多种抗肿瘤免疫效应细胞联合治疗中晚期结直肠癌的效果分析

目的分析中晚期结直肠癌患者采用多种抗肿瘤免疫效应细胞联合治疗的效果。方法选取本院2018年1月至2019年1月收治的中晚期结直肠癌患者60例作为研究对象,按照随机数字表法将其分为两组,各30例。对照组患者予以常规放化疗治疗,观察组患者予以多种抗肿瘤免疫效应细胞免疫治疗,对两组的免疫功能变化情况进行对比。结果治疗前,两组各项免疫细胞功能比较均无较大差异(P> 0.05);治疗后,观察组各项免疫细胞功能均优于对照组(P <0.05)。结论在予以中晚期结直肠癌患者结直肠癌根治术治疗的同时配合使用多种抗肿瘤免疫效应细胞联合治疗效果显著,值得临床应用。

WT1多肽乳佐剂疫苗的免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应研究

目的 评价Wilm瘤基因1(Wilms’ tumor gene1, WT1)多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗的稳定性、安全性、免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应。方法 用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱评价该佐剂疫苗中WT1多肽的稳定性;将C57BL/6雌性小鼠按照随机数字表法分成3组:PBS组、WT1组和WT1+AddaVax^(TM)组,使用免疫剂量为抗原50μg/只、佐剂50μg/只,按照第0、14、28天肌肉注射免疫程序进行免疫。用HE染色评价疫苗肌肉注射小鼠脏器组织毒性;用ELISA检测细胞因子水平;ELISpot检测脾细胞分泌IFN-γ细胞数量;流式细胞术检测疫苗促体外骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)成熟和促淋巴细胞活化及H-2Db WT1四聚体检测特异性CD8+T细胞比例;用C1498-mWT1稳转细胞株构建小鼠白血病肿瘤模型后,评价其预防与治疗的抗肿瘤效应。结果 WT1多肽可在疫苗中稳定存在,对小鼠肌肉注射未发生明显的脏器组织变化;对小鼠肌肉注射WT1+AddaVax^(TM)疫苗后,与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组可诱导高水平的Th1细胞免疫应答γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及其Th17免疫应答白介素17A(IL-17A)(P<0.05);与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞数量增加(P<0.01),促进BMDCs成熟的标志物CD40^(+)/CD11c^(+)、CD86^(+)CD80^(+)/CD11c^(+)细胞比例增加(P<0.05),促进淋巴细胞中CD4^(+)/CD3^(+)T、CD69^(+)/CD8^(+)T细胞比例增加(P<0.05)及其特异性CD8+T细胞比例增加(P<0.05);利用C1498-mWT1小鼠急性髓系白血病皮下荷瘤模型的抗肿瘤效应中,WT1+AddaVax^(TM)组中位生存期相比于WT1组小鼠延长了6 d。在第50天时,WT1多肽+AddaVax^(TM)组小鼠生存率为28.5%,其他组小鼠全部死亡(P<0.05)。结论 WT1多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗具有良好的免疫学和明显抗肿瘤效果。

