参酮与RPMI8226细胞共培育,采用MTT法观察细胞生长,AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面VEGF的表达。结果丹参酮对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效关系;丹参酮诱导8226细胞凋亡,丹参酮作用于RPMI8226细胞48 h导致VEGF表达减少。结论丹参酮抑制RPMI8226细胞的生长诱导其凋亡,同时降低VEGF表达。

薯蓣皂苷元对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖及VEGF、IL-6表达的影响

目的探讨薯蓣皂苷元(Dio)对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖及血管内皮生长因子(VEGF)、IL-6表达的影响。方法用不同浓度Dio作用于RPMI8226细胞24、48、72 h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,并选定下步试验中Dio的作用浓度。将对数期的RPMI8226细胞分为对照组,高、中、低Dio组,硼替佐米(BTZ)组,分别采用0、20、30、40μmol/L Dio及BTZ 10 nmol/L作用后,采用ELISA法检测各组IL-6、VEGF蛋白表达水平,PCR法检测各组IL-6、VEGF mRNA表达水平。结果 Dio对RPMI8226细胞增殖有抑制作用,随着药物浓度及时间的延长抑制率增加(P均<0.05)。作用48 h,与对照组比较,BTZ组VEGF、IL-6 mRNA的表达水平降低,高、中、低Dio组VEGF、IL-6 mRNA及蛋白水平均降低(P均<0.05)。与BTZ组比较,高、中、低Dio组各指标均降低(P均<0.05)。结论 Dio可通过抑制多发性骨髓瘤RPMI8226细胞IL-6、VEGF的表达而抑制其增殖。

力达霉素诱导人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡和周期阻滞

目的研究力达霉素(LDM)的抗骨髓瘤作用,并探讨抗骨髓瘤的作用机制。方法处于对数增殖期人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226细胞随机分为空白对照组及0.1、0.5和1 nmol/L LDM组,用MTS法和流式细胞术检测细胞增殖率、细胞周期分布和凋亡情况,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白和周期相关蛋白的表达量。结果细胞培养48 h后,不同浓度LDM组细胞增殖数显著低于空白对照组数(P<0.05),LDM组S期和G2/M期的细胞数显著高于对照组数(P<0.05),细胞凋亡率显著高于空白对照组数(P<0.05),LDM的增殖抑制作用和凋亡诱导作用呈剂量依赖性。不同浓度LDM组细胞caspase-3、caspase-7、caspase-9和poly ADP-ribose polymerase(PARP)的蛋白被切割明显高于对照组(P<0.05),P21和P27蛋白的表达量明显高于对照组数(P<0.05)。结论 LDM能诱导人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226细胞凋亡并诱导S期和G2/M期阻滞,其诱导凋亡和周期阻滞的机制有待于进一步深入研究。

三氧化二砷对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的作用及机制研究

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制。方法采用CCK-8法检测ATO作用后对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况;ELISA法检测RPMI8226细胞分泌VEGF的水平;Western blot检测ATO作用后Bcl-2蛋白、ERK1/2及其磷酸化蛋白水平变化。结果 ATO对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖抑制呈剂量-时间依赖性。选取不同浓度ATO作用于RPMI8226细胞24h及48h,ATO诱导RPMI8226细胞凋亡,呈时间依赖性和浓度依赖性(P<0.05)。随着ATO浓度的增加,G1期细胞数逐渐增多,提示ATO将RPMI8226细胞阻滞在G1期。此外,与空白对照组相比,ATO作用于细胞后,VEGF表达及分泌量越少,细胞内Bcl-2蛋白表达下降,ERK1/2及其磷酸化蛋白在RPMI8226细胞内稳定表达,其表达水平无变化。结论 ATO对RPMI8226细胞具有明显的抑制增殖及诱导凋亡作用;ATO将RPMI8226细胞阻滞在G1期;ATO作用后,细胞的VEGF表达及分泌量越少,Bcl-2蛋白表达下降,而对ERK1/2及其磷酸化蛋白表达无影响。

