蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊随机扩增多态DNA分析

从 2 4个随机引物中筛选出 5个引物 ,对蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊 3个绵羊品种共计 89个个体进行了随机扩增多态 DNA分析 ,根据扩增片段计算了蒙古羊、兰州大尾羊和哈萨克羊扩增 DNA指纹条带的平均带纹数分别为 5 .32 ,5 .2 8和 5 .78;平均带纹相似率分别为 0 .5 9,0 .6 0和 0 .6 2 ;平均杂合度分别为 0 .75 ,0 .78和 0 .77。用 Nei氏片段共享度公式计算了 3个群体的遗传距离 ,构建了其关系图 ,聚类分析结果表明 ,蒙古羊与兰州大尾羊的遗传距离最小 (0 .0 34) ,彼此亲缘关系较近。相对而言 ,兰州大尾羊与哈萨克羊的遗传距离最大(0 .10 4 ) ,彼此亲缘关系较远。

中国大陆日本血吸虫随机扩增多态DNA(RAPD)的初步研究

目的对中国大陆浙江、安徽、江西、湖北、湖南、四川、云南7省日本血吸虫种群进行遗传变异研究。方法应用随机扩增多态DNA（RAPD）技术，对5条寡核苷酸随机引物扩增。结果获得32条DNA片断，17个基因位点，长度在100bp～2600bp之间。各种群多态百分率（P）为52．9～70．6，平均杂合性（H）为0．269～0．363。中国大陆湖区日本血吸虫各种群间遗传距离（D）为0．000～0．023．山区种群间为0．155，湖区种群与山区种群间遗传距离为0．036～0．139。同时，P235-930bp，P293－910bP分别为四川种群和云南种群特异性DNA片断，P256－720bp为日本血吸虫雌虫特异性DNA片断。对中国大陆日本血吸虫虫株复合性和系统发生作简要讨论。

多态DNA病毒对寄生蜂宿主生理功能的影响

多态ＤＮＡ病毒（ｐｏｌｙｄｎａｖｉｒｕｓ，ＰＤＶ）由一组特异的病毒组成，其生活史与某些寄生蜂种类有着密不可分的联系。大量研究表明该种病毒是决定某些寄生蜂能否在寄主体内成功寄生的关键因子之一［１］。本文将综述已有的研究报道，重点阐明ＰＤＶ随寄生蜂产卵而...

产ESBLs的肺炎克雷伯菌在老年患者中的随机多态DNA分型研究

目的 了解我院老年患者中产 ESBLs的肺炎克雷伯菌的耐药特点。方法 对 2 4 5名住院的 60岁以上患者感染性标本分离培养后 ,用全自动微生物鉴定及药敏系统 (VITE- AMS)进行鉴定和药敏 ,然后对产 ESBL s株进行 RAPD分型。结果 分离出 88株肺炎克雷伯菌 (35.5% ) ,其中产 ESBLs的 2 0株 (2 2 .7% ) ,用 RAPD技术可分为 1 1型。结论 产 ESBLs的肺炎克雷伯菌是引起老年患者感染的病原菌之一 ,对其型别的检测有利于流行病学的调查和控制 ESBLs的传播和流行 ,使老年患者的院内感染性疾病得以控制。

用随机扩增多态DNA(RAPD)区分青海血蜱与日本血蜱

目的用随机扩增多态DNA(RAPD)技术确定青海血蜱与日本血蜱的分类地位。方法分别提取青海血蜱与日本血蜱的DNA,确定聚合酶链反应(PCR)总体积、反应条件。选取8条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物,进行RAPDPCR扩增反应。将扩增产物制备成DNA图谱,比较青海血蜱与日本血蜱基因组DNA多态性,从DNA水平鉴定这2种蜱。结果2种蜱仅有少部分DNA条带相同,大部分条带不同。结论RAPD技术可准确地鉴别青海血蜱与日本血蜱这2种形态特征十分相似的蜱种。

随机扩增多态DNA技术在地高辛标记HCMV DNA探针中的应用研究

应用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术结合地高辛非放射性标记系统制备了人巨细胞病毒ＤＮＡ探针，并与常规随机引物法进行对照。ＲＡＰＤ－ＰＣＲ制备的ＨＣＭＶＤＮＡ探针长度呈多态性，扩增过程中不需合成特异引物，探针特异性强，产量高，用５０ｎｇＨＣＭＶＤＮＡ模板即可制备８．０μｇ探针；标记体系中ＲＡＰＤ－ＰＣＲ方法Ｄｉｇ－ｄＵＴＰ浓度为５．２％。表明ＲＡＰＤ－ΡＣＲ技术可用于少量ＤＮＡ模板制备大量ＤＮＡ探针，适用于原位杂交等需高浓度探针的核酸杂交及临床大量标本的测试。