癸酸能够活化CD8^(+)T细胞并提高其抗肿瘤免疫反应能力

目的:探究中链脂肪酸癸酸对CD8^(+)T细胞活化的影响,及其对CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的作用和机制。方法:建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10皮下荷瘤模型,随机分为癸酸组(10 mg/kg癸酸灌胃)和对照组(等量溶剂灌胃),观察癸酸对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响,采用流式细胞术检测肿瘤微环境中浸润CD8^(+)T细胞的活化水平。建立B16F10-OVA和OT-I T细胞共培养体系,采用流式细胞术检测癸酸对CD8^(+)T细胞的肿瘤细胞杀伤能力的影响。采用α-CD8抗体清除B16F10荷瘤小鼠体内CD8^(+)T细胞,观察对小鼠肿瘤体积的影响。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,采用WB、ELISA及qPCR、流式细胞术检测T细胞受体(TCR)活化、效应细胞因子产生以及增殖和代谢水平。在B16F10荷瘤小鼠模型中,观察α-PD-1抗体联合癸酸给药对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响。结果:在小鼠黑色素瘤荷瘤模型中,与对照组相比,癸酸组小鼠移植瘤体积显著降低且生存率显著提高(均P<0.05),肿瘤浸润CD8^(+)T细胞IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高(P<0.01)。经癸酸处理的OT-I T细胞对B16F10-OVA细胞的杀伤水平显著升高(P<0.01)。在荷瘤小鼠模型中用α-CD8抗体清除CD8^(+)T细胞后,癸酸对移植瘤的抑制作用显著降低(P<0.0001)。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,TCR活化水平显著升高、细胞因子IL-2和IFN-γ的产生增多、线粒体代谢水平显著上调(均P<0.05)。在黑色素瘤荷瘤小鼠模型中,癸酸与α-PD-1抗体联用,能够显著抑制小鼠移植瘤生长并提高其生存率(均P<0.05)。结论:癸酸能够促进CD8^(+)T细胞活化、增强其抗肿瘤免疫反应能力。

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3与抗肿瘤免疫

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)是一种免疫检查点分子,在T细胞、自然杀伤(NK)细胞和树突状细胞(DC)等多种免疫细胞上表达,并通过与多种配体结合而发挥免疫抑制作用。作为一种免疫负调节分子,TIM-3可以通过抑制CD8+T细胞的作用,增强调节性T(Treg)细胞的免疫效应,从而影响机体抗肿瘤免疫反应。阻断TIM-3信号通路、联合阻断TIM-3与PD-1,以及抑制TIM-3和半乳凝素9(Gal-9)之间的相互作用,均可增强免疫细胞的抗肿瘤作用。目前,TIM-3抗体和小分子抑制剂等药物分子正处在临床前研究阶段,显现出巨大应用价值。本文综述了TIM-3的结构、与配体和细胞的相互作用,深入探索了TIM-3在肿瘤进展中的作用及作为治疗靶点的潜力,发掘其在抗肿瘤免疫中的应用前景,为开发新的肿瘤治疗策略提供了理论基础和潜在靶点。

紫草素联合肿瘤细胞裂解物刺激DC疫苗的抗肿瘤效果

目的:探讨紫草素(SK)联合肿瘤细胞裂解物(TCL)刺激的DC疫苗的抗肿瘤效果。方法:体外制备SK和TCL刺激的正常小鼠源的DC疫苗,流式细胞术检测DC表面CD80、CD86的荧光强度。流式细胞术检测与SK+TCL刺激的DC共培养后的正常小鼠脾T细胞中T-bet和RORγt的表达,ELISA检测共培养上清液中IFN-γ、IL-12P70和TNF-α的含量。建立Lewis肺癌3LL细胞荷瘤小鼠模型,分为PBS(1 mL)+TCL(5×10^(5)个细胞/100μL)、SK-L(1.25 mg/kg)+TCL、SK-M(2.5 mg/kg)+TCL、SK-H(5 mg/kg)+TCL、紫杉醇(PTX 2 mg/kg)+TCL疫苗组。疫苗接种结束后10 d,检测移植瘤体积和小鼠生存率,LDH法检测脾CTL的杀伤能力。结果:SK+TCL刺激的DC疫苗表达出高水平CD80、CD86(均P<0.01);DC与T细胞共培养液上清中IL-12P70、IFN-γ、TNF-α含量均显著上升(均P<0.01),T细胞中T-bet和RORγt的表达显著性上调(均P<0.01)。成功构建Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,SK-H+TCL刺激的DC疫苗治疗显著延缓了的移植瘤生长并提高了小鼠的存活率,且可强烈诱导脾CTL的杀伤能力(均P<0.01)。结论:SK+TCL刺激的DC疫苗可激活DC至成熟状态,上调T细胞中T-bet和RORγt的表达,启动Th1效应细胞,SK体内治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠具有良好的抗肿瘤效果。

