多巴胺D2受体抑制剂定量构效关系的研究

利用HyperChem软件包中的AM1半经验量子化学算法,将58个多巴胺D2受体抑制剂,作几何结构优化和计算,选取一些可能会影响及pIC_(50)值的26个理化和电子结构参数,作为描述分子的变量研究QSAR,利用偏最小二乘(PLS),穷举回归(QLS)及人工神经网络法(CGANN),以建立物理化学和电子结构等参数与其抑制活性之间的QSAR模型。结果表明:当化合物R_3位的疏水参数较大,R_5位疏水参数较小时抑制多巴胺D_2受体的能力较大,苯环上有硝基取代时不利于增加抑制活性。当该类化合物偶极矩较小,分子表面积较小、电子能较小,则有利于提高化合物的抑制活性。

苯甲酰胺类多巴胺D2受体显像剂^18F-Fallypride的制备和生物分布

以(s)-(-)-N-(1-烯丙基吡咯烷-2-氨基甲基)-5-(3-磺酰基)-2,3-二甲氧基苯甲酰胺为氟标记前体,用K222催化进行氟标记,合成了(s)-(-)-N-(1-烯丙基吡咯烷-2-氨基甲基)-5-(3-18F)-2,3-二甲氧基苯甲酰胺(18F-Fallypride)。考察标记物的放化纯度及稳定性,并进行ICR小鼠体内分布特性研究。结果显示,18F-Fallypride的放化产率为40.75%,合成时间40 min,放化纯度大于97%,标记物的生理盐水溶液室温放置4 h,放化纯大于95%。小鼠静脉注射18F-Fallypride后120 min,纹状体/小脑高达14.27。18F-Fallypride进入血液后很快被组织摄取,其中以肾的早期摄取最高(9.91±1.24)%ID.g-1,各脏器的清除均较快(T1/2<1 h),骨的摄取率随时间的延长而增加。

多巴胺D_2受体显像剂Epidepride的合成及其^(131)I标记

以 3-甲氧基水杨酸为原料合成了 Epidepride[S- ( - ) - N- [( 1-乙基 - 2 -吡咯烷基 )甲基 ]- 5-碘 - 2 ,3-二甲氧基苯甲酰胺 ]及其标记前体 ( S- ( - ) - 5- (三正丁基锡 ) - N- [( 1-乙基 - 2 -吡咯烷基 )甲基 ]2 ,3-二甲氧基苯甲酰胺 ) ,并采用双氧水法对标记前体进行 131I标记 ,获得 131I- epidepride,标记率和放化纯度均大于 95%。13 1I- epidepride溶液体外稳定性好 ,4℃放置 15d放化纯度仍大于 90 %。131I- epide-pride与 D2 受体亲和力高 ,大鼠脑内纹状体与小脑的摄取比在 32 0 min时高达 2 37;在脑内纹状体的吸收可被 Spiperone完全阻断。因此 ,131I- epidepride有望成为多巴胺 D2 受体 SPECT显像剂。

苯甲酰胺类多巴胺D_2受体显像剂^(18)F-FSABZM的合成和标记

将5-硝基取代苯甲酰胺类化合物经硝基还原、N-双羟乙基化、甲磺酰化等反应制备氟标记前体,用K222催化进行氟标记,合成了(S)-N-[(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基]-5-[N-(2-[18F]氟乙基)-N-甲基磺酰基]胺基-2-甲氧基苯甲酰胺((S)-N-[(1-ethyl-2-pyrrolidinyl)methyl]-5-[N-(2-[18F]fluoroethyl)-N-methylsulfonyl]amino-2-methoxy-ben-zamide,18F-FSABZM)。标记前体、冷标记产物和各步合成中间体均经过核磁共振和质谱确证。结果显示,经HPLC检测,标记率为12%—15%,合成及纯化时间80—90min,纯化后放化纯度大于97%,稳定性好。