随机扩增多态DNA(RAPD)技术及其在动物分子生物学研究中的应用

随机扩增多态DNA(RAPD)技术是1990年由Williams等和Welsh等两个研究小组同时发展起来的(RandomlyAmplified Polymorphic DNA,简称RAPD),随机扩增多态DNA(RAPD)技术在分子生物学应用研究中与RFLP一致,但具有一些比RFLP更优越的地方(王斌,1994)。RAPD技术出现后就迅速地发展起来。在动物的遗传变异研究中,已取得了一些有意义的结果(杨绍清,1996)。与其它生物技术结合可广泛用于品种和品系的鉴定及其遗传纯度的测定,品种、品系遗传关系的研究,基因的分离定位,基因图谱的构建,制备新的特异性探针等。

随机扩增多态DNA技术在食用菌研究中的应用

RAPD(Bandom Amplified Polymorphic DNA)，即随机扩增多态DNA，是1990年由威兰斯(Willams)和韦尔什(Welsh)两个研究小组几乎同时建立和发展起来的一种新型遗传标记技术。由于其具有独特的检测DNA多态性的方式及快速、简捷、高效等优点，因而在短短的时间内RAPD技术已渗透到有关基因研究的各个领域。本文简单介绍RAPD技术在食用菌研究中的应用。

利用SSR标记研究甘蓝型油菜叶绿体基因组DNA多态性

叶绿体基因组具有母性遗传、单倍性、高度的保守性和明显的种内差异等特点。研究不同品种叶绿体基因多样化程度,可为甘蓝型油菜的收集与引种及遗传改良提供指导。利用15对特异性叶绿体SSR标记对287份国内外甘蓝型油菜叶绿体基因组多样性进行了分析,结果显示,在15对叶绿体SSR特异引物中,5对引物扩增产生多态性条带合计19条,平均每对引物检测出3.8条多态性条带;287份材料共划分成14个单倍型,优势单倍型H01占比74.91%、H02占比13.59%、H03占比4.88%,其余11种单倍型(H04-H14)占比合计6.62%;H02为波里马、陕2A胞质类型,为中国特有单倍型;国外甘蓝型油菜中,俄罗斯与瑞典的单倍型较丰富,引进俄罗斯与瑞典的资源能更高效拓宽中国甘蓝型油菜的遗传多样性本底。本研究还获得2对引物(MF-4和ccmp2)得到特异条带,并为此建立了快速鉴定波里马、陕2A胞质类型的方法,为波里马与陕2A细胞质类型材料的鉴定与保护提供了方法。

六种蝗虫基因组DNA多态性的RAPD标记研究

运用随机扩增多态 DNA技术对斑翅蝗科 Oedipodidae中三属六种蝗虫基因组DNA进行了多态性比较 ,共扩增出 2 2条特异性片断 ,分子量大小为 650～ 1 990 bp之间 ,并根据各种间片段共享度构建了 UPG聚类关系图 .研究结果表明 ,大垫尖翅蝗和甘蒙尖翅蝗的片段共享度为 0 .375;红翅皱膝蝗和鼓翅皱膝蝗的片段共享度为 0 .2 86;亚洲小车蝗和黄胫小车蝗的片段共享度也为 0 .2

海南黄牛和徐闻黄牛线粒体DNA的多态性及其品种分化关系

本文以ＡｐａⅠ、ＡｖａⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＤｒａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、ＳａｌⅠ、ＳｃａⅠ和ＸｈｏⅠ等１４种限制性内切酶分析来自海南岛的海南黄牛和雷州半岛的徐闻黄牛的线粒体ＤＮＡ限制性片段长度多态性（ｍｔＤＮＡＡＲＦＬＰ）。结果只有一种限制性内切酶（ＳａｌⅠ）在海南黄牛中检测到多态性，并且其中的Ｃ型（１５．０，１．３）尚未见报道。我们的结果还显示，两个品种６个个体的ｍｔＤＮＡ基因单倍型全部表现为Ａ型，即瘤牛的血统。徐闻黄牛和海南黄牛ｍｔＤＮＡ极低的遗传变异度表明两个品种的亲缘关系很近，从而在分子生物学水平为其合称为雷琼黄牛提供了佐证。

玉米双胚苗及其随机多态性DNA分析

利用中国原子能科学研究院HI 13串列加速器产生的12C重离子辐照玉米自交系478干种子,在经20Gy剂量辐射的M1代中产生了一株双胚苗。应用随机多态性DNA(RAPD)分析技术,观测到双胚苗的大、小苗之间及其与亲本自交系478在RAPD指纹上存在着差异,从分子水平上初步证实了双胚苗为自交系478的变异类型。

