气相色谱-质谱法测定小麦中二噁英类多氯联苯

目的建立气相色谱-质谱法(Gas chromatograph-mass spectrometry,GC-MS)同时快速测定小麦中12种二噁英类多氯联苯(dioxin-like polychlorinated biphenyls,DL-PCBs)的分析方法。方法样品采用改进的QuEChERS方法,经丙酮-正己烷(1:2,V:V)溶液超声提取,羧基化多壁碳纳米管和N-丙基乙二胺混合净化剂净化,用Agilent HP-5MS色谱柱分离,GC-MS选择离子监测模式进行测定,外标法定量。结果12种DL-PCBs在5~500μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.999。方法的检出限为0.5~0.8μg/kg,定量限均为5μg/kg,在5、10、100μg/kg添加水平的平均回收率为88.6%~115.0%,相对标准偏差小于6.5%(n=5)。结论该方法样品前处理简单快速,溶剂消耗少,对检测条件要求低,适用于同时测定小麦中12种DL-PCBs。

钢铁厂及其周围环境中二噁(口英)和多氯联苯土-气交换研究

利用逸度模型及其相关算法,研究了东北某钢铁厂及其周围居住区、背景对照区二噁(口英)和多氯联苯污染物土-气迁移方向和交换通量。结果表明,二噁(口英)主要由大气向土壤迁移,其土-气交换通量为每月618～5373mg/km2,多氯联苯污染物主要由土壤向大气迁移,交换通量为每月47～230mg/km2。基于实测污染物的浓度和逸度模型能较好地估算该地区二噁(口英)、多氯联苯等持久性有机污染物的土-气界面迁移规律。

对多氯代二苯并-对-二噁英的定量结构色谱保留时间的理论研究

采用密度泛函理论的B3LYP方法和分子连接性指数理论,计算了氯代二苯并-对-二噁英的结构参数,并用逐步回归分析建立了相应的QSRR模型.所建模型计算值和观察值的相关系数分别为0.944和0.936,标准偏差分别为0.299和0.464,模型具有良好的稳健性和预测能力,交互验证系数分别为0.818和0.79。比较得出量子化学方法所建模型的性能更好.

纸浆中代表性酚类对二苯并-对-二噁英/二苯并呋喃氯化生成多氯代二噁英的影响

二苯并-对-二噁英/二苯并呋喃(DBD/F)的直接氯化是纸浆氯漂白过程中形成多氯代二噁英(PCDD/Fs)的重要途径.纸浆中的酚类在氯化漂白过程中也将消耗氯而生成氯化产物.本文在模拟纸浆氯漂白的实验条件下,对实验环境中的DBD/F进行检测,排除了背景DBD/F值对实验的干扰后,研究了纸浆中含量较高的酚类(苯酚、愈创木酚和儿茶酚)对DBD/F氯化生成PCDD/Fs的转化率和同系物模式的影响.发现酚类的加入使DBD/F氯化生成PCDD/Fs的氯化度下降;一定剂量酚类的加入会使体系中DBD/F氯化生成PCDD/Fs的转化率增大,当超出剂量范围后,DBD/F氯化生成PCDD/Fs得到抑制,不同酚类的效应大小各不相同.

多氯代二苯并-对-二噁的微生物降解

从多氯代二苯并 对 二 (PCDDs)污染的土壤和含氧沉积物中分离筛选出 8株降解PCDDs的菌株 ,均能以一氯代和二氯代二为单一碳源和能源生长并使其降解 ,多数几乎不能降解三氯代二 .但是 ,用邻二氯苯作为初级营养共代谢物 ,可以增强菌株对较高氯代二 (如三氯代和四氯代二 )的降解能力 .利用所筛选菌株中的 1株 ,经鉴定为假单胞菌EE4 1 (Pseudomonassp EE4 1 ) .降解试验结果表明 ,1 ,2 ,3 TrCDD在浓度为1 2mg L时 3周内可降解 33% ,2 ,3,7,8 TCDD在 0 1mg L时 3周内最多可降解 37 8% .试验的高氯代二 (P CDD ,H6 CDD ,H7 CDD和OCDD)则只被菌体强烈吸收并积累 ,却不能被降解 .

