多巴胺D1和D2受体敲除对胶原诱导性关节炎Th1/Th2和Th17/Treg失衡的影响

目的:探讨多巴胺D1受体敲除(dopamine D1 receptor gene kn ockout,D1R^(-/-))和多巴胺D2受体敲除(dopamine D2 receptor gene knockout,D2R^(-/-))对类风湿关节炎模型小鼠中Th1/Th2、Th17/Treg失衡的影响。方法 :在野生型、D1R^(-/-)和D2R^(-/-)小鼠尾根部注射胶原乳剂混合物建立胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠模型。用蛋白免疫印迹法检测滑膜组织中与Th1/Th2、Th17/Treg细胞相关的细胞因子的蛋白表达。结果:D2受体(D2 receptor,D2R)敲除后,CIA模型小鼠中与Th1相关的细胞因子干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-2,与Th17相关的IL-17、IL-22的蛋白表达和野生CIA组相比均显著升高。而与Th2细胞相关的IL-4和与Treg细胞相关的IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的蛋白表达和野生CIA组相比均显著下降。而D1受体(D1receptor,D1R)敲除后,上述细胞因子与野生CIA组相比均无明显变化。结论:D2R敲除后,进一步加重了Th1/Th2、Th17/Treg之间的失衡。

β内啡肽、环氧合酶-2、多巴胺受体D2在右向左分流合并有先兆偏头痛患者血清中的表达及其与焦虑状况的关联性

目的 研究β内啡肽(β-EP)、环氧化酶-2(COX-2)、多巴胺受体D2(DRD2)在右向左分流(RLS)合并有先兆偏头痛患者血清中的表达及其与焦虑状况的关联性。方法 选取2022年7月至2023年7月吉林省一汽总医院收治的214例检查存在RLS的有先兆偏头痛患者,记作RLS偏头痛组,50例检查无RLS的有先兆偏头痛患者作为对照组,比较两组血清β-EP、COX-2、DRD2水平及焦虑自评量表(SAS)评分。另将RLS偏头痛组患者根据检查结果分为少、中、大量RLS偏头痛组(78例),分别为90、46、78例,比较三组血清β-EP、COX-2、DRD2水平及SAS评分。采用Spearman相关系数分析RLS偏头痛组患者血清β-EP、COX-2、DRD2水平与RLS分级、SAS评分的关系。结果 RLS偏头痛组血清β-EP、DRD2水平均低于对照组,COX-2水平及SAS评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中、大量RLS偏头痛组血清β-EP、DRD2水平低于少量RLS偏头痛组,大量RLS偏头痛组低于中量RLS偏头痛组,差异有统计学意义(P<0.05)。中、大量RLS偏头痛组血清COX-2水平、SAS评分高于少量RLS偏头痛组,大量RLS偏头痛组高于中量RLS偏头痛组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,RLS偏头痛组患者血清β-EP、DRD2水平与RLS分级、SAS评分呈负相关(rs<0,P<0.05),血清COX-2水平与RLS分级、SAS评分呈正相关(rs>0,P<0.05)。结论 随着RLS合并有先兆偏头痛患者RLS分级的升高,其血清β-EP、DRD2表达降低,COX-2表达升高,且三者均与患者的焦虑状态密切相关。