不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D_2受体表达数的影响

目的:研究不同剂量左旋多巴对偏侧帕金森病大鼠行为学及多巴胺D2受体表达数的影响,并对其相应机制进行探讨。方法:采用6-羟多巴胺(6-OHDA)制备偏侧PD大鼠模型,用免疫组化染色法检测PD模型大鼠分别给予左旋多巴不同剂量(10 mg.kg-1.d-1,50 mg.kg-1.d-1,100 mg.kg-1.d-1)腹腔注射15 d前后纹状体部位的多巴胺D2受体表达数、观察大鼠行为学改变。结果:成功PD模型大鼠30 m in旋转圈数与损毁侧及其健侧的D2受体表达数增加百分数呈线性相关(r=0.927,P<0.01),大剂量左旋多巴干预后PD大鼠的旋转圈数明显少于对照组(P<0.05),且损毁侧纹状体多巴胺D2受体表达数明显少于对照组(P<0.01)。结论:大剂量左旋多巴干预能明显改善PD大鼠的旋转行为,并使纹状体多巴胺D2受体明显下调。

多巴胺D2受体显像剂^(125)I-DMAIBZM的合成及生物分布实验

许多中枢神经系统的疾病如帕金森病等,与脑内多巴胺神经递质异常有关.利用放射性脑受体显像技术可以了解多巴胺受体信息,进而获得多巴胺的信息变化.苯甲酰胺类衍生物125I-(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(125I-AIBZM)与多巴胺D2受体具有很高的亲和力,但其入脑量很低.为提高125I-AIBZM的入脑量,本文对其标记前体(S)-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-4-氨基-2-甲氧基苯酰胺(ABZM)的结构进行改造,得到了新的化合物(S)-4-二甲氨基-N-(1-乙基-2-吡咯烷基)甲基-2-甲氧基苯酰胺(DMABZM).通过Idogen法对DMABZM进行标记得到标记化合物125I-DMAIBZM,标记率为74%,放化纯度达到99%.125I-DMAIBZM的脂溶性显著大于125I-AIBZM,入脑量有较大的提高.体外放射配基结合实验测得DMABZM的IC50为2.9589×10-7mol/L,表明其与多巴胺D2受体特异性结合且具有较高的亲和力,小鼠体内的分布实验表明,该标记物纹状体/小脑的放射性计数比可达6.5左右,说明该标记化合物可特异性介导到纹状体.本文结果表明,125I(123I)-DMAIBZM有望用于多巴胺D2受体的显像.

中枢神经系统受体显像剂的研究(Ⅲ)──苯酰胺类多巴胺D_2受体显像剂取代基效应的研究

利用Ｈａｎｓｃｈ方法，研究了具有２－毗咯烷基侧链的苯酰胺类化合物的苯环取代基结构与其活性的定量关系．结果表明：苯环Ｒ３位取代基的脂溶性、电性，Ｒ５位取代基的共振效应等均是影响化合物与多巴胺Ｄ２受体亲和力的因素．所得到的取代基的综合结构效应对阐明Ｄ２受体－配体的相互作用机制及设计新的配体具有指导意义．

多巴胺D2受体显像剂^(99)Tc^m-MBZM的合成及生物性能评价

本工作以舒必利 (Sulpiride)为分子模型 ,在芳环的 5位上引入巯基 (替代磺酰胺基 )合成了 (S) -(- ) - 5-巯基 - N- [(1 -乙基 - 2 -吡咯烷基 )甲基 ] - 2 -甲氧基苯甲酰胺 [简写为 MBZM ]左旋异构体。通过“3+1”(二元混合配体络合 )方案 ,合成了一种新的 D2受体显像剂 99Tcm - MBZM。其在大鼠体内的生物分布实验结果显示 ,99Tcm- MBZM在血液中的清除较快 ,30 min后降到 0 .444% ID/ g;在肝和肾脏中的放射性则持续较高 ,30 min后仍分别达 2 .1 4 8和 2 .1 84% ID/ g;在脑中的摄取量偏低 ,2 min时仅为 0 .1 4 5 % ID/ g。因此 99Tcm - MBZM不能作为脑受体显像剂。

