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恶性疟多抗原表位融合基因在不同载体中的克隆与表达 被引量:1
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作者 王衣祥 曹诚 +1 位作者 毛盛贤 马清钧 《生物技术通讯》 CAS 2001年第3期188-191,共4页
通过PCR方法扩增并分析了恶性疟原虫多抗原表位融合基因awte序列 ,再分别克隆于温度诱导型融合表达载体pEX31b和IPTG诱导型融合型表达载体pGEMEX1中 ,并进行了诱导表达 ,并对表达产物MS2 AWTE和T7Φ10 AWTE融合蛋白进行间接ELISA检测 ... 通过PCR方法扩增并分析了恶性疟原虫多抗原表位融合基因awte序列 ,再分别克隆于温度诱导型融合表达载体pEX31b和IPTG诱导型融合型表达载体pGEMEX1中 ,并进行了诱导表达 ,并对表达产物MS2 AWTE和T7Φ10 AWTE融合蛋白进行间接ELISA检测 ,证实MS2 AWTE和T7Φ10 AWTE都具有免疫学活性。另外 ,同样将awte基因分别克隆于温度诱导型和IPTG诱导型非融合表达载体pBV2 0 0、pKEN中并进行诱导表达 ,但在SDS 展开更多
关键词 PCR 基因克隆 融合蛋白 ELISA 恶性疟原虫 多抗原表位融合基因 awte 载体
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A/O型FMDV多抗原表位融合基因植物表达载体构建及转化柱花草的研究
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作者 肖旭倩 胡正龙 +3 位作者 沈文涛 言普 王冬梅 周鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1565-1570,共6页
【目的】获得含有A/O型FMDV多抗原表位融合基因4种不同组合的转基因柱花草植株。【方法】用限制性内切酶Xba I和Sac I双酶切4个中间载体和质粒pBI121,回收连接后获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xs T/xsBT/xsBTT)及相应农杆菌工程菌株... 【目的】获得含有A/O型FMDV多抗原表位融合基因4种不同组合的转基因柱花草植株。【方法】用限制性内切酶Xba I和Sac I双酶切4个中间载体和质粒pBI121,回收连接后获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xs T/xsBT/xsBTT)及相应农杆菌工程菌株,利用农杆菌介导法转化热研2号柱花草(Stylosanthes guianensis cv.ReyanⅡ)子叶叶盘。采用卡那霉素筛选,特异引物和转基因检测引物进行PCR及RT-PCR检测不同组合多抗原表位融合基因的转录情况。【结果】获得36株抗性转化株,经PCR检测有16株为阳性,RT-PCR检测后有11株为阳性,表明4种组合多抗原表位融合基因在转基因植株中获得转录。【结论】此研究为进一步揭示同型与异型FMDV之间多抗原表位基因不同融合方式的免疫原性和免疫效果奠定了研究基础。 展开更多
关键词 蹄疫病毒 多抗原表位融合基因 农杆菌介导法 柱花草 遗传转化
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