复方苦参注射液对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨复方苦参注射液对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养多发性骨髓瘤RPMI8226细胞系,采用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度复方苦参注射液对细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素6(IL-6)的表达水平。结果:0.5、1、2、5和10 mg/mL的复方苦参注射液均有抑制骨髓瘤RPMI8226细胞增殖的作用,且呈时间和剂量依赖性。5、10 mg/mL的复方苦参注射液可显著促进细胞凋亡,并阻滞细胞周期于G_(1)期。复方苦参注射液治疗后,细胞IL-6表达水平明显下调。结论:复方苦参注射液能抑制骨髓瘤细胞的增殖,诱导凋亡,其机制可能与抑制IL-6的表达有关。

黄连解毒汤抑制多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增生及促凋亡作用的研究

目的研究中药黄连解毒汤(HLJDT)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞RPMI8226增生和凋亡的作用。方法以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基常规培养RPMI8226细胞,分别以不同浓度的HLJDT作用不同的时间后,应用锥虫蓝拒染法测定细胞活力变化,MTT法检测细胞的增生变化;采用流式细胞术测定细胞周期的变化;应用流式细胞仪检测药物细胞的凋亡现象,荧光显微镜下观察AO/EB染色后的细胞凋亡形态变化;比色法检测半胱氨酸蛋白水解酶3(caspase3)活性变化。结果与对照组相比,200～800ng/ml浓度的HLJDT可明显抑制细胞增生影响(P<0.01),并呈时间和剂量依赖性;使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,并呈剂量依赖性改变;MM细胞凋亡百分率显著增高(P<0.01),免疫荧光显微镜下可见典型的凋亡细胞形态学变化;使caspase3活性增强,且呈剂量和时间依赖性(P<0.01)。结论HLJDT能有效抑制MM细胞RPMI8226增生,促其凋亡,G0/G1期细胞比例增加和S期细胞比例减少可能是原因之一;caspase3活性增强可能参与其凋亡过程,具体机制还有待研究。

外泌体miRNA治疗多发性骨髓瘤的作用与机制

背景:多发性骨髓瘤是最常见的血液恶性肿瘤之一,具有难治疗、易复发、易耐药的特点,至今仍无法治愈。外泌体的内源性转运系统通过影响细胞间功能成分的交换而发挥通讯作用,其中miRNA因尺寸微小更容易被包装在外泌体内,故影响细胞功能的途径多、范围广。目的:归纳并总结多发性骨髓瘤中外泌体miRNA发挥作用的机制,提出潜在靶点。方法:以“multiple myeloma,bone marrow mesenchyml stem cell,fibroblasts,peripheral blood,complication,progression,drug resistance,exosomal miRNA”为英文关键检索词,检索PubMed数据库的相关文献。文献检索时限为数据库建库至2024年6月。通过阅读文题和摘要进行初筛,排除无关或内容重复或无参考意义的文献,最后纳入81篇文献进行综述。结果与结论:①多发性骨髓瘤细胞通过各种miRNA介导的外泌体调节成骨和破骨功能平衡参与多发性骨髓瘤骨病变、调控红细胞钙离子外排通道参与高钙血症的发生、促进肾上皮-间充质转化引发肾纤维化和肾功能不全、上调骨髓来源的单核抑制细胞促进免疫微环境的抑制;此外,多发性骨髓瘤细胞外泌体miRNA还参与了免疫治疗耐药的发生和发展以及血管生成、细胞增殖及细胞衰老等病理过程。②骨髓间充质干细胞和肿瘤相关成纤维细胞均可通过外泌体miRNA影响多发性骨髓瘤细胞的增殖、转移和凋亡,干预血管生成,调控化疗药物的耐药性。③外周血循环外泌体miRNA作为前沿的无创生物标志物,可发挥判断多发性骨髓瘤病程分期和进展,预测患者生存及预后,评估药物敏感性和耐药性等关键作用。④多发性骨髓瘤外泌体长链非编码RNA、环状RNA、miRNA及mRNA,靶基因多种研究因素可形成不同的组合,灵活地构建新型生物轴和生物分子网络,符合整体医学的发展理念。⑤外泌体miRNA作为预测生物标志物及新药研发的治疗靶点具有巨大的发展潜力,如何最大程度利用外泌体miRNA,如何加快相关科研结果的临床转化值得未来进一步研究。

