载FGF10的多孔明胶微球对脊髓损伤大鼠的神经修复作用机制研究

目的探讨载成纤维生长因子10(FGF10)的多孔明胶微球(GMSs)对脊髓损伤大鼠神经保护作用的机制。方法20只健康雄性SD大鼠(220~250g)随机分为假手术组、脊髓损伤组、FGF10组、FGF10-GMSs组,每组各5只。假手术组只咬除T_(9)~T_(10)棘突及椎板等骨性组织,不造成脊髓损伤。其余3组造成脊髓损伤后,用Hamilton微量注射器向FGF10组大鼠的损伤注入20μL FGF10,向FGF10-GMSs组大鼠的损伤处注射20μL FGF10负载的多孔明胶微球,脊髓损伤组和假手术组的大鼠注射等量的生理盐水。收集大鼠胸椎(T_(9)~T_(10))脊髓组织,分别采用离体释放试验评估FGF10-GMSs的持续释放。使用大鼠脊髓损伤评分(BBB评分)和斜坡测试评估FGF10-GMSs对SCI大鼠的运动功能改善效果。使用HE、Nissl染色、TUNEL试验及Western blot评估FGF10-GMSs的治疗效果。结果离体释放实验结果显示,普通明胶微球会在短时间内迅速释放FGF10,多孔明胶微球持续而缓慢地释放FGF10,未在初始48 h内观察到显著的爆发释放模式。BBB评分结果显示,与脊髓损伤组(5分)相比,第21天FGF10-GMSs组(12分)和FGF10组(9分)的大鼠均表现出良好的运动功能恢复(P<0.05),斜坡测试结果与BBB评分结果一致,FGF10组和FGF10-GMSs组均获得了明显的行为改变。HE、Nissl染色结果显示FGF10-GMSs组内的坏死、核崩解和浸润性多核白细胞数量较少,在脊髓腔内坏死组织的比例显著降低。Western blot测定结果显示FGF10-GMSs组中的细胞凋亡抑制程度比FGF10组中更加明显。TUNEL试验也产生类似的结果,相比FGF10组和脊髓损伤组,FGF10-GMSs组具有更加明显的抑制细胞凋亡的作用。结论FGF10-GMSs通过抑制神经细胞的凋亡,从而达到保护脊髓损伤大鼠神经细胞的作用,为脊髓损伤的治疗提供新的思路,对提高脊髓损伤的预后具有十分重要的意义。

用多孔明胶微球作为示踪剂载体

用天然胶原蛋白加交联剂制备多孔明胶微球，直径３０～６０μｍ，含微孔。将其作为荧光金载体用于垂体前叶神经纤维起源的研究获得较理想结果，并有以下优点：１．吸收示踪剂硬结后可按需要捣成直径６０μｍ以上坚硬颗粒，使用方便；２．供示踪剂附着的表面积大，运载示踪剂量多；３．示踪剂从微球中缓慢释放；４．明胶化学性质稳定。