肿瘤微环境中免疫细胞自身调控及中药成分对其调控的研究进展

目的了解肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中免疫细胞的调节机制、免疫治疗的新靶点以及中药成分对免疫细胞的调节作用。方法查阅相关文献,总结TME中免疫细胞调控机制和发挥抗肿瘤免疫治疗的新靶点以及中药成分对免疫细胞的调节作用。结果总结了肿瘤微环境中T细胞、巨噬细胞、树突状细胞在分化、发育、功能上的调控机制,归纳了抗肿瘤免疫治疗的新靶点,基于这些调控机制分析不同种类的中药成分对免疫细胞的调控作用。结论梳理总结TME中免疫细胞的自身调控机制和中药成分对免疫细胞的调节作用,为中药抗肿瘤免疫机制的深入探索奠定基础。

中药多糖通过影响巨噬细胞发挥免疫调节及抗肿瘤作用研究进展

中药多糖通过增强机体免疫能力具有很强的抗癌活性,巨噬细胞是与中药多糖发挥抗肿瘤作用联系最为紧密的免疫细胞之一。大量文献表明,中药多糖能够通过增大巨噬细胞体积或恢复巨噬细胞正常形态,上调巨噬细胞的增殖能力,增强巨噬细胞的吞噬功能,促进细胞因子如一氧化氮(NO)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-12、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的释放,影响巨噬细胞内酶的活性等途径发挥免疫调节作用,其机制涉及多条信号通路,如Toll样受体(TLRs)、补体受体3(CR3)、脂多糖受体CD14、甘露糖受体(MR)、清道夫受体(SR)和树突状细胞相关C型凝集素-1(Dectin-1)受体等介导的信号通路,因此该文主要就中药多糖对巨噬细胞的免疫调节作用及其免疫调节机制展开论述,研究中药多糖通过巨噬细胞发挥抗肿瘤作用的机制,以期为研究中药多糖相关的新型临床抗肿瘤药物提供思路与启发。

卵巢癌细胞和脐血树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤免疫效应的初步研究

目的:将脐血来源的树突状细胞(DC)与人卵巢癌细胞株SKOV3细胞相融合,获得SKOV3/DC融合细胞,分析其生物学特性及体外诱导抗卵巢癌肿瘤免疫的能力。方法:1)将用pKH26红色荧光染料标记脐血来源的DC后,聚乙二醇法(PEG)融合DC与人卵巢癌细胞株SKOV3细胞,流式细胞仪分选融合细胞。2)应用细胞培养技术、流式细胞术及光学显微镜检测SKOV3/DC的生长特性和形态学特征;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察融合细胞体外刺激混合淋巴细胞反应的能力及诱导特异性肿瘤免疫的能力。结果:1)DC和SKOV3按10:1比例融合,融合率约为8.5%。融合细胞可在体外缓慢增殖,CA125抗原及CD1a、CD80、CD86、HLA-DR、MHC-I分子表达阳性。2) SKOV3/DC在体外能有效的激发混合淋巴细胞增殖反应,可明显激活细胞毒性T淋巴细胞(CTL),对卵巢癌细胞株SKOV3有特异性杀伤效应。结论:利用PEG法制备的SKOV3/DC融合细胞兼具两种亲本细胞的部分特性,在体外能够诱导特异性抗肿瘤免疫。本研究将SKOV3/DC作为肿瘤疫苗,为其在卵巢癌主动免疫治疗研究中的进一步应用打下了基础。