高分辨气相色谱-质谱法同时测定食用油中二噁英和呋喃的多氯(溴)代二苯并衍生物的含量

提出了用高分辨气相色谱-质谱法同时测定食用油中17种多氯取代以及8种多溴取代的苯并二噁英和苯并呋喃含量的方法。食用油样品依次经过酸性硅胶床、多段硅胶柱及Florisil柱净化。净化中分别用正己烷、正己烷-二氯甲烷(97+3)混合液、正己烷-二氯甲烷(40+60)和单一的二氯甲烷作为淋洗剂,洗脱上述化合物,GC-MS测定。各化合物的检出限(3S/N)在0.022 3~1.67μg·L-1之间。用标准加入法测得多氯代化合物的回收率在97.8%~118%之间,多溴代化合物的回收率在96.5%~113%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)分别为4.9%~6.7%和6.6%~17%之间。

同位素稀释/高分辨气相色谱-质谱联用同时测定空气中二英、多氯联苯、多溴联苯醚和溴代二英

建立了一套全自动索氏萃取仪,采用快速提取-酸性硅胶层析柱-酸碱多层硅胶层析柱-活性炭分散硅胶柱-同位素稀释/高分辨气相色谱-质谱联用分析技术同时测定环境空气中二噁英、多氯联苯、多溴联苯醚和溴代二噁英类化合物。利用淋洗曲线片段切割技术消除了多氯联苯和多溴联苯醚的空白干扰,优化了样品提取及前处理方法。在优化条件下,对环境空气进行测定,采样内标回收率范围在63%～100%之间、净化内标在52%～132%之间,方法检出限在6×10-4～1×10-2pg/m3之间,其中BDE-209的检出限为0.3pg/m3,满足环境空气中4类化合物的分析要求。二噁英和二噁英类多氯联苯毒性当量和在0.216～0.949pg/m3（WHO-TEQ）之间,溴代二噁英毒性当量为0.0181～0.0462pg/m3（WHO-TEQ）,多溴联苯醚含量范围为105～132pg/m3。

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英和Aroclor 1254对大鼠睾丸的单独和联合毒性效应

为了探讨2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)和Aroclor1254对大鼠睾丸的单独和联合毒性效应,采用2×2析因设计将SD大鼠随机分为4组,即对照组、Aroclor1254单独染毒组(10mg·kg-1)、TCDD单独染毒组(10μg·kg-1)和联合染毒组(TCDD10μg·kg-1+Aroclor125410mg·kg-1),每组5只.灌胃染毒,每天1次,连续12d.染毒结束后处死大鼠,称睾丸湿重、检测睾丸组织病理学及睾丸组织脂质过氧化状况.结果表明,各染毒组大鼠的睾丸均呈现毒性效应,表现为睾丸湿重降低,睾丸组织出现明显的病理学改变,丙二醛(MDA)水平升高、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,这些毒性效应多数在联合染毒组表现更为明显.析因分析结果表明TCDD与Aroclor1254对大鼠睾丸的联合毒性效应为相加作用.以上结果提示TCDD与Aroclor1254单独和联合染毒均具有睾丸毒性,且二者的联合效应为相加作用,在对二噁英和PCBs进行环境风险评价时应考虑这种联合作用.

2,3,7,8-四氯苯并二噁英(TCDD)短期染毒可造成着床前胚胎丢失并伴随雌性生殖器官中毒物相关蛋白的诱导表达

为探明妊娠早期胚胎的丢失是否与卵巢、输卵管、子宫组织受到2,3,7,8-四氯苯并二噁英(TCDD)直接毒害有关,检测了NIH小鼠胚胎着床前期和后期TCDD暴露对胚胎毒性影响的敏感性,并利用免疫组化方法分析了模型动物肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中TCDD所引起的AhR、ARNT以及Cyp1a2分子标记物的变化.检测发现:妊娠第9d,100ng·kg-1·d-1剂量TCDD经口染毒,造成胚胎着床数量减少,且着床前期暴露的影响大于着床后期;子宫蜕膜反应受到明显抑制;胚胎迁移率没有明显变化,但胚胎数量减少.免疫组织化学分析发现正常组小鼠的肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中有AhR和Cyp1a2弱阳性信号表达,ARNT有细胞核的强阳性信号表达;妊娠第1～8d、第1～3d和第4～8d处理组小鼠肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中的AhR、Cyp1a2的阳性面积和光密度值均高于正常组;随处理时间和组织蓄积量的增加,ARNT在组织中的变化由胞核(妊娠第1～3d组)表达到胞浆(妊娠第4～8d组)表达,然后完全无表达(妊娠第1～8d组).以上研究结果表明:TCDD对早期妊娠小鼠子宫、输卵管和卵巢组织中的AhR、ARNT和Cyp1a2的激活和代谢方式与肝脏相同,说明雌性生殖系统中的组织有TCDD蓄积和代谢活性,这可能是导致早期胚胎迁移、着床等过程改变,造成胚胎丢失的重要原因.

