多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白(MRP1)的表达抑制作用(英文)

为了研究多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白表达抑制的作用,我们构建了含有20个可以自身切割的顺式作用核酶和10个靶向MRP1基因特定位点的反式作用核酶的多核酶表达系统。利用RT-PCR、Western blot和MTT分析了多核酶系统分别与MRP1靶基因质粒和MRP1全长基因质粒共转染的HEK293细胞。结果显示,多核酶表达系统能够明显降低荧光融合蛋白在HEK293细胞中的表达。RT-PCR分析表明,MRP1靶mRNA降低程度与多核酶表达系统所含的反式作用核酶数目有关。Western blot分析显示了与RT-PCR相似的结果。MTT分析表明,多核酶表达系统能够逆转由MRP1基因转染HEK293细胞产生的多药耐药性。结果提示,含有多个核酶的表达系统对MRP1基因的抑制效应优于单核酶的表达系统。因此,该策略可能用于基因治疗肿瘤或其他疾病。