PCR扩增近交系大鼠微卫星位点DNA多态性的研究

本实验选取大鼠 7条染色体上的微卫星位点合成了 10对引物 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增技术对国内北京和哈尔滨等 4家单位提供的 6个品系 (SHR、SHRSP、LEW、RCS、WKY和F34 4)的 8个近交系大鼠群体进行了DNA多态性分析的研究。结果表明 :9个微卫星位点具有显著多态性 ;不同品系个体之间具有多态性 ;同一群体不同个体之间除SHR(哈 )的SMST位点和WKY(哈 )的AGT位点出现一定的差异外 ,其他均没有差异 ;不同地区同一品系的不同个体之间也存在一定的差异。该方法能有效地对近交系与杂交系、品系与品系、品系与亚系加以区分。因此 ,本实验为开展近交系大鼠遗传作图、基因定位和为实验动物的遗传背景监测提供可靠的信息 ,为大鼠遗传基因的研究提供了一个快捷简便、特异准确的方法。

铅胁迫对不同基因型谷子幼苗生理特性及基因组DNA多态性的影响

以4种基因型谷子为供试材料,采用盆栽土培法,研究了土壤重金属Pb2+胁迫对谷子幼苗基因组DNA多态性和可溶性糖、脯氨酸、丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:经50～400mg·kg-1Pb2+处理30d后,4种谷子幼苗体内可溶性糖含量随Pb2+浓度上升而逐渐降低,降幅为对照的31.45%～49.11%。脯氨酸含量则表现为低浓度(≤100mg·kg-1)的促进和高浓度(≥200mg·kg-1)的抑制效应,MDA含量均有增加且与对照差异显著。Pb2+胁迫下不同基因型谷子幼苗基因组DNA的RAPD图谱发生明显变化,表现为单条或多条RAPD谱带的缺失、增加及荧光强度的增强或减弱,表明Pb2+明显影响谷子幼苗细胞中基因组模板DNA的稳定性,DNA多态性变化与Pb2+浓度之间存在剂量-效应关系。不同基因型谷子对Pb2+胁迫的生理和遗传损伤响应存在差异。利用RAPD技术获得的DNA多态性变化可作为检测Pb2+遗传毒性效应的生物标记物。

桑树栽培种的随机扩增DNA多态性（RAPD）研究

通过２０个随机引物的扩增结果，显示出分属于４个栽培种的２０个材料的ＲＡＰＤ多态性，表明各种、品种间遗传分化上的差异：计算了２０个材料的遗传相似系数和遗传距离，建立了它们的ＵＰ－ＧＭＡ系统树：结果表明小官桑与鲁桑系有较近的亲缘关系，广东桑有较复杂的遗传背景。进一步探讨了桑树栽培种及种内各品种之间的亲缘关系。

用微卫星引物PCR分析棉蚜不同蚜型的DNA多态性

用微卫星引物PCR方法 ,对棉蚜Aphisgossypii干母、干雌、孤雌蚜 (有翅迁飞孤雌蚜和无翅孤雌蚜 )、性母、性雌蚜和雄蚜的DNA多态性进行分析。结果表明 :①棉蚜的有性蚜型和无性蚜型之间在遗传上有较大的差异 ;②性母与性雌蚜和雄蚜的遗传关系都十分接近 ,说明同一性母既产性雌蚜 ,也产雄蚜 ;③干母和干雌的遗传关系很近 ,但孤雌蚜已与二者有分化。

不同致害性褐飞虱种群的DNA多态性研究

采用RAPD_PCR方法 ,对分别在水稻品种TN1、Mudgo和ASD7上纯化 82代的 3个不同致害性褐飞虱种群的基因组DNA多态性进行了分析。从 2 0 5个RAPD引物中筛选出了具种群特异性的引物 10个 ,结果表明 :尽管未达到统计意义上的显著差异 ,雌、雄两性试虫种群间的遗传多样性一般高于种群内 ,种群内的多样性则以未经抗性品种筛选的TN1种群最高。用相似性系数进行类平均距离法聚类 ,能将同一致害性种群的各个个体与其他致害种群分开 ,雌、雄虫均无一例外 ,表明不同致害性种群间存在明显的遗传分化 ;同时雌、雄两性试虫分别归为 2组 ,提示褐飞虱致害性遗传可能与性染色体连锁。不同致害性种群存在特有条带 。

镉胁迫对蚕豆幼苗基因组DNA多态性的影响

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测镉（cd）胁迫对蚕豆幼苗根尖DNA多态性的影响。结果表明，不同浓度（2．5、5和15mg·L^-1）镉处理7d后，蚕豆幼苗根伸长及根系中可溶性蛋白质含量均受到了抑制。选用12条寡核苷酸引物（10bp）对蚕豆幼苗根尖细胞中基因组DNA进行RAPD扩增，其中有6个引物产生特异性PCR产物。对照组蚕豆幼苗根尖基因组DNA的RAPD图谱中可分辨出86条RAPD谱带，其分子量为200—2520bp。处理组与对照组RAPD图谱之间存在明显差异，且与镉浓度之间存在剂量-效应关系。这些结果表明，镉影响蚕豆幼苗根尖细胞中基因组模板的稳定性，故利用RAPD技术获得的DNA多态性变化可作为检测镉黄传毒性效应的生物标记物。