妊娠小鼠子宫对2,3,7,8-四氯苯二噁英毒性的敏感性研究

对妊娠早期小鼠用不同剂量的TCDD进行处理 ,妊娠第 9天采集血清、肝、肾、脑、脂肪、子宫和胎儿等样品 ,利用酵母报道基因系统进行组织中TCDD含量检测 ,结果发现脂肪中TCDD含量最高 ,其次是肝脏、子宫和胎儿 .由于TCDD的毒性需通过体内包括细胞色素P45 0 1A2在内的代谢酶的活化 ,采用免疫组化的方法对TCDD诱导的该酶的表达水平进行了检测 ,发现肝脏和子宫的阳性反应最强 ,并且所需剂量很低 ,肾脏和脂肪组织在较高剂量出现阳性反应 ,而脑组织则仅在更大剂量时出现微弱的阳性信号 .此现象说明子宫和肝脏一样 ,可以通过芳香烃类受体诱导细胞色素P45 0 1A2酶的产生 ,活化TCDD ,引起对细胞的毒性并产生对胚胎的毒性 .在低剂量时观察到的强烈的生殖毒性应该和TCDD在子宫的蓄积和子宫内敏感的细胞色素P45 0

高分辨气相色谱-高分辨质谱分析2 ,5-二氯酚工业品中的二[口恶]英及多氯联苯

建立了高分辨气相色谱-高分辨质谱方法分析2,5-二氯酚工业品中的二(噁)英(PCDD/Fs)和多氯联苯(PCBs).比较了2,5-二氯酚工业品经甲苯直接溶解后净化、溶解于0.15 mol/L NaOH水溶液中再与正己烷液液萃取后净化两种前处理方法对PCDD/Fs及PCBs出峰峰型和回收率的影响.对于空白样品,两种方法PCDD/Fs及PCBs回收率相差不大.对于实际样品,先溶解于碱液再液液萃取的方法明显优于直接溶解后净化,除PCB 169回收率为49%外,其他所有PCDD/Fs和PCBs组分的回收率都大于80%,均满足标准HJ 77.3-2008和EPA1668C(2010)的质控要求;PCDD/Fs和PCBs的检出限分别为0.0050~0.044和0.016~0.12 ng/kg;将本方法应用于2,5-二氯酚工业品分析,PCDD/Fs毒性当量浓度为100和135 ng TEQ/g,PCBs毒性当量浓度为6.5和21 ng TEQ/g.

甘草提取物对2,3,7,8-四氯二苯并-p-二噁英致建鲤精密肝切片组织损伤中生化指标及免疫功能的影响

利用精密肝组织切片来评价甘草提取物对2,3,7,8-四氯二苯并-p-二噁英(TCDD)诱导建鲤精密肝切片损伤的保护作用,将制备的肝组织切片分为6个处理组,即Control组、TCDD模型组、甘草提取物对照组、甘草提取物前处理组、甘草提取物后处理组、甘草提取物前后处理组,其中甘草提取物前处理组、甘草提取物后处理组、甘草提取物前后处理组分别换用含0.2、0.4、0.8 mg·m L-1的甘草提取物L-15培养基与精密肝切片共培养,用于检测损伤肝切片培养液中丙氨酸转氨酶(GPT)、天冬氨酸转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、免疫球蛋白M(Ig M)的含量变化,结果表明:前处理组甘草提取物可以较好缓解TCDD对肝组织造成的损伤,降低了肝切片培养液中GOT、GPT活性以及MDA、TNF-α、IL-1β、Ig M含量,提高了培养液中SOD活性。这说明甘草提取物可以有效抑制TCDD造成的肝组织损伤,对肝组织具有明显的保护作用。

