解脲脲支原体多带抗原基因分型鉴定及其临床应用研究

目的应用PCR技术对解脲脲支原体(Uu)多带抗原进行分型鉴定,探讨Uu各种基因型与临床病原学之间的关系。方法根据解脲脲支原体多带抗原基因(MBA)与16S rRNA基因和尿素酶基因结构设计10对引物,采用PCR基因扩增技术,对384例非淋菌性尿道炎和其他泌尿生殖道感染患者的临床标本,进行解脲脲支原体生物变种和基因型分型鉴定,并与Uu培养法作比较。结果384例性病门诊患者临床标本中,检测Uu培养阳性218例,阳性率56.8%;PCR基因扩增检测Uu-DNA阳性208例,总阳性率为54.2%:其中生物变种1(biovar 1)143例,占37.2%,生物变种2(biovar 2)65例,占16.9%;基因分型结果:生物变种1血清变种1(serovar 1)50例,占13.0%,血清变种3/14(serovars 3/14)64例,占16.7%,血清变种6(serovar 6)29例,占7.6%;生物变种2亚型1(subtype 1)25例,占6.5%,亚型2(subtype 2)30例,占7.8%,亚型3(subtype 3)10例,占2.6%。结论Uu是性病的重要病原体,MBA多带抗原PCR基因分型鉴定具有简便、快速、敏感、特异之优点。

解脲支原体3血清型和14血清型多带抗原B细胞表位预测

目的预测解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu3和14血清型多带抗原(multiple banded antigen,MBA)的优势B细胞表位和Th表位。方法利用GOR4和HNN方法预测Uu3和Uu14血清型MBA的二级结构,结合其跨膜区域、亲水性、极性、柔韧性、表面可能性和抗原性等方面特征,预测其优势B细胞表位;同时筛选MHC-Ⅱ类限制性Th表位。合成4个富含B/Th细胞多表位肽,免疫小鼠评价其免疫原性。结果 Uu3血清型和14血清型MBA的B、Th表位具有高度同源性,其共同的富含B/Th细胞抗原表位位于N端31-51、55-75、97-115和154-168肽段。MBA aa31~51(F1)、MBA aa 55~75(F2)、MBA aa 97~115(F3)及MBA aa 154~168(F4)4个多表位肽具有良好的免疫原性,其诱导产生的特异性抗体明显高于PBS对照组(P<0.01)。结论多参数预测Uu MBA B细胞优势表位可为MBA单克隆抗体的制备和Uu表位疫苗设计等研究提供理论依据。