WT1多肽疫苗对荷人单核细胞白血病SCID小鼠的抗肿瘤免疫效应

目的 研究WT1多肽疫苗对荷人单核细胞白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠的抗肿瘤免疫效应。方法 对SCID小鼠腹腔注射人外周血淋巴细胞(PBL)后24h,皮下接种THP1细胞,建立SCID小鼠荷人单核细胞白血病模型,随机分组,每组8只。空白对照组的疫苗成分为不完全弗氏佐剂,辅助T细胞表位组的疫苗成分为辅助T细胞表位和不完全弗氏佐剂,WT1多肽组的疫苗成分为WT1多肽、辅助T细胞表位和不完全弗氏佐剂。当肿瘤体积约为100mm3时,开始腹腔注射疫苗成分,疫苗接种14d后处死SCID小鼠。采用乳酸脱氢酶法检测小鼠脾细胞特异性CTL杀伤活性,肿瘤组织HE染色后镜下观察组织学特点,利用流式细胞仪检测外周血CD3^+/CD4^+T细胞、CD3^+/CD8^+T细胞及CD4^+CD25^+T细胞水平,应用ELISA方法检测血清中免疫球蛋白、IL-2、IFN-γ、TGF-β及IL-10水平。结果 实验成功建立荷人单核细胞白血病SCID小鼠模型,各组中所有动物均成瘤;WT1组小鼠脾细胞对THP1细胞的CTL活性高于辅助T细胞表位组和空白对照组(P<0.05);WT1组小鼠的肿瘤平均体质量及体积均明显低于辅助T细胞表位组和空白对照组(P<0.05);WT1组肿瘤组织HE染色显示肿瘤细胞变性坏死,存活的肿瘤细胞减少;WT1组小鼠外周血CD3^+/CD4^+T细胞、CD3^+/CD8^+T细胞、IgG、IFN-γ和IL-2水平均明显高于辅助T细胞表位组和空白对照组(P<0.05);外周血CD4^+/CD25^+Treg细胞、TGF-β和IL-10水平均明显低于辅助T细胞表位组和空白对照组(P<0.05)。结论 WT1多肽疫苗可在荷人单核细胞白血病SCID小鼠体内产生抗肿瘤免疫效应,有效杀伤白血病细胞。

ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应脾细胞过继免疫抗肿瘤作用的研究

目的:探讨ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应脾细胞过继免疫在抗肿瘤中的作用。方法:通过转染建立稳定表达ehCGβ和HBV—preS2/S的细胞株Sp2/0-ehCGβ和Spz/0-preS2/S。以TR421-hCGβ质粒实施基因免疫,免疫后检测小鼠脾细胞,特异性细胞毒活性;同期将脾细胞过继免疫给正常小鼠,以过继TR421-hCGβ质粒免疫小鼠脾细胞为实验组、过继TR421质粒免疫小鼠脾细胞为对照组,检测脾细胞杀伤效应。结果:效应脾细胞对sp2/0-ehCGβ的杀伤率明显高于Sp2/0—preS2/S(P<0.05)。Sp2/0-ehCGβ在实验组小鼠仅2只形成实体瘤,TR421-hcGβ质粒基因免疫抗肿瘤任用有肿瘤特异性,两组有显著性差异(P<0.05),而在对照组小鼠均形成实体瘤。Sp2/0-preS2/S在所有的小鼠均形成了实体瘤,其瘤重无显著性差异。结论:ehCGβ肿瘤基因疫苗诱生的效应细胞可特异性杀伤肿瘤,过继免疫效应细胞能使正常小鼠获得明显的特异性抗肿瘤能力。