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英和β-萘黄酮暴露对斑马鱼肝和鳃MROD酶活性的影响

为了研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)和β-萘黄酮(β-NF)对斑马鱼(Danio rerio)肝脏和鳃CYP1A依赖性7-甲氧基-3-异酚噁唑酮-脱甲基酶(MROD)活性的影响,分别利用不同浓度的TCDD(0、0.05、0.1、0.2、0.4μg·L-1)和β-NF(0、25、50、100、200μg·L-1)对斑马鱼进行水浴暴露,48h后取样测定肝脏和腮MROD活性.结果表明,与对照组比较,TCDD暴露组和β-NF暴露组斑马鱼肝脏和鳃MROD活性均显著增强(p<0.01),且MROD活性的增加与TCDD或β-NF暴露浓度呈现明显的剂量-效应关系.初步推断斑马鱼肝脏和鳃CYP1A依赖性MROD酶活性可能能够作为TCDD或β-NF污染的生物标志物.

哺乳期暴露2,3,7,8-四氯二苯并-p-二噁英的子代小鼠生殖发育以及肺组织CYP1A1水平

目的探讨哺乳期暴露2,3,7,8-四氯二苯并-p-二噁英(TCDD)对子代小鼠生长发育及细胞色素P4501A1(CYP1A1)表达的影响。方法采用清洁级昆明小鼠,设40μg/kg和20μg/kgTCDD染毒组,并分设相应的两个溶剂对照组及一个动物空白对照组。每组母鼠3只,仔鼠25～28只。母鼠分娩后的第1、3、5天腹腔注射TCDD,子代小鼠通过乳汁暴露于TCDD。观察不同生长期仔鼠的体重改变和生殖系统发育等。仔鼠生后第35天被处死,采用免疫组化法分析肺组织CYP1A1的表达。结果TCDD染毒组的仔鼠体重明显降低,雌性仔鼠的阴道平均开放时间明显缩短,雄性仔鼠的睾丸平均下降时间明显延长。TCDD染毒组的肺泡结构紊乱,炎症细胞浸润,肺泡壁增厚水肿,CYP1A1表达量明显升高,并且雌性仔鼠的肺组织反应比雄性仔鼠严重。而对照组中雌雄间差异没有显著性。结论单一哺乳期暴露于TCDD可使子代小鼠体重下降,雌性仔鼠性成熟提前,雄性仔鼠性成熟延缓。仔鼠肺组织CYP1A1表达明显增加,并存在性别差异。

甘草提取物对2,3,7,8-四氯二苯并-p-二口恶英致建鲤肝损伤的影响

为了评价甘草提取物是否对2,3,7,8-四氯二苯并-p-二口恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)引起建鲤肝组织损伤具有保护作用,本实验用含甘草提取物的饲料(0.1、0.5和1.0g/kg)饲喂建鲤60d,再腹腔注射0.6μg/kg TCDD,72h后收集血液和肝组织,检测血清和肝组织匀浆中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、过氧化氢酶(hydrogen peroxidase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,TAOC)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)等生化指标,同时制备肝组织病理切片,观察甘草提取物对TCDD诱导建鲤肝组织损伤的影响。结果表明:1.0g/kg甘草提取物显著降低血清中ALT、AST、LDH和AKP活性,显著提高总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)质量浓度、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)质量摩尔浓度(P<0.05或P<0.01)。病理组织切片观察结果显示,甘草提取物处理组可以明显减轻TCDD引起肝组织损伤。提示,甘草提取物对TCDD引起的建鲤肝组织损伤具有较好的保护作用,而且甘草提取物的保护作用可能与其抗氧化性能有关。

2,3,7,8-四氯二苯-p-二噁英对雌性小鼠血浆维生素A、E的影响

目的 了解 2 ,3 ,7,8 四氯二苯 p 二英 (TCDD)对雌鼠血浆维生素A、E水平的影响。方法 将实验昆明种雌性小鼠 2 4只 ,随机分为染毒高 ( 10 0 μg/kg)、中 ( 10 μg/kg)、低 ( 1μg/kg)剂量和空白对照 4组 ,腹腔注射染毒。 48h后对实验小鼠取血 ,离心后取上层血浆 ,用无水乙醇沉淀蛋白 ,加环己烷萃取后 ,使用荧光分光光度仪在不同波长下测定其荧光值 ,计算出维生素A、E浓度 ,进行统计分析。结果 对照及染毒剂量低、中、高 4组中小鼠血浆维生素A的平均水平差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;血浆维生素E的平均水平差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,对照组与低剂量组之间维生素E的浓度水平差异无显著性 ,但与中、高剂量组之间维生素E的浓度水平差异都有显著性 (P <0 0 5 )。结论 在此实验条件下 ,尚不能够认为TCDD对雌鼠血浆维生素A的水平有影响 。

