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一种利用整合酶位点特异性重组构建随机突变库的方法
被引量:
1
1
作者
汪先薇
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期2440-2446,共7页
易错PCR利用的低保真聚合酶不具有3'到5'的校对功能,能够引入较高几率的随机突变,经常被用来构建突变库。位点特异性串联重组(SSRTA)方法拥有丰富的整合位点配对组合,可以为大片段基因簇重组提供多种模块组合。该串联重组方法...
易错PCR利用的低保真聚合酶不具有3'到5'的校对功能,能够引入较高几率的随机突变,经常被用来构建突变库。位点特异性串联重组(SSRTA)方法拥有丰富的整合位点配对组合,可以为大片段基因簇重组提供多种模块组合。该串联重组方法特异性高、灵活性强、重组发生效率高。在通过易错PCR构建突变库时,引入用整合酶的体外多片段串联重组拼装系统,能够突破PCR长度的限制,灵活的组装各个突变模块,从而获得大片段的基因簇突变库。本研究以番茄红素基因簇的突变为例,阐释了这两种方法结合的应用。
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关键词
易错PCR
多片段串联重组
整合酶
原文传递
题名
一种利用整合酶位点特异性重组构建随机突变库的方法
被引量:
1
1
作者
汪先薇
机构
复旦大学
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期2440-2446,共7页
基金
中国国家基础研究发展973计划(2012CB721102)
自然科学基金(31300034)共同资助
文摘
易错PCR利用的低保真聚合酶不具有3'到5'的校对功能,能够引入较高几率的随机突变,经常被用来构建突变库。位点特异性串联重组(SSRTA)方法拥有丰富的整合位点配对组合,可以为大片段基因簇重组提供多种模块组合。该串联重组方法特异性高、灵活性强、重组发生效率高。在通过易错PCR构建突变库时,引入用整合酶的体外多片段串联重组拼装系统,能够突破PCR长度的限制,灵活的组装各个突变模块,从而获得大片段的基因簇突变库。本研究以番茄红素基因簇的突变为例,阐释了这两种方法结合的应用。
关键词
易错PCR
多片段串联重组
整合酶
Keywords
Error-prone PCR, SSRTA, Intergrase
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种利用整合酶位点特异性重组构建随机突变库的方法
汪先薇
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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