GSDMs家族蛋白介导细胞焦亡在抗肿瘤免疫中的作用

细胞焦亡是一种调节性细胞死亡方式。Gasdermine(GSDMs)是一类执行细胞焦亡的胞内蛋白质。虽然GSDMs表达后的完整蛋白质不具有活性,但能被某些蛋白水解酶激活。被激活的GSDMs N端在质膜上穿孔,导致细胞裂解,引起细胞内的促炎分子及损伤相关分子模式(danger-associated molecular patterns,DAMPs)迅速有效地从焦亡细胞中释放,从而引发炎症和免疫反应。焦亡细胞促进抗肿瘤免疫作用可能涉及细胞毒性T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤。本文介绍GSDMs介导的细胞焦亡及细胞焦亡过程中引发促炎症和免疫反应的关键分子,并且探讨细胞焦亡对肿瘤治疗的有利及不利因素,以期更好地了解细胞焦亡对肿瘤免疫微环境的影响及对肿瘤免疫治疗的作用,有助于促进恶性肿瘤治疗策略的改进。

重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统,使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明,重组人过氧化物还原酶-5(human peroxiredoxin-5,hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤,然而,其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态,从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示,与对照组相比,不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P<0.001);一氧化氮(nitric oxide,NO)检测试剂盒检测结果显示,hPRDX5显著增强RAW264.7细胞NO分泌水平(P<0.001);ELISA检测结果揭示,hPRDX5促进RAW264.7细胞TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.001)的分泌;流式细胞术结果揭示,hPRDX5能够升高RAW264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation,CD)80(P<0.01)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)(P<0.001)的表达,降低肿瘤条件培养基(tumor conditional culture solution,TCS)诱导的巨噬细胞CD206(P<0.001)的表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测揭示,hPRDX5可以提高巨噬细胞对小鼠胰腺癌Panc02细胞的杀伤活性。hPRDX5能够激活小鼠巨噬细胞RAW264.7,促进其M1型极化,并且逆转M2型极化,通过免疫增强作用发挥抗肿瘤活性。

NK细胞抗肿瘤机制及肿瘤免疫治疗的研究进展

NK细胞起源于造血干细胞,依赖骨髓或胸腺微环境分化、发育成熟,是参与固有免疫应答的主要效应细胞,在杀伤肿瘤细胞时无需预先致敏,不依赖抗体与补体结合且不受主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)限制性。NK细胞通过与活化受体和抑制受体的结合调控正向和负向信号平衡,活化的NK细胞分泌T-bet、EOMES(Eomesodermin)、IgG低亲和力FcγⅢ受体(CD16)、细胞因子、颗粒酶和穿孔素等介导肿瘤细胞凋亡,发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)和免疫调节作用。本文概述NK细胞抗肿瘤机制、方法和NK细胞免疫治疗的最新进展及趋势,旨为肿瘤患者的临床治疗提供思路和方法。

CpG-ODN通过调控细胞免疫显著增强热休克蛋白肿瘤疫苗诱导的抗肿瘤免疫效应

目的:尝试将新型免疫佐剂Cp G-ODN与热休克蛋白肿瘤疫苗联合对小鼠进行免疫接种,以期利用Cp G-ODN的免疫增强效应提高热休克蛋白疫苗的疗效。方法:制备B16黑色素瘤的C57BL/6小鼠模型,实验组预先用热处理后富含热休克蛋白70(HSP70)的B16细胞瘤苗联合免疫佐剂Cp G-ODN注射到小鼠皮下行免疫接种,与对照组对比观察小鼠肿瘤的生长情况,检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群的分布、脾淋巴细胞分泌Th1型细胞因子的活性以及CTL特异性细胞毒杀伤效率,以评价免疫应答反应的强弱。结果:接受联合免疫治疗的小鼠能产生较强的抗黑色素瘤免疫应答,35%的小鼠肿瘤未长出,已出瘤小鼠与对照组相比生存期明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。联合免疫组小鼠外周血CD4+/CD8+的值升高,脾淋巴细胞Th1型细胞因子分泌活性以及CTL特异性细胞毒杀伤效率均显著增强(P<0.01),但调节性T细胞亚群比例各组间无明显差异(P>0.05)。结论:免疫活性物质Cp G-ODN可显著增强热休克蛋白肿瘤疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答,激发特异性抗肿瘤细胞毒作用,抑制黑色素瘤的生长。