孕妇胎盘多巴胺D2受体、锚蛋白重复和激酶域1表达与妊娠期糖尿病巨大儿的关系

目的探究妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织中多巴胺D2受体(DRD2)、锚蛋白重复和激酶域1(ANKK1)的表达情况,及二者与GDM巨大儿的关系。方法选取2018年3月至2020年12月在西北妇女儿童医院足月分娩的185例孕妇为研究对象,按照孕妇是否存在GDM、新生儿是否为巨大儿分为对照组(无GDM、新生儿体质量正常)、正常巨大儿组、GDM正常体质量组及GDM巨大儿组。分别采用免疫组化法及qRT-PCR法检测胎盘组织中DRD2、ANKK1蛋白及mRNA表达,并采用Pearson法分析DRD2、ANKK1表达与GDM巨大儿的相关性,采用logistic回归分析影响GDM孕妇生产巨大儿的因素。结果对照组、正常巨大儿组、GDM正常体质量组、GDM巨大儿组胎盘组织中DRD2蛋白阳性率分别为87.76%(43/49)、74.47%(35/47)、62.22%(28/45)、52.27%(23/44),DRD2 mRNA分别为(1.03±0.06)、(0.86±0.14)、(0.71±0.15)、(0.58±0.11),四组胎盘组织中DRD2蛋白阳性率及mRNA水平由高到低分别是对照组、正常巨大儿组、GDM正常体质量组和GDM巨大儿组,四组比较差异有统计学意义(P<0.05),且DRD2 mRNA水平组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组、正常巨大儿组、GDM正常体质量组、GDM巨大儿组胎盘组织中ANKK1蛋白阳性率分别为44.90%(22/49)、59.57%(28/47)、71.11%(32/45)、81.82%(36/44),ANKK1 mRNA分别为1.01±0.05、1.24±0.27、1.53±0.39、1.82±0.46,四组胎盘组织中ANKK1蛋白阳性率及mRNA水平由高到低分别是GDM巨大儿组、GDM正常体质量组、正常巨大儿组和对照组,四组比较差异有统计学意义(P<0.05),且ANKK1 mRNA水平组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,胎盘组织中DRD2表达与新生儿体质量呈负相关(r=-0.32,P=0.021),ANKK1表达与新生儿体质量呈正相关(r=0.34,P=0.016)。logistic回归分析结果显示,DRD2 mRNA、ANKK1mRNA均为GDM孕妇生产巨大儿的影响因素。结论GDM孕妇胎盘组织中DRD2呈低表达,ANKK1呈高表达,二者水平均与新生儿体质量相关。

维生素D通过Nrf2/HO-1抑制铁死亡缓解6-羟基多巴胺所致PC12细胞损伤的作用机制研究

目的 探讨维生素D(VD)缓解6-羟基多巴胺(6-OHDA)所致PC12细胞损伤的作用与铁死亡及Nrf2/HO-1通路激活的关系。方法 利用6-OHDA构建PC12细胞帕金森病(PD)模型,不同浓度的VD分别联合铁死亡激活剂(Erastin)或Nrf2抑制剂(ML385)干预后,CCK-8法检测PC12细胞活力变化。将PC12细胞分成空白对照组(Control)、6-羟基多巴胺组(6-OHDA)、维生素D组(VD)、铁死亡激活剂组(Erastin)、铁死亡激活剂+维生素D组(Erastin+VD)、Nrf2抑制剂组(ML385)、Nrf2抑制剂+维生素D组(ML385+VD),对应干预结束后,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡水平,检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)含量,铁离子试剂盒检测铁离子含量,qRT-PCR检测谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、铁蛋白重链多肽1(FTH-1)、胱氨酸/谷氨酸反向转运蛋白(XCT,也称SLC7A11)、转铁蛋白受体(TFR-1)表达,Western blot检测Nrf2/HO-1通路激活情况。结果 与Control组比较,6-OHDA、Erastin、ML385均显著抑制PC12细胞活力(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01);LDH、MDA水平升高(P<0.01), GSH、SOD水平降低(P<0.01),铁离子含量升高(P均<0.01),GPX4、FTH-1、XCT等的表达降低(P均<0.01),TFR-1的表达显著升高(P<0.01),Nrf2、HO-1的表达被显著抑制(P<0.01);与6-OHDA组比较,VD可显著促进PC12细胞活力(P<0.01)、抑制细胞凋亡(P<0.01),降低LDH、MDA水平(P均<0.01),升高GSH、SOD水平(P均<0.01),抑制铁离子沉积(P均<0.01),GPX4、FTH-1、XCT等的表达均显著升高(P均<0.01),TFR-1的表达显著降低(P<0.01),Nrf2、HO-1表达升高(P<0.01);ML385可显著抑制VD对上述指标的调控作用。结论 维生素D可激活Nrf2/HO-1通路,缓解6-OHDA所致PC12细胞铁死亡。

