饲料中多种脂溶性维生素同步检测方法的应用

维生素是动物日粮中营养成分占比较少,饲料所需的化学结构不同、营养功能也有所差别的一类小分子有机化合物。其中,脂溶性维生素易溶于脂肪及有机溶剂,在饲料中常与脂类共存,摄取不足会导致机体代谢紊乱,摄取过多则在肝脏中贮存引起中毒。因此,对饲料中的脂溶性维生素含量进行测定,以确保动物摄入适量且均衡十分必要。目前,我国对脂溶性维生素都制定了相应的检测标准,但缺乏同步测定的方法。因此,本文就近年来对多种脂溶性维生素的同步检测方法进行综述,以期为其在饲料中的应用与推广提供参考。

自动化磁珠法提取血清脂溶性维生素应用LC-MS/MS检测的性能评价

目的评估自动化磁珠法提取血清脂溶性维生素应用液相色谱串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测的性能。方法收集200例临床剩余血清样本,采用自动化磁珠法提取血清中脂溶性维生素A,D_(2),D_(3),E和K;同时联合LC-MS/MS检测脂溶性维生素A,D_(2),D_(3),E和K的线性、定量限、精密度、正确度、携带污染率等性能指标以及基质效应。并比较此方法与传统萃取法检测结果的一致性。结果自动化磁珠法提取脂溶性维生素A,D_(2),D_(3),E和K线性相关系数均>0.99;五种物质的定量限分别为5,0.25,0.25,125和0.025ng/ml;批内精密度和批间精密度分别为0.66%~4.83%,0.15%~3.70%;平均加标回收率为87.05%~111.11%;基质效应为95.43%~99.07%;高-低值样本循环进样结果均值与低-低值样本循环进样结果均值之差,均小于低-低值样本循环进样结果均值的3s;统计学结果显示自动化磁珠法和传统萃取法提取的脂溶性维生素结果相关性良好(r>0.99),两种方法的检测结果无显著偏倚。结论自动化磁珠法提取脂溶性维生素的检测性能良好,有望提高样品通量和分析效率。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定复杂基质保健食品中7种脂溶性维生素营养补充剂的含量

取约1 g混匀后的保健食品样品,加入约50℃温水5 mL和磷酸盐缓冲液(pH 7.0)5 mL,混匀后加入0.3 g脂肪酶、0.5 g木瓜蛋白酶,加盖涡旋2~3 min,于37℃振荡120 min。加入10 mL无水乙醇和1 g碳酸钾,混匀后加入10 mL正己烷和10 mL水,涡旋或振荡提取10 min,离心5 min。收集上层相,在下层相中加入10 mL正己烷,重复上述提取和离心操作一次。合并上层相,于40℃旋蒸至近干,残液用氮气吹干,用甲醇溶解残渣并稀释至5 mL,过0.22μm滤膜,滤液进入超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪。7种脂溶性维生素营养补充剂在HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)上用不同体积比的含0.1%(体积分数,下同)甲酸的甲醇溶液和0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱分离,用电喷雾离子源正离子(ESI^(+))模式电离,用多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配法定量。结果显示:维生素A乙酸酯、维生素A棕榈酸酯、DL-α-维生素E乙酸酯的质量浓度均在50~1000μg·L^(-1)内,维生素D2、维生素D3、维生素K1和维生素K2的质量浓度均在10~200μg·L^(-1)内与各自对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为2.06~7.56μg·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为83.4%~106%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.9%~4.9%;方法用于实际样品的分析,各脂溶性维生素营养补充剂的检出量和标签值基本一致。

健康成人血清脂溶性维生素水平的性别和年龄变化规律

目的探讨健康成人血清脂溶性维生素A、25-羟维生素D[25(OH)D]、维生素E和维生素K水平的性别和年龄变化规律。方法回顾性分析2020年7月至2023年2月于南京医科大学附属妇产医院进行体检的2030例健康成人血清维生素A、25(OH)D、维生素E和维生素K水平,按照年龄划分为≤29岁组842例(男性409例,女性433例)、30~39岁组868例(男性419例,女性449例)和40~60岁组320例(男性120例,女性200例),各组再按照性别分为男性组及女性组。采用Mann-Whitney U检验比较同一年龄组不同性别健康成人的血清各脂溶性维生素水平;采用Kruskal-Wallis H检验比较同一性别不同年龄组健康成年血清各脂溶性维生素水平;采用Spearman法分析血清各脂溶性维生素的水平与年龄的相关性。结果成年女性血清维生素A、25(OH)D和维生素K的水平均低于同年龄组男性,差异均有统计学意义(P<0.05),而同一年龄组女性和男性血清维生素E水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);成年男性及女性血清中维生素A、25(OH)D、维生素E和维生素K的水平均随着年龄增长而升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman法分析结果显示,血清维生素A、25(OH)D、维生素E和维生素K水平与年龄均呈显著正相关(P<0.05)。结论健康成人血清中脂溶性维生素水平具有显著的年龄和性别差异,在评估其营养状态时需结合年龄和性别因素进行综合分析。

