105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂对烟草青枯病的防治效果

烟草青枯病是一种毁灭性的细菌性土传病害,其病原菌是青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum),生物防治是行之有效的烟草青枯病绿色防控技术措施。本研究选用新农药105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂,开展了其对烟草青枯病的室内抑菌试验和田间药效试验。结果表明,105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂防治烟草青枯病效果显著,能减轻该病害的发生程度,药剂用量为900 g/hm^(2)时田间防效可达76.08%;同时,施用105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂还能改善烟草的株高、茎围、叶片数、最大叶面积、产量、上等烟比例和中上等烟比例等农艺性状和经济性状。105亿CFU/g多粘菌·枯草菌可湿性粉剂推荐用量为600~900 g/hm^(2)。

禾谷多粘菌传麦类病毒研究进展

综述了近10年来浙江省农业科学院在禾谷多粘菌生态学、传播病毒特性、超微结构特征、体内病毒粒子观察、所传播的麦类病毒种类、基因组序列测定、血清学关系、病毒自发缺失突变及其机理、病害发生规律以及抗源筛选等方面的研究进展。

甜菜多粘菌拮抗放线菌的筛选及其防治丛根病效果的检测

在甜菜丛根病重病田选取轻病株 ,分离其根面和根内放线菌 ,2 6个分离物有 3株可以拮抗甜菜多糖菌Polymyxabetae。该 3株放线菌经鉴定是链霉菌属 (Streptomyces)的 3个种。拮抗菌的代谢液能够抑制P .betae休眠孢子萌发 ,使游动孢子泳动减缓。甜菜坏死黄脉病毒 (BNYVV)酶联免疫检测 (ELISA)表明 ,拮抗菌处理的根系内BNYVV数量低于对照 ;PCR检测表明 ,对照可扩增出P .betae特异性片段 ,而拮抗菌处理未能扩增出相应片段。本研究表明 3株拮抗菌对P .betae有明显的抑制作用 。

甜菜多粘菌基因组片段的克隆及PCR检测

根据资料报导设计引物，扩增Ｐｏｌｙｍｙｘａ ｂｅｔａｅ的基因组片段，将其克隆在ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）质粒载体上，并通过双酶切、ＰＣＲ扩增和部分序列测定，证明克隆片段为Ｐ．ｂｅｔａｅ基因组片段。用扩增Ｐ．ｂｅｔａｅ基因组片段的引物对由Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ侵染小麦和Ｏ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ侵染豇豆根系抽提的总ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，均未获得任何ＤＮＡ产物，进一步证实了上述结果。对移入病土２、３．５天的甜菜苗单株根系进行ＤＮＡ粗提，移入病土３．５天的甜菜苗ＰＣＲ检测其已被Ｐ．ｂｅｔａｅ侵染，对确定Ｐ．ｂｅｔａｅ的早期侵染有重要意义。

甜菜多粘菌传带甜菜坏死黄脉病毒的细胞定位研究

利用砂培体系继代培养不同病区甜菜多粘菌（Ｐｏｌｙｍｙｘａｂｅｔａｅ），经酶联检测，分离得到２个带毒率高的分离株Ｎ，ＨＲ１２。应用甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）抗血清和免疫金标记技术分析了甜菜根中Ｐ．ｂｅｔａｅ不同发育阶段与病毒的关系。在初生原质体、游动孢子囊以及未成熟的游动孢子中观察到被金颗粒标记的病毒粒子，在休眠孢子外围也观察到金标记的病毒粒子，但在休眠孢子内未直接观察到病毒粒子，只是在其内壁及液泡中常见有标记上的金颗粒。

砂培体系中甜菜多粘菌生物学特性的研究

在改进的砂培体系中，甜菜多粘菌（Polymyxabetae）完成生活循环只需7天。利用砂培体系研究了多粘菌在不同pH值、光照、接种材料和接种量条件下，对寄主的侵染以及在其中繁殖的情况，研究了多粘菌完成侵染所需时间，侵染的游动孢子最初释放时间，游动孢子体外存活期和休眠孢子对温度的敏感性等生物学特性。

禾谷多粘菌休眠孢子的简易提取方法

简化了的禾谷多粘菌(Polymyxa graminis Ledingham)休眠孢子提取方法为:洗净干燥麦根,经高速粉碎机粉碎,称1g浸泡于15ml 1％偏磷酸钠和0.25％吐温20的混合提取液中,4℃下过夜。在强度为1000KHz的超声波发生器上处理45min,过滤,在血球计数板上计0.03mm^3的体眠孢子数。此提取法省去了组织捣碎机捣碎和低速离心等程序,因此工效比原方法提高3倍以上。比较了简化与不简化2种方法提取不同大麦品种根部所得的孢子数量,探讨了样品放置在超声波发生器上不同部位对休眠孢子提取效果的影响。