丘脑室旁核内多巴胺D2受体阳性神经元对大鼠焦虑样行为的调节作用

目的探讨丘脑室旁核(PVT)内多巴胺D2受体阳性神经元在大鼠焦虑样行为调节中的作用。方法采用腹腔注射脂多糖(0.2 mg/kg LPS)的方法构建炎性相关焦虑行为大鼠模型。对照组(control)接受等量盐水注射。通过比较LPS组(n=6)和control组(n=6)动物在旷场中央区和高架十字开放臂停留时间的差异,评价LPS组动物焦虑水平的变化。将LPS注射建立的焦虑模型大鼠,分为普拉克索组(n=6)和生理盐水组(n=6),观察PVT内微量注射D2受体激动剂普拉克索(6μg/μl)对动物焦虑样行为的影响。将D2特异性环化重组酶大鼠分为光敏感通道蛋白组(ChR2,n=6)和红色荧光蛋白组(mCherry,n=6)。采用470 nm光选择性刺激两组大鼠的PVT,观察两组动物焦虑水平的差异。结果与control组相比,LPS组大鼠出现焦虑样行为,在中央区停留时间缩短(P=0.002),开放臂停留时间减少(P=0.004)。与生理盐水组比较,普拉克索组大鼠的焦虑样行为减轻,在中央区停留时间增长(P=0.008),开放臂停留时间增加(P=0.041)。与mCherry组比较,ChR2组大鼠出现焦虑样行为,在中央区停留时间缩短(P=0.013),开放臂停留时间减少(P=0.018)。结论PVT内多巴胺D2受体阳性神经元的过度激活促进大鼠焦虑样行为的产生。

苯甲酰胺类多巴胺D2受体显像剂^18F-Fallypride的制备和生物分布

以(s)-(-)-N-(1-烯丙基吡咯烷-2-氨基甲基)-5-(3-磺酰基)-2,3-二甲氧基苯甲酰胺为氟标记前体,用K222催化进行氟标记,合成了(s)-(-)-N-(1-烯丙基吡咯烷-2-氨基甲基)-5-(3-18F)-2,3-二甲氧基苯甲酰胺(18F-Fallypride)。考察标记物的放化纯度及稳定性,并进行ICR小鼠体内分布特性研究。结果显示,18F-Fallypride的放化产率为40.75%,合成时间40 min,放化纯度大于97%,标记物的生理盐水溶液室温放置4 h,放化纯大于95%。小鼠静脉注射18F-Fallypride后120 min,纹状体/小脑高达14.27。18F-Fallypride进入血液后很快被组织摄取,其中以肾的早期摄取最高(9.91±1.24)%ID.g-1,各脏器的清除均较快(T1/2<1 h),骨的摄取率随时间的延长而增加。

多巴胺D_2受体基因-141C Ins/Del多态性与海洛因依赖的关系

目的分析多巴胺D2受体(DRD2)基因-141CIns/Del多态是否与海洛因成瘾易感性有关。方法采用PCR-RFLP技术检测380名海洛因依赖者(依赖组)和275名健康对照者(对照组)的DRD2-141CIns/Del基因多态,比较依赖组和对照组DRD2-141CIns/Del多态基因型及等位基因频率是否有差异。结果依赖组与对照组相比,DRD2-141CIns/Del的基因型频率(Del/Del:4.3vs6.5;Ins/Del:24.8vs27.2;Ins/Ins:70.9vs66.2)和等位基因频率(Del:23.6vs20.2;Ins:76.4vs79.8)差异均无显著性(分别为2=2.789,P=0.248;2=2.103,P=0.210)。结论DRD2-141CIns/Del基因多态与海洛因成瘾易感性可能无关。

多巴胺D_2受体显像剂Epidepride的合成及其^(131)I标记

以 3-甲氧基水杨酸为原料合成了 Epidepride[S- ( - ) - N- [( 1-乙基 - 2 -吡咯烷基 )甲基 ]- 5-碘 - 2 ,3-二甲氧基苯甲酰胺 ]及其标记前体 ( S- ( - ) - 5- (三正丁基锡 ) - N- [( 1-乙基 - 2 -吡咯烷基 )甲基 ]2 ,3-二甲氧基苯甲酰胺 ) ,并采用双氧水法对标记前体进行 131I标记 ,获得 131I- epidepride,标记率和放化纯度均大于 95%。13 1I- epidepride溶液体外稳定性好 ,4℃放置 15d放化纯度仍大于 90 %。131I- epide-pride与 D2 受体亲和力高 ,大鼠脑内纹状体与小脑的摄取比在 32 0 min时高达 2 37;在脑内纹状体的吸收可被 Spiperone完全阻断。因此 ,131I- epidepride有望成为多巴胺 D2 受体 SPECT显像剂。