姚雨石研究员团队发现流行性感冒病毒训练肺泡巨噬细胞发挥肺部抗肿瘤免疫作用

2023年2月20日,浙江大学医学院免疫学系姚雨石研究员团队在《自然·免疫学》(Nature Immunology)在线发表了题为“Influenza-trained mucosal-resident alveolar macrophages confer long-term antitumor immunity in the lungs”(DOI:10.1038/s41590-023-01428-x)的研究论文,揭示流行性感冒病毒(IAV)感染诱导的黏膜组织定居型记忆性肺泡巨噬细胞能在感染后较长时间内发挥抗肺部转移肿瘤的训练免疫保护作用。研究人员在IAV感染和肺部肿瘤转移小鼠模型上发现,IAV感染后肺泡巨噬细胞在小鼠肺部发挥持久的抗肿瘤作用。感染后的肺泡巨噬细胞在转录组、染色质开放性、细胞能量代谢以及免疫功能等方面发生持久改变,形成训练免疫/天然免疫记忆,并且记忆肺泡巨噬细胞的产生和维持不依赖于外周单核细胞。

肿瘤抗原活化T细胞体外模型的建立及其免疫效应研究

目的建立体外肿瘤抗原活化T细胞模型,研究活化后T细胞的功能特点与分化方向。方法将肝癌BEL-7402细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)和协同刺激分子抗CD3、CD28单抗共培养(初次刺激组),或与经肝癌细胞刺激的PBMC共培养(再次刺激组),共培养时间分别为24、48、72h。另设靶细胞对照组和PBMC对照组。各组实验均设6孔。以流式细胞仪分析PBMC经肝癌细胞刺激后CD45RO+T细胞比例变化;MTT法检测活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率;双抗体夹心ELISA法检测活化T细胞IFN-γ和IL-4分泌水平;流式细胞仪分析T细胞表面Fas配体表达和T细胞受体(TCR)Vβ亚家族表达水平,并比较初次刺激组与再次刺激组T细胞免疫效应的差异。结果健康人PBMC在肿瘤抗原和协同刺激分子作用下,CD45RO+T细胞比例逐渐上升,共培养72h时为(16.1±0.9)%,明显高于PBMC对照组[(2.4±0.3)%,P<0.05]。活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率随共培养时间的延长而增大[24h为(28.4±6.7)%、48h为(60.4±6.2)%、72h为(78.0±9.3)%];IFN-γ分泌水平升高,共培养48h时为(932±117)ng/L,明显高于PBMC对照组[(157±30)ng/L,P<0.05];T细胞表面FasL表达增加至(8.1±1.8)%,明显高于PBMC对照组[(0.5±0.2)%,P<0.01];肿瘤抗原刺激后,TCRVβ的表达水平与PBMC对照组相比有所增加。再次刺激组CD45RO+T细胞比例、对肝癌细胞的杀伤率、IFN-γ分泌水平及FasL表达水平均明显高于初次刺激组。结论成功建立了体外肿瘤抗原活化T细胞模型。活化T细胞具有明显的免疫效应,并向Th1和Tc1方向分化;再次接触相同抗原时,其免疫效应更为迅速、强烈,表现出一定的记忆特性。

T肽对肾癌细胞抗肿瘤效应和免疫微环境的影响

目的:探讨T肽对肾癌细胞抗肿瘤效应和免疫微环境的影响。方法:将人肾癌细胞培养皿分成A组、B组,A组培养皿加入100μL生理盐水,B组培养皿加入T肽50μg/100μL,对比两组培养皿肾癌细胞的凋亡情况,同时测定趋化因子CCL5、CCL20和CCL22等的表达情况。结果:B组干预后癌细胞凋亡率显著高于A组(P<0.05);B组CC趋化因子水平均显著低于A组(P<0.05)。结论:T肽可以有效抑制肾癌细胞分化繁殖,同时能够对肾癌细胞免疫微环境产生显著影响。