大麦根中禾谷多粘菌休眠孢子堆的超微结构

通过扫描电镜和透射电镜观察了禾谷多粘菌PolymyxagraminisLed．休眠孢子堆的超微结构。休眠孢子堆仅分布于寄主根表皮细胞中。休眠孢子堆形状不一，有的呈球状，有的呈律状，少则由几十个，多则由数百个紧密排列的休眠孢子组成。休眠孢子彼此通过刺突连接，细胞壁分4层，第三层局部区域结构松散，可能与初生游动孢子萌发孔有关。成熟休眠孢子细胞质丰富，细胞质膜内侧含有大量脂质粒，细胞质中央含一个细胞核，围围分布线粒体、内质网、高尔基体、液泡等细胞器。成熟的休眠孢子在越夏前大多数已释放初生游动孢子，只剩下空壳。表面凹陷是已释放游动孢子的休眠孢子一个特征。本文还讨论了禾谷多粘菌休眠孢子在病害流行学中的作用。

禾谷多粘菌原质团和游动孢子囊的超微结构

本文描述了禾谷多粘菌原质团和游动孢子囊的超微结构。单核的原质团经分裂,形成多核原质团,进而发育成游动孢子囊,游动孢子囊中形成许多次生游动孢子。原质团和游动孢子囊中的次生游动孢子均含有细胞核、线粒体、高尔基体、内质网、液泡、具膜小管、脂质粒和核糖体等细胞器。成熟的游动孢子囊中还可见游离的鞭毛。

大麦黄花叶病及其真菌介体禾谷多粘菌的研究进展

禾谷多粘菌Polymyxa graminis L.是一种土传真菌,传播10种植物病毒。在大麦上,它传播大麦黄花叶病毒(Barley Yellow Mosaic Vrius,BaYMV)和大麦温和性花叶病毒(Barley Mild Mosaic Virus,BaMMV)。由于此二种病毒在大麦上所引起的症状相似,故统称大麦黄花叶病。

禾谷多粘菌对小麦梭条斑花叶病毒的传播及其土壤侵染潜力的测定

从大田侵染小麦梭条斑花叶病毒的小麦病根中挑取禾谷多粘菌休眠孢子堆，接种受侵染小麦品种扬麦４号，经砂培养纯化，获得５个禾谷多粘菌分离物，但都为无毒。无毒多粘菌休眠孢子堆接种表现ＷＳＳＭＶ症状的小麦，经培养可饲获病毒，并可经接咱后将病毒传播给无病小麦，供试的４个大小麦禾谷多粘菌分离物都可对大小进行交叉侵染，产生同样数量的游动孢子产量。供试５个病土和２个无病土样品，都具有强大持多粘菌侵染潜力。

禾谷多粘菌分离、培养、接种及用于大麦抗黄花叶病的鉴定

通过禾谷多粘菌Polymyxa graminis L.休眠孢子分离接种感病大麦品种,并进行砂培养,获得13个纯化了的禾谷多粘菌分离物,且其中3个带有大麦黄花叶病毒(BaYMV)。用分别带有BaYMV和大麦温和花叶病毒(BMMV)的英国禾谷多粘菌分离物的游动孢子接种13个中国大麦品种,以及用BaMMV摩擦接种36个中外大麦品种,抗性鉴定结果游动孢子接种与摩擦接种一样,均与田间鉴定结果一致,且大麦对BaYMV的抗性与对BaMMV的抗性一致,从而这2种接种方法可用于大麦品种(系)和育种中间体对BaYMV抗性的快速鉴定和筛选。游动孢子或休眠孢子接种方法还可有效地鉴定大麦对禾谷多粘菌的抗性。

甜菜丛根病体系中的类细菌研究以及甜菜多粘菌的生物防治探索

甜菜丛根病体系中的类细菌研究以及甜菜多粘菌的生物防治探索王琦王慧敏于嘉林刘仪（中国农业大学植物病理学系，北京１０００９４）ＳＯＭＥＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＯＦＢＬＯＳＩＮＲＨＩＺＯＭＡＮＩＡＳＹＳＴＥＭＡＮＤＢＩＯＣＯＮＴＲ...