移植前控制营养状况和移植后微小残留病灶对多发性骨髓瘤患者自体造血干细胞移植预后的影响

目的:探讨多发性骨髓瘤患者自体造血干细胞移植前控制营养状况(CONUT)和移植后微小残留病灶对预后的影响。方法:回顾性分析2011-2020年在本院行自体造血干细胞移植的79例患者的临床资料,根据首次移植前CONUT评分将患者分为Low-CONUT组(0-4分,62例)和High-CONUT组(5-12分,17例),对比分析两组患者的临床特征、造血重建与不良反应、疗效和生存情况,同时对预后进行危险因素分析,并用时间依赖的ROC曲线验证结果。结果:High-CONUT组男性患者比例和初诊时骨髓浆细胞>30%的患者比例均较Low-CONUT组高(均P<0.05),而在造血重建与不良反应(2级以上的非血液学不良反应)方面无显著差异。Low-CONUT组移植前完全缓解率、完全缓解+非常好的部分缓解率都显著高于High-CONUT组(均P<0.05),移植后3个月后者优势仍然保持(P<0.01),但前者已无显著差异(P>0.05)。Low-CONUT组总生存期、无进展生存期均优于High-CONUT组(均P<0.05)。移植前的CONUT评分低(0-4分)、移植后6个月微小残留病阴性是患者总生存期和无进展生存期的有利因素(均P<0.05),初诊时国际骨髓瘤工作组预后危险分层为高危和移植前乳酸脱氢酶>250 U/L仅是无进展生存期的危险因素(均P<0.05)。时间相关的ROC曲线分析提示,CONUT评分和移植后6个月微小残留病灶状态可单独或联合预测1和2年总生存期、无进展生存期,且联合预测效果更好。结论:结合移植前CONUT评分和移植后微小残留病灶状态可以较好地预测多发性骨髓瘤患者的预后。

高龄多发性骨髓瘤鞍区占位1例

目的通过总结1例高龄多发性骨髓瘤鞍区占位患者的临床特点,增加对此类疾病的认识。方法回顾性分析1例高龄多发性骨髓瘤鞍区占位患者的临床表现、生化检验、影像学资料。结果患者为85岁男性,主要临床表现为乏力、纳差、多尿。辅助检查提示血钠明显降低、轻度高总蛋白及垂体占位、多项垂体前叶激素水平下降、泌乳素水平升高。完善病因筛查时发现血免疫球蛋白G(IgG)水平显著升高,血M蛋白阳性,骨髓涂片示骨髓瘤细胞,同时伴有全身骨骼多发溶骨性病变,考虑多发性骨髓瘤诊断明确,垂体占位为髓外受累可能性大。结论鞍区占位病因多样,多发性骨髓瘤鞍区受累发生率低,起病隐匿,临床特征、影像学表现缺乏特异性,易造成误诊及漏诊。

苦参碱诱导多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡的实验研究

本研究探讨苦参碱对人骨髓瘤细胞株RPMI8226的作用及其机制。用不同浓度苦参碱处理RPMI8226细胞24、48小时,通过形态学观察、Annexin-V分析、DNA琼脂糖电泳、线粒体膜电位检测观察苦参碱对RPMI8226细胞的促凋亡作用。结果表明:RPMI8226细胞经苦参碱处理后,出现典型的细胞凋亡形态,凋亡早期细胞膜外翻,DNA琼脂糖电泳出现典型的梯状结构,线粒体膜电位崩塌。结论:苦参碱能有效地诱导骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞凋亡,凋亡率与药物剂量和作用时间呈依赖性。