2,3,7,8-四氯二苯并-对-二噁英对鱼类生长的影响及投喂调控

二噁英(dioxin)可通过多种途径进入鱼、人和其他动物体,并在脂肪中积蓄,使机体畸形、突变和致癌等。其中2,3,7,8-四氯二苯并-对-二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)被称为"地球上毒性最强的物质"。文中主要综述TCDD对鱼类生长的影响及其机理,同时提出通过投喂无污染或抗污染毒害的饲料,积极地预防TCDD对鱼类生长的影响。旨在更好的研究TCDD对鱼类和其他水生生物的影响、机制与预防,控制TCDD对水环境的污染,保护鱼类和其他水生生物,生产健康、卫生和安全的渔业产品。

运动对急性暴露于2,3,7,8-四氯二苯并二恶英大鼠肝组织酶活性的影响

为了研究运动对2,3,7,8-四氯二苯并二恶英(2,3,7,8-TCDD)急性暴露大鼠肝组织酶活性的影响,将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC)、染毒组(NT)、运动对照组(EC)、运动染毒组(ET)。染毒组(NT组与ET组)腹腔注射10μg·kg-1(以单位体重计)的TCDD,对照组(NC组与EC组)腹腔注射等量的玉米油;NT、NC组静养4周,ET、EC组运动(尾部负重5%游泳30分钟)4周。4周后,称重并宰杀大鼠,分离肝组织,称重后-80℃保存待测7-乙氧基异吩恶唑酮脱乙基酶(EROD)、7-乙氧基香豆素-O-脱乙基酶(ECOD)及芳香烃羟化酶(AHH)的活性。将数据进行多因素方差分析(MAVONA)处理,结果表明,染毒可降低大鼠体重,增加肝湿重和肝相对重量、增加EROD、ECOD活性;运动可增加大鼠肝相对重量、增加AHH的活性;染毒后运动可降低EROD、ECOD的活性。结论:急性10μg·kg-1(以单位体重计)TCDD染毒后4周可增加大鼠肝相对重量;4周的运动能有效降低TCDD对EROD、ECOD活性的激活作用。

亚慢性染毒2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对大鼠血清维生素A、E的影响

目的了解亚慢性暴露于2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对Wistar大鼠血清维生素A、E水平的影响。方法将64只实验Wistar大鼠按雌、雄随机分为染毒高(250 ng/kg)、中(25 ng/kg)、低(2.5ng/kg)剂量和空白对照共4组,每组8只,经口染毒。90 d后对实验大鼠股动脉取血,离心后取上层血清,用无水乙醇沉淀蛋白,加环己烷萃取后,使用荧光分光光度仪在不同波长下测定其荧光值,计算出维生素A、E浓度,进行统计分析。结果与对照组比较,TCDD染毒大鼠血清维生素A和维生素E的平均水平降低,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论在实验条件下,TCDD亚慢性暴露可以对Wistar大鼠血清维生素A与维生素E的质量浓度水平有一定影响。

2,3,7,8-四氯二苯二噁英诱导腭裂发生的差异蛋白筛选

目的:以蛋白质组学方法筛选2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致先天性腭裂发生的差异表达蛋白。方法:以TCDD诱导建立胎鼠先天性腭裂模型,行腭部的大体解剖及组织学检查。取实验组和对照组胎鼠的腭组织,分别提取组织总蛋白。通过双向电泳和质谱分析,筛选出实验组和对照组腭组织的差异表达蛋白,并用免疫组化对鉴定出的相关蛋白质进行验证。结果:成功诱导胎鼠腭裂模型。筛选出10种差异表达的蛋白,其中7个蛋白点在试验组上调,3个蛋白点在实验组下调。过氧化物还原酶1(Peroxiredoxin 1,Prx 1)与鸟嘌呤核苷酸解离抑制剂(GDP-dissociation inhibitor,GDI)在实验组表达明显增强。结论:Prx 1、GDI表达的明显增强可能与TCDD所致胎鼠先天性腭裂有关。