大麻素CB1受体和纹状体多巴胺D2受体参与电针镇痛机制

目的:研究大麻素CB1受体和多巴胺D2受体是否参与单次或反复电针镇痛机制。方法:以完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)造成佐剂性关节炎大鼠模型,分别对单次及反复电针后的大鼠进行痛阈和纹状体D2受体mRNA表达水平检测。同时用CB1受体拮抗剂或激动剂干预。结果:①单次和反复电针后痛阈均升高,且关节炎痛+电针+拮抗剂组的镇痛效果弱于关节炎痛+电针组(P<0.01);关节炎痛+激动剂组与关节炎痛+电针组镇痛效果比较,差异无统计学意义。②无论是单次或反复电针,关节炎痛+电针+拮抗剂组大鼠纹状体D2受体mRNA表达水平显著低于电针组(P<0.01)。③在反复电针观察组中,关节炎痛+激动剂组大鼠纹状体D2受体mRNA表达水平与关节炎痛组相比,差异无统计学意义,显著低于关节炎痛+电针组(P<0.01)。结论:在本实验条件下,单次和反复电针产生的镇痛作用可能部分通过大麻素受体CB1介导,纹状体D2受体可能也参与其中。

早期帕金森病患者脑多巴胺D_2受体^(131)I-epidepride SPECT显像

目的 探讨脑多巴胺D2 受体1 31 I epideprideSPECT显像在早期帕金森病 (PD)中的临床价值。方法 对 10例正常对照者、4 6例早期未经替代治疗的PD患者 [Hoehn&Yahr (H Y)Ⅰ级 2 2例 ,H YⅡ级 2 4例 ]行多巴胺D2 受体1 31 I epideprideSPECT显像 ,用感兴趣区技术计算纹状体与枕叶、额叶的放射性比值 [(ST -OC) OC和 (ST -FC) FC]。结果 正常对照者双侧纹状体摄取无明显差异。PDH YⅠ级、Ⅱ级患者起病肢体对侧纹状体 (ST -OC) OC和 (ST -FC) FC较同侧均明显上调 ;随病情加重 ,纹状体 (ST -OC) OC和 (ST -FC) FC均逐渐增高 ,与对照组差异明显。结论 人脑多巴胺D2 受体1 31 I epideprideSPECT显像有助于PD的早期诊断。

苯甲酰胺类多巴胺D_2受体显像剂^(18)F-FSABZM的合成和标记

将5-硝基取代苯甲酰胺类化合物经硝基还原、N-双羟乙基化、甲磺酰化等反应制备氟标记前体,用K222催化进行氟标记,合成了(S)-N-[(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基]-5-[N-(2-[18F]氟乙基)-N-甲基磺酰基]胺基-2-甲氧基苯甲酰胺((S)-N-[(1-ethyl-2-pyrrolidinyl)methyl]-5-[N-(2-[18F]fluoroethyl)-N-methylsulfonyl]amino-2-methoxy-ben-zamide,18F-FSABZM)。标记前体、冷标记产物和各步合成中间体均经过核磁共振和质谱确证。结果显示,经HPLC检测,标记率为12%—15%,合成及纯化时间80—90min,纯化后放化纯度大于97%,稳定性好。

帕金森病模型猴^(11)C-Raclopride多巴胺D_2受体PET脑显像

目的探讨亚临床期和临床期帕金森病(PD)脑多巴胺D2受体(D2R)功能变化特征。方法建立亚临床期和临床期PD猴模型,合成多巴胺D2RPET显像剂11CRaclopride。对4只健康猴、4只亚临床期和2只临床期PD模型猴分别进行11CRacloprideD2RPET脑显像。利用感兴趣区(ROI)技术半定量分析纹状体D2R功能。结果健康猴11CRaclopridePET脑显像放射性浓聚于双侧纹状体,左右对称,双侧纹状体小脑放射性比值无明显差异(5.06±0.79,5.03±0.78,t=0.704,P>0.05)。亚临床期PD猴11CRaclopridePET脑显像双侧纹状体小脑放射性比值无明显差异(5.03±0.83,4.98±0.77,t=0.926,P>0.05)。与健康猴比较,纹状体小脑放射性比值差异无显著性(5.00±0.74,5.04±0.72,t=1.016,P>0.05)。临床期PD猴11CRaclopridePET脑显像双侧纹状体放射性分布不对称,2只临床期PD猴右侧比左侧纹状体小脑放射性比值分别增高19.69%和22.68%。毁损侧(右侧)纹状体D2R功能发生上调。结论PD亚临床期脑内纹状体D2R功能无明显变化,临床期毁损侧D2R功能出现上调。