雄黄对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226细胞基因表达谱的作用

目的:应用cDNA芯片研究雄黄作用多发性骨髓瘤细胞株RPM I 8226细胞后对其基因表达的影响。方法:应用包含4 096条人类基因的cDNA表达谱芯片,检测雄黄作用于RPM I 8226细胞前及48 h后基因的表达。结果:在mRNA水平上,164条基因显著改变,53条基因上调,111条基因下调。结论:雄黄作用RPM I 8226细胞株后可引起一系列基因改变,许多基因涉及了多发性骨髓瘤的发病机制,其中BTG1,TXNIP及ALK1基因可能与RP-M I 8226细胞的分化和凋亡有密切关系。

索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖与凋亡的影响

本研究旨在探索索拉非尼对人骨髓瘤细胞RPMI 8226增殖与凋亡的影响及其作用的分子机制。采用MTT法检测索拉非尼对人多发性骨髓瘤细胞的抑制率,透射电子显微镜观察索拉非尼干预骨髓瘤细胞后其超微结构的变化,流式细胞术检测索拉非尼诱导骨髓瘤细胞凋亡的情况及对细胞周期分布的影响,半定量RT-PCR和Western-blot法分别检测索拉非尼作用前后骨髓瘤细胞caspase-3、BCL-2和MCL-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果显示,索拉非尼(0-10.0μmol/L)可抑制RPMI 8226细胞增殖,抑制率呈时间-浓度依赖性;48 h后在透射电子显微镜下可见到凋亡小体等典型凋亡改变;索拉非尼可明显诱导骨髓瘤细胞凋亡(P<0.05),主要将细胞阻滞于G1期(P<0.05);索拉非尼作用48 h后,与对照组相比细胞BCL-2及MCL-1 mRNA与蛋白表达量均减少(P<0.05),caspase-3表达量变化不大,而蛋白水平的活化型caspase-3表达增加(P<0.05)。结论:索拉非尼通过诱导细胞凋亡有效抑制骨髓瘤增殖,其机制可能与细胞周期阻滞和激活死亡受体途径有关。

抑制缺氧诱导因子-1α仪表达对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞裸鼠体内成瘤性的影响

目的利用RNA干扰（RNAi）技术抑制多发性骨髓瘤（MM）细胞系RPMI8226细胞中缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor，HIF-1α）表达，探讨对RPMI8226细胞在裸鼠体内成瘤性的影响。方法利用短发夹RNA（shRNA）表达载体pSilencer2．1-U6 hygro构建RNAi载体，在RPMI8226细胞中抑制HIF-1α的表达。应用RT—PCR技术和Western blot方法，鉴定RNAi后HIF-1α的表达。ELISA法测定细胞上清中血管内皮生长因子（VEGF）表达的改变。流式细胞术检测RNAi前后细胞周期的改变。研究缺氧（PO2 为1％）条件下，抑制HIF-1α的表达对其靶基因VEGF和葡萄糖转运蛋白（Glut-1）表达的影响。利用异种移植瘤模型观察HIF-1α干扰后对肿瘤生长的影响。结果RNAi后，HIF-1α的表达在mRNA和蛋白水平均明显降低。常氧条件下，RNAi组（RPMI8226-i1和RPMI8226-i2）和未干扰组（RPMI8226-c和RPMI8226）细胞上清中VEGF浓度无明显差异；缺氧条件下四组细胞上清中VEGF浓度分别为（506．0±53．2）、（494．7±63．1）、（984．4±61．9）和（938．2±62．2）pg／ml。RPMI8226-i1和RPMI8226-i2组较RPMI8226-c和RPMI8226组明显降低（P〈0．05）。G0／G1期累积受到抑制，S期细胞比例增加。缺氧条件下VEGF和Glut-1等靶基因的表达明显下调（P〈0．05）。裸鼠皮下成瘤性实验表明，抑制HIF-1α的表达，能够明显抑制肿瘤的生长。结论RNAi抑制RPMI8226细胞HIF-1α表达，可能通过抑制肿瘤的血管新生和糖代谢过程来发挥肿瘤抑制作用。