老年冠心病人群脂溶性维生素水平分布及与病情程度的相关性

目的:探讨老年冠心病人群脂溶性维生素水平分布及与病情程度的相关性。方法:选取2022年1月—2024年2月在我院治疗的老年冠心病患者82例作为观察组,同时选取同期因胸部不适行CAG检查排除冠心病的患者30例作为对照组,观察两组血清维生素D、E、A、K1水平,同时比较观察组不同病变程度、疾病类型患者间差异。结果:观察组维生素D为(22.41±6.40)nmol/L,明显低于对照组(P<0.05),而维生素E、维生素K1和维生素A分别为(14.25±2.22)μg/mL、(1.44±0.35)ng/mL、(72.25±13.35)ng/mL,明显高于对照组(P<0.05)。观察组重度病变患者维生素D为(15.84±6.11)nmol/L,明显低于轻度和中度病变患者(P<0.05),而维生素E、维生素K1和维生素A分别为(17.47±2.00)μg/mL、(1.80±0.24)ng/m L、(79.80±11.87)ng/mL,明显高于轻度和中度病变患者(P<0.05)。观察组急性心肌梗死患者维生素D为(20.07±5.06)nmol/L,明显低于不稳定性心绞痛患者(P<0.05),而维生素E、维生素K1、维生素A分别为(17.47±2.00)μg/mL、(1.80±0.24)ng/mL、(79.80±11.87)ng/mL,明显高于不稳定性心绞痛患者(P<0.05)。维生素D与病情严重程度呈负相关(r=-0.362,P<0.05),维生素E、维生素K1、维生素A与病情严重程度呈正相关(r=0.800、0.786、0.236,P<0.05)。结论:老年冠心病人群维生素D水平降低,而维生素E、K1、A水平升高,其中维生素D与病情严重程度存在负相关,而维生素E、K1、A病情严重程度存在正相关关系。

正常饮食对脂溶性维生素检测结果的影响

目的探讨正常饮食对脂溶性维生素检测结果的影响。方法招募健康志愿者30例,分别采集其空腹和进餐后2 h的静脉血,检测脂溶性维生素[维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)、维生素K_(1)、维生素K_(2)][甲萘醌-4(MK-4)]、维生素K_(2)[甲萘醌-7(MK-7)]水平。采用自身对照方法,比较空腹和进餐后2 h各脂溶性维生素水平。结果与空腹水平比较,餐后2 h维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)水平差异无统计学意义(P>0.05);维生素K_(1)、维生素K2(MK-7)和维生素K_(2)(MK-4)水平升高(P<0.05)。结论正常饮食对维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)检测结果无影响,但可使维生素K_(1)、维生素K_(2)(MK-4)、维生素K_(2)(MK-7)检测结果升高。

超声改性甲壳素吸附水产品加工副产物中脂溶性维生素的作用效果研究

目的探讨超声改性甲壳素(ultrasonic modified chitin,UM-C-chitin)对水产品加工副产物中脂溶性维生素的吸附效果。方法商品甲壳素(commercial chitin,C-chitin)经超声法改性,采用扫描电镜观察甲壳素改性前后微观形貌,傅里叶变换红外光谱和X射线衍射分析甲壳素改性前后的官能团和衍射峰变化,检测UM-C-chitin对水产品加工副产物中脂溶性维生素(维生素A、维生素D和维生素E)静态吸附效果。结果C-chitin经超声处理后微观结构由致密向疏松转变,并伴有无规则孔道及小孔形成,UM-C-chitin的酰胺I基团含有与α-型甲壳素相关的1665cm^(-1)特征峰,但是1624cm^(-1)处特征峰强度减弱接近消失,X射线衍射分析中UM-C-chitin在9.18°、12.68°、19.12°、23.04°和26.16°处有α-型甲壳素特征衍射峰,但各衍射峰强度较C-chitin的出现不同程度降低。与C-chitin相比较,UM-C-chitin对水产品加工副产物中维生素E的吸附效果较好(P<0.05),吸附量达到6.10μg/mg,较C-chitin的提高了84.8%。结论超声改性会降低C-chitin的结晶度,形成的无规则孔道及小孔结构有助于提高维生素E的负载量。本研究为快速富集水产品加工副产物中脂溶性维生素,特别是维生素E提供了技术依据。