^(18)F-fallypride:一种多巴胺D2受体PET显像剂

18F-fallypride是一种新的多巴胺D2受体PET显像剂,它与多巴胺D2受体亲和力高(Ki=0.03nmol/L)、亲脂性适宜(logKw=2.43),适于纹状体及纹状体外多巴胺D2/D3受体显像。对其合成、药理作用及体内过程、临床应用等进行了综述。

β内啡肽、环氧合酶-2、多巴胺受体D2在右向左分流合并有先兆偏头痛患者血清中的表达及其与焦虑状况的关联性

目的 研究β内啡肽(β-EP)、环氧化酶-2(COX-2)、多巴胺受体D2(DRD2)在右向左分流(RLS)合并有先兆偏头痛患者血清中的表达及其与焦虑状况的关联性。方法 选取2022年7月至2023年7月吉林省一汽总医院收治的214例检查存在RLS的有先兆偏头痛患者,记作RLS偏头痛组,50例检查无RLS的有先兆偏头痛患者作为对照组,比较两组血清β-EP、COX-2、DRD2水平及焦虑自评量表(SAS)评分。另将RLS偏头痛组患者根据检查结果分为少、中、大量RLS偏头痛组(78例),分别为90、46、78例,比较三组血清β-EP、COX-2、DRD2水平及SAS评分。采用Spearman相关系数分析RLS偏头痛组患者血清β-EP、COX-2、DRD2水平与RLS分级、SAS评分的关系。结果 RLS偏头痛组血清β-EP、DRD2水平均低于对照组,COX-2水平及SAS评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中、大量RLS偏头痛组血清β-EP、DRD2水平低于少量RLS偏头痛组,大量RLS偏头痛组低于中量RLS偏头痛组,差异有统计学意义(P<0.05)。中、大量RLS偏头痛组血清COX-2水平、SAS评分高于少量RLS偏头痛组,大量RLS偏头痛组高于中量RLS偏头痛组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,RLS偏头痛组患者血清β-EP、DRD2水平与RLS分级、SAS评分呈负相关(rs<0,P<0.05),血清COX-2水平与RLS分级、SAS评分呈正相关(rs>0,P<0.05)。结论 随着RLS合并有先兆偏头痛患者RLS分级的升高,其血清β-EP、DRD2表达降低,COX-2表达升高,且三者均与患者的焦虑状态密切相关。

多巴胺D2受体显像剂^(131)I-nalepride的制备和动物体内研究

目的探讨多巴胺D2受体显像剂131I-nalepride(131I-(s)-(-)-N-[(1-烯丙基-2-吡咯烷基)甲基]-2,3-二甲氧基-5-三丁基锡苯甲酰胺)的制备以及在小动物体内的性质,评价其在神经精神疾病诊断应用中的可行性。方法以(s)-(-)-N-[(1-烯丙基-2-吡咯烷基)甲基]-2,3-二甲氧基-5-三丁基锡苯甲酰胺为标记前体,用双氧水法进行131I-nalepride的标记,行ICR小鼠生物分布特性实验,并对SD大鼠进行阻断实验和脑部放射自显影研究。结果 131I-nalepride标记率和放化纯均大于95%;ICR小鼠生物分布特性研究结果显示131I-nalepride在小鼠纹状体中摄取最多,小鼠尾静脉注射131I-nalepride 4h后,纹状体与小脑比值即达111.87,12h后达到最高,为416.97;SD大鼠阻断实验和脑部放射自显影结果显示,在注射131I-nalepride后,纹状体与小脑的光密度比值从7.43±0.86降至1.07±0.18,与阻断前比较差异有统计学意义(P<0.05),说明131I-nalepride与多巴胺D2受体特异性结合很高;131I-nalepride进入血液后迅速被组织摄取,其中以肝、肾的早期摄取最高,肝为(14.82±3.88)%ID/g,肾为(10.28±1.65)%ID/g,各脏器的清除均较快。结论 131I-nalepride对多巴胺D2受体具有高度亲和性和特异性,可作为多巴胺D2受体的单光子发射计算机断层成像术显像剂并作为工具药筛选、评价其他抗精神病药物对多巴胺D2受体的亲和力。

