多孔木霉色素的结构鉴定和合成基因簇分析

为了鉴定多孔木霉色素的化学结构,并对其合成基因簇进行分析。本研究分离纯化环孢菌素A合成菌多孔木霉(Tolypocladium inflatum)培养液中的色素,然后通过光谱学分析初步鉴定色素的结构。在此基础上,采用生物信息学方法对色素合成基因簇进行解析。多孔木霉色素为蒽醌类物质,分子式为C15H10O5,含有3个苯羟基和2个酮基。T.inflatum色素与镰刀菌红素、孢子黄色素的合成基因簇同源性高,合成T.inflatum色素的基因簇共有43个开放阅读框(ORFs),核心基因为聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)合成酶基因。本研究从色素结构和合成基因簇分析入手,为进一步阐明色素的生物合成途径奠定基础。

环孢菌素A生产菌原生质体转化系统的建立

以腐草霉素抗性为选择标记,建立了环孢菌素A生产菌株的基因转化体系,成功将外源基因转入环孢菌素A生产菌,并整合到染色体上。传代实验表明,外源基因可以稳定表达。该体系的建立为环孢菌素A生产菌的基因工程育种奠定了基础。