从“质量源于设计”角度浅谈多糖-蛋白结合疫苗药学研发的考虑

多糖-蛋白结合疫苗生产工艺步骤多且涉及多步化学反应,产品结构复杂,关键质量属性极大程度依赖于早期研发确定的生产工艺。本文基于"质量源于设计(Qb D)"的理念,围绕对多糖-蛋白结合疫苗关键质量属性的分析和认识,讨论如何在早期研发阶段筛选出适宜的生产工艺、在临床验证中建立适宜的质量标准。

多价肺炎链球菌荚膜多糖-蛋白结合疫苗的研究进展

肺炎链球菌是人类致病率及死亡率极高的致病菌之一,严重威胁人类的生命健康。肺炎链球菌荚膜多糖具有良好的免疫原性,可激发机体产生保护性抗体,但单纯的荚膜多糖疫苗不能诱导产生免疫记忆抗体,将多糖与载体蛋白结合后可诱导产生记忆性抗体,有效提高疫苗的免疫原性,预防肺炎链球菌入侵性疾病。目前,7、10及13价肺炎链球菌多糖-蛋白结合疫苗(简称肺炎结合疫苗)已相继问世,15及20价肺炎结合疫苗处于临床研发阶段。本文就肺炎结合疫苗研发、制备方法、免疫原性影响因素及国内接种情况等方面的研究进展作一综述。

C群脑膜炎球菌多糖-蛋白结合疫苗在小鼠中的黏膜免疫应答

目前大部分疫苗接种仍采作注射方式，然而，黏膜免疫接种的优点多于注射途径免疫。古巴Finlay研究所的Cuello评估了其制备的C群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗（MGCP-TT）在小鼠中的黏膜免疫应答。

11价肺炎链球菌多糖-蛋白D结合疫苗在婴儿中的免疫原性和安全性[英]Narkka A…／／Pediatr Infect Dis J．

在过去的10年中，对于一系列以不同蛋白和多糖作为载体的多糖．蛋白复合物型抗肺炎链球菌疫苗的研究表明，在众多的疫苗中，只有1种带有CRM197载体蛋白的7价疫苗(PncCRM)能够有效地阻止致病性肺炎链球菌的感染。在欧美地区，这种疫苗广泛应用于高危人群，但其血清型是4、6B、9V、14、18C、19F和23F，缺少了亚洲等众多发展中国家普遍存在的血清型1和5。为了有效地抑制更多型别的肺炎链球菌，

用大肠杆菌制备O157多糖-菌毛蛋白结合物的研究

目的以大肠杆菌O157型多糖与菌毛蛋白PilE为模型,在大肠杆菌中重构脑膜炎奈瑟球菌的O-糖基化修饰系统,为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗技术提供基础。方法用Red重组技术敲除大肠杆菌W3110的O抗原连接酶基因waaL,构建CLM24菌株。在该菌株中共表达脑膜炎奈瑟球菌菌毛蛋白基因pilE、寡糖转移酶基因pglL,构建O-糖基化修饰系统。分别转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL与大肠杆菌O157型多糖表达载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,再利用Western印迹检测菌毛蛋白PilE的修饰情况。结果利用抗His-tag单抗进行Western印迹检测,16℃IPTG诱导条件下,转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66EH-pilE-his/pETtac28-wbbL-pglL与其他对照菌相比,不仅在相对分子质量为19×103处有特异性条带,而且在相对分子质量(40～60)×103处也出现了特异的梯状条带;转化大肠杆菌O157的O多糖基因簇克隆载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66EHpilE-his/pETtac28-pglL/pACYC184-O157用抗O157多抗和抗His-tag单抗进行Western印迹检测,在相对分子质量(40～60)×103处均产生特异的梯状条带。结论在大肠杆菌中重建的O-糖基化修饰系统可以利用自身的O16型O多糖或异源的O157型O多糖修饰菌毛蛋白PilE,获得多糖-蛋白结合物。本研究为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了技术基础。

脑膜炎球菌疫苗

本文讨论了脑膜炎球菌疫苗的研制现状和效力。重点讨论了采用传统和逆向疫苗学方法研制的B群脑膜炎球菌疫苗的效力。

C反应蛋白对评价肺炎结合疫苗预防肺炎效果的作用

尽管肺炎球菌蛋白-多糖结合疫苗（PCV）可使胸部X线摄片证实的肺泡实变（CXR—AC）降低20%～37%，但在未感染HIV的儿童中，PCV对预防临床确诊的下呼吸道感染（C-LRTI）的效力仅为6%～9%。此项研究旨在明确C反应蛋白（CRP）和／或降钙素原水平能否用于检测9价PCV的疫苗效力（VE）及疫苗对肺炎负荷的影响，并与CXR—AC指标进行比较。