β-榄香烯抗胶质母细胞瘤作用机制的研究进展

胶质母细胞瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,具有复发率高、生存时间短、病死率高等特点。β-榄香烯是一种广谱抗肿瘤药物,通过抑制细胞增殖、阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡等多途径发挥抗肿瘤作用。本文通过回顾现有的基础研究及相关成果,对榄香烯在抑制胶质母细胞瘤的作用机制进行总结概括,以期为其临床应用及深入研究提供参考。

红景天乙醇提取物调节Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤浸润T细胞数量并增强抗肿瘤免疫效应

目的探讨藏药红景天(RRL)的抗肿瘤免疫功能。方法将Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为生理盐水组、 500 mg/kg RRL乙醇提取物处理组和10 mg/kg环磷酰胺(CTX)处理组,处理10 d。计算小鼠生存率和肿瘤生长抑制率;流式细胞术检测肿瘤浸润的CD4^+T、 CD8^+ T细胞数量及FOXP3^+调节性T细胞(Treg)占CD4^+CD25^+Treg的比例; ELISA检测荷瘤小鼠血清中白细胞介素2 (IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果 RRL乙醇提取物处理的Lewis荷瘤小鼠生存率显著提高,肿瘤生长受到抑制,肿瘤浸润的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞数量增加, FOXP3^+ Treg占CD4^+CD25^+Treg的比例降低。荷瘤小鼠血清IFN-γ和IL-2水平提高,脾脏CTL的杀伤能力增强。结论 RRL乙醇提取物通过调节免疫细胞数量和功能增强抗肿瘤免疫效果。

低HMGB1含量的肿瘤细胞裂解物增强树突状细胞的抗肺癌作用

目的探讨低含量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的肿瘤细胞裂解物(TCL)对树突状细胞抗肺癌作用的影响。方法反复冻融的方法制备Lewis肺癌细胞TCL。Western blot检测TCL中HMGB1蛋白的表达情况。用30 nmol/L甘草酸(GA)抑制Lewis肺癌细胞中HMGB1的表达,进而制备低含量HMGB1的TCL(LH-TCL)。用未处理的Lewis肺癌细胞制备正常含量HMGB1的TCL(NH-TCL)。分为不同剂量NH-TCL负载DC组、LH-TCL负载DC组及PBS对照组,用流式细胞术检测体外诱导的小鼠树突状细胞(DC)表面CD11b、CD11c、CD86表达或细胞凋亡,用酶联免疫吸附试验检测DC细胞IL-12分泌情况。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,用流式细胞术检测小鼠脾细胞表面CD69的表达情况,酶联免疫吸附试验检测小鼠脾细胞TNF-β的分泌。分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,并设5∶1、10∶1、20∶1三个效靶比进行体外杀伤实验,采用CCK8法检测小鼠脾细胞杀伤肿瘤细胞的活性。分为未活化DC组、NH-TCL活化的DC组、LH-TCL活化的DC组及PBS对照组,通过体内抑瘤实验,评估DC过继免疫细胞疗法抑制小鼠皮下移植瘤生长的效果。结果GA作用后的Lewis肺癌细胞制备的TCL中,HMGB1的含量显著降低(P<0.05)。与NH-TCL相比,LH-TCL具有更好的减少DC凋亡的能力(P<0.001),并促进DC表面CD86的表达和IL-12的分泌,而负载LH-TCL的DC也能更好地激活脾淋巴细胞并诱导更强的抗肿瘤免疫作用(P<0.01)。在体外,负载LH-TCL的DC激活脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著提高(P<0.01);在实验动物体内,免疫负载LH-TCL的DC可明显抑制肿瘤组织生长(P<0.05)。结论用LH-TCL负载DC,可以增强DC诱导的抗肿瘤免疫作用,提高DC过继免疫细胞治疗的疗效,为该免疫治疗方法的改进提供了一个新的途径。