多巴胺D2受体显像剂^(125)I-DMAIBZM的合成及生物分布实验

许多中枢神经系统的疾病如帕金森病等,与脑内多巴胺神经递质异常有关.利用放射性脑受体显像技术可以了解多巴胺受体信息,进而获得多巴胺的信息变化.苯甲酰胺类衍生物125I-(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(125I-AIBZM)与多巴胺D2受体具有很高的亲和力,但其入脑量很低.为提高125I-AIBZM的入脑量,本文对其标记前体(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(ABZM)的结构进行改造,得到了新的化合物(S)-4-二甲氨基-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-2-甲氧基苯酰胺(DMABZM).通过Idogen法对DMABZM进行标记得到标记化合物125I-DMAIBZM,标记率为74%,放化纯度达到99%.125I-DMAIBZM的脂溶性显著大于125I-AIBZM,入脑量有较大的提高.体外放射配基结合实验测得DMABZM的IC50为2.9589×10-7mol/L,表明其与多巴胺D2受体特异性结合且具有较高的亲和力,小鼠体内的分布实验表明,该标记物纹状体/小脑的放射性计数比可达6.5左右,说明该标记化合物可特异性介导到纹状体.本文结果表明,125I(123I)-DMAIBZM有望用于多巴胺D2受体的显像.

多巴胺D_3受体激动剂对肾脏G蛋白亚基Gα_(12)、Gα_(13)与D_3受体耦联的影响

目的观察多巴胺 D_3受体激动剂对肾脏 G 蛋白亚基 Gα_(12)和 Gα_(13)与 D_3受体耦联的影响。方法以WKY(Wistar-Kyoto)大鼠与自发性高血压大鼠(SHR)及其来源的肾脏皮质膜、肾脏刷状缘膜(BBM)以及近曲小管上皮细胞株(RPT)为研究对象,利用多巴胺 D_3受体激动剂 PD128907刺激 D_3受体,运用免疫共沉淀观察PD128907对 D_3受体与 Gα_(12)、Gα_(13)的相互关联的影响,并在 WKY 与 SHR 中对比关联改变与功能差异。结果 D_3/Gα_(12)与 D_3/Gα_(13)之间在 WKY 与 SHR 中均存在共连接。PD128907刺激 D_3受体后,在 WKY 中可明显增加 D_3/Gα_(12)以及 D_3/Gα_(13)之间的连接程度;在 SHR 中却显著降低 D_3/Gα_(12)以及 D_3/Gα_(13)之间的连接。其中,D_3/Gα_(13)在 SHR 中的基础连接程度明显强于 WKY,D_3/Gα_(12)连接基础状态在 WKY 与 SHR 之间无明显差异。采用 PD128907直接灌注 WKY 和 SHR 大鼠右肾动脉,发现 PD128907可以明显增强 WKY 的尿钠排泄率(FE_(Na)),但却对 SHR 的 FE_(Na)没有影响。结论 D_3受体激动剂可明显调节 D_3/Gα_(12)以及 D_3/Gα_(13)之间的连接程度,该调节作用异常可能在高血压的发生发展中发挥一定作用。

多巴胺D2受体-141C Ins/Del多态与海洛因渴求的关系

目的:探讨多巴胺D2受体-141CIns/Del基因多态与线索诱发海洛因渴求程度的关系。方法:对戒断期380名海洛因依赖者实施线索诱发渴求实验,采用PCR-RFLP技术检测其DRD2-141CIns/Del基因多态,比较不同基因型与线索诱发海洛因渴求程度的关系。结果:DRD2-141CIns/Del三种多态基因型中,线索暴露前后海洛因渴求程度的差异均无显著性(P>0.05)。结论:DRD2-141CIns/Del基因多态可能与线索诱发海洛因渴求的易感性无关。

多巴胺D_2受体基因启动子A-241G多态性在精神分裂症家系中的连锁不平衡传递

目的 :探讨多巴胺D2 受体基因 (dopamineD2 receptor,DRD2 )启动子A 2 41G多态性与精神分裂症的关系。方法 :采集 10 1个家系 ,每家有 2名或 2名以上符合ICD 10精神分裂症诊断标准患病同胞且父母存活。对DRD2启动子的A 2 41G多态性进行检测。结果 :(1)DRD2启动子的A 2 41G等位基因频度和基因型频度在父母组、非患病同胞组和患病同胞组之间差异无显著性 ,在 3组不同性别之间以及在精神分裂症不同亚型之间基因型频度和等位基因频度的分布差异亦无显著性 ;(2 )传递不平衡检验发现在患病同胞 (χ2 =0 .94,P >0 .0 5 ,OR =0 .83,95 %可信区间 0 .5 7～ 1.2 1)中未表现传递不平衡性 ,而在非患病同胞 (χ2 =6 .76 ,P <0 .0 1,OR =3 .17,95 %可信区间 0 .41～ 2 4.71)中存在传递不平衡性 ,其中 2 41A等位基因在非患病同胞中传递较多 ;(3)基因型与妄想总分、幻觉总分、思维形式障碍、情感障碍、精神性失语及症状持续时间等临床特征相关。结论 :DRD2启动子的A 2