复合预混合饲料和维生素预混合饲料中的脂溶性维生素和水溶性维生素的含量测定方法

用反相HPLC建立一种快速测定脂溶性维生素(VA棕榈酸酯、VD3和VE醋酸酯)和一种快速测定水溶性维生素(维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺)的方法,本方法具有快速、简便、高效、分离度及回收率高等特点,极大地提高了多种维生素样品中脂溶性维生素和水溶性维生素的含量测定。同时测定出羟苯甲酯和羟苯丙酯的含量,为多种维生素产品的稳定性提供了依据。

脂溶性维生素联合阿奇霉素对支原体肺炎患儿促炎因子及抗炎因子的影响评价

探讨分析脂溶性维生素联合阿奇霉素,在支原体肺炎患儿中的影响效果。方法 纳入时间:2022年5月~2023年5月;纳入对象:我院进行诊治的支原体肺炎患儿68例,分为两组各34例,对照组--阿奇霉素序贯治疗方案,观察组--阿奇霉素序贯治疗+脂溶性维生素治疗方案。结果 观察组患儿治疗后的各项症状改善时间均更低;观察组患儿治疗效果更高;观察组各项血清炎症因子水平均更低。结论 对于支原体肺炎患儿,采用脂溶性维生素联合阿奇霉素治疗的效果明显,值得推广应用。

阿奇霉素联合脂溶性维生素治疗小儿支原体肺炎的疗效观察

观察阿奇霉素联合脂溶性维生素治疗小儿支原体肺炎的疗效。方法 我院收治的支原体肺炎患儿选出其中68例分组,对照组阿奇霉素,观察组阿奇霉素+脂溶性维生素,评价疗效。结果 与对照组疗效、症状及CRP等比较,观察组改善更佳(P<0.05);不良反应率比较(P>0.05)。结论 在阿奇霉素基础上,同时用药脂溶性维生素的方式,在联合给药方案作用下,支原体肺炎患儿的疗效显著提高,各种临床症状时间明显缩短,对患儿的CRP指标可以实现积极的影响。通过比较不良反应,结果证明了联合用药具有较高的安全性,并不会增加不良反应,可将联合用药方案用于临床推广,作为首选治疗方案。

脂溶性维生素联合阿奇霉素对支原体肺炎患儿促炎因子及抗炎因子的影响评价

分析对支原体肺炎患儿提供脂溶性维生素联合阿奇霉素干预的临床意义。方法 研究收录样本时间制定为2020年1月到2023年12月,研究样本制定为支原体肺炎患儿,共计80例,电脑抽号法分2组,研究组:脂溶性维生素联合阿奇霉素,常规组:阿奇霉素;各40例,对比两组不同。结果 研究组患者的临床指征纠正效果、生活质量、治疗效果、不良反应发生率控制效果等均高于常规组(p均<0.05)。结论 对于支原体肺炎患儿而言,为患儿提供脂溶性维生素联合阿奇霉素治疗,这种方式的效果更佳,且可以有效纠正患者的临床指征,改善患者的生活质量,控制不良反应发生率。

在线固相萃取/二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中多种脂溶性维生素

利用在线固相萃取技术结合二维液相色谱仪,建立婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E、K 1同时测定的方法。将奶粉样品皂化后,利用PLRP-S聚合物为填料的在线固相萃取柱净化强碱性皂化液,以五氟苯基柱为一维色谱柱,在紫外检测器上分离维生素A、E,以多环芳烃柱为二维色谱柱,在二极管阵列检测器上分离维生素D 2、D 3和K 1,建立在线固相萃取/二维液相色谱分析方法。对该方法进行方法验证,并与现行食品安全国家标准进行结果对比。维生素A、D、E、K 1在标准曲线浓度范围内线性良好,维生素A、维生素D 2、维生素D 3、α-维生素E、β-维生素E、δ-维生素E、γ-维生素E和维生素K 1检出限分别为4.0、1.0、1.0、40.0、40.0、40.0、40.0、4.0μg/100g,定量限分别为10、2.5、2.5、100.0、100.0、100.0、100.0、10.0μg/100g,加标回收率为91.23%~107.2%,相对标准偏差为0.67%~8.06%。该方法操作简单,重复性好,准确度高,能够满足婴幼儿配方奶粉中多种脂溶性维生素的同时检测。