多巴胺D2受体PET显像剂^(18)F-Fallypride的临床前实验研究

目的研究多巴胺D2受体显像剂(s)-(-)-N-(1-烯丙基吡咯烷-2-氨基甲基)-5-(3-18F)-2,3-二甲氧基苯甲酰胺(18F-Fallypride)在小鼠体内、脑内的生物分布及安全性。方法ICR小鼠4组(每组5只),尾静脉注射18F-Fallypride注射液(3.7 MBq/0.2 mL),于注射后10、30、601、20 min断头处死,取感兴趣脏器称重,测量放射性计数,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及纹状体/小脑值。另取ICR小鼠5只,尾静脉注射18F-Fallypride注射液(3.7 MBq/0.2 mL)),即置microPET全身显像。按中国药典异常考察毒性项下考察18F-Fallypride注射液的安全性。结果体内生物分布及mi-croPET显像均显示18F-Fallypride进入血液后很快被组织摄取,血、心、脾、肺的放射性清除均较快,排泄途径主要为肝、肾、肠、膀胱。在脑组织中药物主要浓聚于纹状体,小脑放射性最低,纹状体/小脑的比值随时间延长而增大1。8F-Fallypride在小鼠体内没有引起明显的毒副反应,安全性能良好。结论18F-Fallypride对多巴胺D2受体具有高特异性结合,靶/非靶比值高,适于脑多巴胺D2受体显像。

5-羟色胺转运体抑制/多巴胺D2受体拮抗双重活性化合物的合成

目的设计、合成具有5-羟色胺转运体(SERT)抑制/多巴胺D2受体(DR2)拮抗双重活性的新化合物。方法采用分子杂合设计策略,设计、合成一系列苯并二氧戊/苯基哌嗪衍生物,采用体外放射性配体竞争结合实验测定其对SERT和DR2亲和力。结果化合物7e双重活性特征最为显著,对SERT亲和力为(4.2±1.7)nmol·L^(-1),DR2亲和力为(2.7±1.2)nmol·L^(-1)。结论分子对接模拟提示,化合物7e双重亲和力的结构基础在于苯并二氧戊环、苯基哌嗪构建单元与SERT和DR2氨基酸残基间存在潜在的相互作用。

多巴胺D2受体三维结构预测及与激动剂配体相互作用的研究

以细菌视紫红质（ｂａｃｔｅｒｉｏｒｈｏｄｏｐｓｉｎ）的三维晶体结构为模板，预测了多巴胺Ｄ２受体跨膜区的７个α螺旋肽段的三维结构。根据定点突变实验数据以及预测的受体三维结构，确定了激动剂配体结合腔由Ａｓｐ８６，Ｓｅｒ１４１，Ｓｅｒ１４４等１２个氨基酸残基组成。为了校正和检验所得的模型，分别以一组刚性、一组柔性的激动剂与受体对接（ＤＯＣＫ），分析－ｌｏｇＩＣ５０和结合能Ｅｂ相关性，较好的结果说明该模型是可靠的。

^(123)I-epidepride:多巴胺D_2受体显像剂

12 3 I- epidepride是一种较好的多巴胺 D2 受体 SPECT显像剂 ,其亲和力高 (Kd 为 2 4pmol/L) ,亲脂性相对较低 (lg Kw=2 .0 5 ) ,适于纹状体和纹状体外造影 ,在垂体腺瘤显像中有较高的临床应用价值 ,并可预测一些垂体腺瘤对多巴胺治疗的反应。