多巴胺D2受体基因Taq1A多态性与利培酮、帕利哌酮所致高泌乳素血症的关系

目的：探讨多巴胺2（D2）受体基因Taq1A多态性与利培酮、帕利哌酮所致高泌乳素血症（HPRL）的关联性。方法：92例女性精神分裂症患者给予利培酮或帕利哌酮治疗4周,于治疗前后测定血清PRL水平及治疗后的9-羟利培酮血药浓度;并检测所有受试者的D2受体基因Taq1A多态性。结果：HPRL组（治疗后PRL水平≥3 500 mIU/L者,n=30例）与LPRL组（治疗后PRL水平〈3 500m IU/L者,n=37例）Taq1A基因型等位基因频率组间差异无统计学意义（χ^2=1.73,P=0.42）;Taq1A 3种基因型（A1/A1,A1/A2及A2/A2）患者血清PRL水平治疗后均明显增高,但治疗前后差值比较,组间差异无统计学意义（F=1.40,P=0.26）。结论：未发现D2受体基因Taq1A多态性与利培酮、帕利哌酮所致HPRL存在关联。

刺五加对颈性眩晕患者多巴胺D2受体基因CpG岛甲基化及体外小胶质细胞的M1/M2极性的影响

目的研究刺五加对颈性眩晕(CV)患者多巴胺D2受体(DRD2)基因CpG岛甲基化及体外小胶质细胞hmc-3的M1/M2极性的影响。方法收集30例未经治疗的CV患者、30例经刺五加治疗的CV患者、30例健康者的血液,样本分别分为CV组、治疗组、健康组。培养hmc-3小胶质细胞,分别应用20μg、40μg、80μg刺五加处理hmc-3细胞,分为对照组和刺五加组。提取血液全基因组DNA,提取血液或小胶质细胞中的总RNA。RT-qPCR检测DRD2、M1表型标志物CD16、CD32、CD86和M2表型标志物Arginase 1、CD206的mRNA水平。应用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测CV组、治疗组、健康组、对照组及刺五加组的DRD2甲基化。CCK-8法检测hmc-3细胞的增殖率变化。蛋白免疫印迹法检测DRD2、CD16、CD32、CD86、Arginase 1、CD206的蛋白水平。细胞免疫荧光法检测hmc-3细胞中的DRD2表达。结果与健康组比较,CV组DRD2的mRNA表达下调且甲基化率上调(P<0.05),但与CV组比较,治疗组的mRNA表达上调且甲基化率下调(P<0.05)。40μg、80μg的刺五加上调小胶质细胞hmc-3的增殖率和DRD2表达(P<0.05)。与对照组比较,刺五加下调M1表型CD16、CD32、CD86的mRNA和蛋白水平(P<0.05),但上调M2表型Arginase 1、CD206的表达(P<0.05)。结论刺五加抑制CV患者DRD2基因CpG岛的甲基化率,促进体外小胶质细胞的M2极性表型。

用于多巴胺D_4受体体内研究的3-[4-(4-[^(18)F]氟苯甲基)哌嗪-1-基]甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶的合成及生物学评价

目的 7 氮杂吲哚的衍生物L 74 5 ,870是一个新的、高亲和性 (Ki=0 4 3nmol·L-1)的多巴胺D4受体选择性配体 ,我们放化合成了其类似结构的新化合物 3 [4 (4 [18F]氟苯甲基 )哌嗪 1 基 ] 甲基 1H 吡咯并 [2 ,3 b]吡啶 ([18F]C) ,并作了大鼠体内生物学评价。方法 ([18F]C)的放化合成是通过 3 (哌嗪 1 基 )甲基 1H 吡咯并 [2 ,3 b]吡啶和 4 氟[18F]苯甲醛的胺烷基化反应完成 ,放化产率为 9 0 %～12 0 % ,放化纯度大于 98% ,比活度高于 37GBq·mol-1。结果 额叶皮质、海巴和延髓等脑区有较高的放射性摄取率 ,分别为 0 4 3%ID/ g和 0 35 %ID/g ;而纹状体、小脑处放射性摄取率较低。结论 大鼠体内的组织分布和代谢物研究表明 :[18F]C在大鼠脑组织区域有特异性分布 。