HPLC法测定复合维生素注射液(13种)中4种脂溶性维生素的含量

目的:建立HPLC法同时测定复合维生素注射液(13种)中4种脂溶性维生素的方法。方法:采用固相萃取法,分离4种脂溶性维生素,色谱柱Inertsil ODS2 C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-二氯甲烷(80:10:10),检测波长:265nm,流速:1.0ml·min^(-1),柱温:30℃。结果:维生素D_3、维生素E、维生素K_1及维生素A的线性范围分别为:0.82～1.2μg·ml^(-1)(0.999 6),1.65～2.48 mg·ml^(-1)(0.999 8),240～360μg·ml^(-1)(r=0.9997)及0.16～0.24 mg·ml^(-1)(r= 0.9995),平均回收率为100.7%(RSD 1.2%),101.5%(RSD 1.9%),100.7%(RSD 1.1%)及99.3%(RSD 0.9%)(n=9)。结论:方法简单、快速、重复性好,可用于该该剂的质量控制。

熊去氧胆酸联合脂溶性维生素注射液治疗酒精性肝病伴肝内胆汁淤积患者疗效观察

目的探讨熊去氧胆酸(UDCA)联合脂溶性维生素注射液治疗酒精性肝病(ALD)伴肝内胆汁淤积患者的疗效。方法2015年1月~2016年1月我院收治的75例ALD伴肝内胆汁淤积患者被随机分为试验组43例,给予UDCA联合脂溶性维生素注射液治疗,对照组32例只接受UDCA治疗,均治疗4 w。结果在治疗4 w结束时,试验组和对照组AST为[(46.2±17.2)U/L和(96.4±37.3)U/L,P<0.05],GGT为[(78.9±19.1)U/L和(123±54.5)U/L,P<0.05],TBIL为[(44.8±20.7)μmol/L和(85.3±29.6)μmol/L,P<0.05],ALP为[(79.6±22.3)U/L和(101±29.7)U/L,P<0.05],APTT为[(46.4±14.2)s和(58.8±14.9)s,P<0.05],TBA为[(47.7±19.3)μmol/L和(111.2±36.3)μmol/L,P<0.05]。结论 UDCA联合脂溶性维生素治疗ALD伴肝内胆汁淤积患者近期疗效确切。

脂溶性维生素注射液联合丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗酒精性肝病伴胆汁淤积患者的效果及对血清sVCAM-1、PLTP水平的影响

目的探究脂溶性维生素注射液联合丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗酒精性肝病伴肝并胆汁淤积的临床疗效及对患者血清可溶性黏附分子(s VCAM-1)、磷脂转运蛋白(PLTP)水平的影响。方法回顾性选取2016年1月至2017年8月收治的140例酒精性肝病伴胆汁淤积患者,依照治疗方法的不同分成对照组和观察组,每组70例。对照组给予丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗,观察组在对照组基础上给予脂溶性维生素注射液联合治疗。对比两组患者的临床疗效、治疗前后血生化指标、结合胆汁酸(CBA)、血清肝胆酸(CG)、s VCAM-1及PLTP差异及症状改善情况。结果观察组的临床总有效率为92. 9%,显著高于对照组的81. 4%,差异具有统计学意义(P <0. 05)。治疗后,两组患者天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、血清胆红素(SB)、透明质酸酶(HA)及Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)均显著降低,而白蛋白(Alb)显著升高,且观察组各指标相比于对照组变化更显著(P <0. 05)。治疗后,两组患者CBA、CG、s VCAM-1及PLTP水平均显著降低,且观察组更低于对照组,差异具有统计学意义(P <0. 05)。治疗后,两组多数患者症状消失或减弱,且观察组患者更优于对照组(P <0. 05)。结论脂溶性维生素注射液联合丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗酒精性肝病伴胆汁淤积可明显的改善患者肝功能及胆汁酸的代谢,这可能与联合治疗对血清s VCAM-1、PLTP水平的降低作用有关。