砂培体系中甜菜多粘菌的生物学特性和传带甜菜坏死黄脉病毒的定位研究

砂培体系中甜菜多粘菌的生物学特性和传带甜菜坏死黄脉病毒的定位研究ＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＡＮＤＢＮＹＶＶＴＲＡＮＳＭＩＳＳＩＯＮＯＦＰＯＬＹＭＹＸＡＢＥＴＡＥ杨莉莉彭日荷于嘉林刘仪ＹａｎｇＬｉｌｉＰｅｎｇＲｉｈｅＹｕＪｉａ...

我国禾谷多粘菌地理分布和生理分化研究

调查我国２６ 个省、市、自治区，９３ 个县市，１８３ 个取样点，１ ３７３ 个大、小麦根样本。根据休眠孢子出现频率（有休眠孢子样本数／总样本数）和每克麦根休眠孢子数，将我国禾谷多粘菌的分布区分为３ 个，多菌区包括江、浙、沪、皖、赣、湘、鄂和鲁的大部分和川、陕小部分，冀个别地区；少菌区包括豫大部和晋、甘小部或个别地区；其余地区为无菌区。分布区主要在长江、黄河和淮河中下游流域。禾谷多粘菌的分布范围比大麦黄花叶病等 ３ 种病毒病的分布更广泛。

大麦品种对禾谷多粘菌的抗性

1989～1994年在浙江省嘉善、宁波和浦江，江苏省盐城和上海市等5地大麦黄花叶病重病田，用休眠孢子定量法评价399价大麦品种对禾谷多粘菌的抗性。结果免疫和高抗品种0份，抗64份，中抗到高感335份。大麦不同品种对禾谷多粘菌的抗性，有极显著差异，孢子数相差近14倍。抗大麦黄花叶病的品种数远多于抗禾谷多粘菌的品种数。在抗禾谷多粘菌的品种中，仅不到半数品种高抗大麦黄花叶病。经统计分析，大麦品种间抗禾谷多粘菌与抗病毒无相关性。

甜菜多粘菌侵染及萌发特性研究

甜菜多粘菌在２５～３０℃条件下水培接种，５～１０ｄ在寄主根细胞内出现游动孢子囊，盆栽接种８ｄ后寄主根内出现原质体；１１～２５ｄ后出现粘质阿米巴体，４０ｄ左右出现休眠孢子囊堆。地上部分黄化症状与休眠孢子囊堆同时出现。

禾谷多粘菌(Polymyxa graminis)侵染及传毒体系的研究

在人工气候箱内 ,以小麦为寄主建立了专性寄生禾谷多粘菌 (Polymyxagraminis)的侵染体系 ,使P .graminis能够快速大量繁殖 ,生活史缩短为 1 3～ 1 5d。简化了单孢子堆分离以及病根表面消毒等分离纯化方法 ,对接种菌源材料、寄主苗龄、温度、pH值及营养液成分等影响因素进行了测定 ,优化完善了P .graminis的砂培条件。建立了针对小麦黄花叶病毒(wheatyellowmosaicvirus,WYMV)的稳定高效室内传毒体系。在此体系上 ,真菌传带病毒的效率可达 70 % ,机械接种病毒后的小麦显症时间可缩短至 30d左右。

禾谷多粘菌游动孢子侵染小麦的若干影响因素

测定了温度,pH值和Zn^(2+)等因子对禾谷多粘菌(Polymyxa graminis)游动孢子侵染小麦的影响.结果表明,游动孢子侵染的最适温度为10～25℃,5℃以下和30℃以上侵染率显著下降,35℃时不能侵染;侵染的最适pH值为7.0～7.5,当pH值≤4.5或≥9.0时不能侵染.Zn^(2+)浓度为0.004～0.04ppm时,侵染逐渐下降,0.4ppmZn^(2+)溶液完全阻止侵染.采用Zn^(2+)溶液(8ppm)冲洗法测得游动孢子侵染小麦初生根的最短时间为90分钟,5～8小时侵染达到高峰.

新农药105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP对烟草赤星病的防治效果

针对新登记生物农药105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP防治烟草赤星病进行了室内抑菌试验及连续2年开展了田间试验。结果表明,与其他药剂相比,105亿CFU/g多粘菌·枯草菌WP对赤星病菌有较好的抑制作用,能更有效防控烟草赤星病的发生,975 g/hm^(2)防治效果可达82.58%,发病前喷施,间隔7~10 d,连续喷施3次,可取得理想的效果。