多巴胺D2受体显像剂^131I—epidepride的临床研究

目的：研究多巴胺D2受体显像剂epidepride在动物体内，脑内动态分布规律及显像特点，为进一步临床应用提供依据。方法：采用双氧水法标记制得^131I-epidepride。取SD大鼠，注射^131I-epidepride考察其大鼠体内，脑内结合分布特点，家兔2只用于SPECT显像，一只兔于注射后连续采集，应用ROI技术，获得相应时间－放射性曲线，另一只兔据结果选用epidepride在脑内分布最高时期，行脑断层显像，结果：双氧水法标记率大于95％，体内心肺吸收迅速，清除最快，该药从肝胆及胃肠系统代谢，脑内纹状体浓聚稳定，小脑清除快，显像研究示纹状体有较高浓集，结论：应用双氧水法标记epidepride,标记率高。^131I-epidepride在纹状体内有高度稳定浓集，是一种良好，有效的多巴胺D2受体显像剂。

多巴胺D_2受体激动剂和拮抗剂对缺血后海马CA1区神经元凋亡的影响

目的 :研究多巴胺D2 受体激动剂和拮抗剂对沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断 5min缺血再灌注模型。 2 4只沙土鼠随机分为假手术组 (Sham )、缺血组 (I -R)、D2 受体激动剂组 (I -PER)及D2 受体拮抗剂组 (I -SPI)。于再灌注第 7d行开阔法行为学检查、组织病理学检查及TUNEL法检测海马CA1区凋亡锥体细胞数。结果 :5min前脑缺血再灌注 7d可引起沙土鼠海马CA1区约 95 %的锥体细胞凋亡。行为学结果显示I -R组鼠探索活动较Sham组明显活跃 (P <0 0 1) ) ,I -PER组鼠的探索活动较I -R组明显减弱 (P <0 0 1)。组织病理学结果显示I -PER组海马CA1区存活锥体细胞计数明显多于I -R组 (P <0 0 1)。TUNEL法检测发现 ,与Sham组相比 ,其余 3组海马CA1区凋亡细胞数均增多 (P <0 0 5 )。I -PER组海马CA1区凋亡细胞数显著低于I-R组 (P <0 0 5 )。结论 :D2 受体激动剂可显著抑制沙土鼠前脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡 ,提高存活细胞数 ,改善行为学障碍。

多巴胺D_2受体显像剂^(99)Tc^m-mEBZM生物学评价

将ECD(L,L-ethyl cysteinate dimer)分子与对多巴胺D2受体具有较高亲和力的苯酰胺分子(BZM)偶联,制备99Tcm-mEBZM,并研究了99Tcm-mEBZM在大鼠和小鼠体内的生物分布。结果显示,99Tcm-mEBZM具有较高的体外稳定性和较高的脂溶性,在小鼠的生物分布中呈现较高的进脑量(2 min时为2.97％ID·g-1),小鼠与大鼠的纹状体/小脑比值可达到1.55,提示标记物与纹状体的结合具有特异性。

多巴胺D_2受体显像剂^(99)Tc^m-m-Br-p-EBZM的合成

以与多巴胺有较高亲和力的2-溴-4-(1-乙基-吡咯烷基-2-甲基)-氨甲酰基-5-甲氧基-苯胺为母体进行结构改造,再与L,L-乙撑基胱氨酸二聚物(L,L-ethylenecysteinedimer,ECD)分子偶联合成了标记前体m-Br-p-EBZM,再通过两步法进行99Tcm标记,制备99Tcm-m-Br-p-EBZM,并对其进行了稳定性的考察。结果成功制备了99Tcm-m-Br-p-EBZM,放化纯度>98%,且有较好的稳定性和较高的脂溶性。表明99Tcm-m-Br-p-EBZM可能成为理想的多巴胺受体显像剂。

四种多巴胺D_2受体拮抗剂剂量对其受体占据率的影响

抑制多巴胺Ｄ２受体功能的抗精神病药ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃｓ有较好的临床效果，但大剂量应用易产生锥体外系副作用，因此必须有效控制用药剂量。当脑多巴胺Ｄ２受体被拮抗剂占据５０％～６０％时产生疗效〔１〕；当占据≥８０％时，则产生锥体外系副作用〔２〕。不同的...