我院脂溶性维生素注射液临床使用合理性评价

目的了解我院脂溶性维生素注射液(Ⅱ)的使用情况,评价临床使用的合理性,为临床合理用药提供参考。方法随机抽取2016年6,8,11月使用脂溶性维生素注射液(Ⅱ)的出院病历302份,对住院科室、临床诊断、用药适应证、给药剂量、溶媒选择、疗程等进行调查分析、总结。结果该药临床使用合理率从6月份的56.2%升至11月份的80.6%,不合理用药现象得到改善。结论我院脂溶性维生素注射液(Ⅱ)使用情况存在不合理现象,应加强临床用药监控,有效发挥药师的作用,促进临床合理用药。

HPLC法测定脂溶性维生素注射液(Ⅱ)中溶血磷脂酰胆碱的含量

目的建立测定脂溶性维生素注射液(Ⅱ)中溶血磷脂酰胆碱的方法。方法采用HPLC法,检测器为蒸发光散射检测器;色谱柱:以二羟基丙基硅烷键合硅胶为填充剂;以正庚烷-异丙醇(60:40)为流动相A,以正庚烷-异丙醇-水(60:30:10)为流动相B,以梯度洗脱,柱温35℃;流速:1.5ml/min;进行测定。结果溶血磷脂酰胆碱在浓度0.01986～0.09930mg/mL范围内线性关系良好,平均回收率(n=9)99.44%,RSD为1.46%。结论该方法专属性强、精密度好、测定结果准确度高。

脂溶性维生素注射液细菌内毒素的检查方法

脂溶性维生素注射液的细菌内毒素检查法,收载于卫生部药品标准中(1996年),其限值为L≤1Eu·ml^(-1)。然而,试验中发现,该产品对一些厂生产的鲎试剂有很强的干扰作用,无法测定其细菌内毒素。通过试验,确定了二个厂生产的鲎试剂对其作细菌内毒素检查。

脂溶性维生素Ⅱ冻干粉与低分子右旋糖酐注射液存在配伍禁忌

药物不合理配伍现象在临床偶有发生,而无法在《静脉药物配伍禁忌表》中查获。笔者临床工作中发现脂溶性维生素Ⅱ冻干粉（生产企业：西安德天药业有限公司,规格：1940μg）与低分子右旋糖酐注射液（生产企业：江苏正大丰海制药有限公司,规格：500 ml）之间存在配伍禁忌。为保证患者用药安全,避免发生不必要的医疗纠纷,对上述两种药物配伍进行了实验观察,现报告如下。

孕早中期血清脂溶性维生素水平与妊娠期高血压疾病的关系

目的探讨孕妇孕早中期血清脂溶性维生素水平及其对子痫前期发生的预测价值。方法选取2021年1月至2022年5月宁波市妇女儿童医院规律产检的155例18周岁以上患有妊娠期高血压疾病的单胎孕妇作为疾病组,根据诊断标准分为妊娠期高血压组80例,子痫前期组38例,重度子痫前期组37例。另选取同期的正常妊娠孕妇220例作为对照组。采用高效液相串联质谱法测定所有孕妇在孕早中期血清维生素A、D、E水平,比较不同组孕妇外周血脂溶性维生素水平,采用ROC曲线评价脂溶性维生素水平对子痫前期的预测效能。结果疾病组孕妇血清维生素A、D、E水平均低于对照组(均P<0.05)。子痫前期组和重度子痫前期组孕妇血清维生素A、D、E的水平均略低于妊娠期高血压组孕妇,差异均无统计学意义(均P>0.05)。ROC曲线分析孕早中期血清维生素A、D、E水平用于预测子痫前期发生的AUC分别为0.597、0.782、0.775,灵敏度分别为0.35、0.46、0.60,特异度分别为0.87、0.99、0.85。脂溶性维生素联合使用预测子痫前期的AUC为0.853(95%CI:0.810~0.890),灵敏度为0.85,特异度为0.75。结论患有妊娠期高血压疾病的孕妇在孕早中期血清中脂溶性维生素水平降低,血清维生素D和维生素E水平检测用于预测子痫前期发生的价值大于维生素A;孕妇在孕早中期外周血中脂溶性维生素的水平与妊娠期高血压疾病的严重程度之间的相关性尚不清楚。