IgH基因重排在多发性骨髓瘤自体造血干细胞移植后微小残留病监测中的价值

目的:探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排在多发性骨髓瘤(MM)自体造血干细胞移植(auto-HSCT)后微小残留病监测中的价值。方法:收集2018年-2022年于武汉市第一医院血液内科接受auto-HSCT的26例MM患者的临床资料,通过多重PCR联合毛细管电泳片段分析法检测IgH重排来评价微小残留病(MRD),对疾病的转归进行相关统计学分析。结果:全部26例MM患者中,男性18例,女性8例,中位年龄59(41-70)岁,移植后中位随访时间33(7-52)个月。与骨髓IgH重排阴性组(17例)比较,移植前骨髓IgH重排阳性(9例)患者移植后3个月达到CR和sCR疗效的比例更低(1/9 vs 14/17),移植后缓解持续的时间(DOR)更短(10.78±4.35 vs 15.88±5.22个月),两组DOR差异有统计学意义(P<0.05);与外周血干细胞采集物IgH重排阴性组(21例)比较,外周血干细胞采集物IgH重排阳性(5例)患者移植后3个月达到CR和sCR的比例更低(0/5 vs 15/21),移植后缓解持续的时间(DOR)更短(9.60±4.83 vs 15.19±5.11个月),两组DOR差异有统计学意义(P<0.05)。在随访期内,移植前骨髓IgH重排阳性的患者有5例(5/9)死亡,IgH重排阴性患者均存活;外周血干细胞采集物IgH重排阳性患者有4例(4/5)死亡,IgH重排阴性患者有1例死亡(1/21)。无论是骨髓还是外周血干细胞采集物标本,IgH重排阳性患者移植后生存时间较IgH重排阴性患者更短(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,性别、疾病分期、初诊时骨髓涂片浆细胞比例、干细胞动员方案、移植前疗效评价(≥CR和<CR)、CD34+细胞计数对移植前骨髓及干细胞采集物IgH重排均无影响(P>0.05)。结论:通过检测接受auto-HSCT的MM患者IgH重排,可以进一步评价MRD的深度,对疾病的疗效及预后判断有一定的指导意义。

华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株增殖、凋亡的影响及机制研究

目的:探讨华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:分别采用四氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪检测华蟾素对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞增殖、凋亡的影响。用ELISA检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)及血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果:1不同浓度华蟾素对RPMI 8226细胞的增殖均有抑制作用,随药物浓度的增加及作用时间的延长,药物的作用效果增强;2不同浓度华蟾素(0.0625、0.125、0.25、0.5μg/m L)作用于RPMI 8226细胞72h,细胞凋亡率分别为(14.92±1.59)%、(19.17±2.10)%、(19.43±2.63)%和(27.47±3.39)%,与对照组(2.98±0.67)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。0.5μg/m L浓度华蟾素凋亡率高于其于各组(P<0.01);3与对照组比较,不同浓度华蟾素作用于RPMI 8226细胞72h,细胞上清中IL-6及VEGF水平下降,其中高浓度华蟾素组(0.25及0.5μg/m L)的变化有显著性差异(P<0.01),但低浓度组(0.0625及0.125μg/m L)变化无统计学意义(P>0.05)。结论:华蟾素在体外具有抗多发性骨髓瘤的作用,并呈时间和剂量的依赖性,与其直接细胞毒作用及诱导凋亡有关,降低瘤细胞分泌IL-6及VEGF的水平可能是其作用机制之一。