基于鸟枪法脂质组学研究环氧酶-2抑制剂对关节炎模型血清脂代谢的干预作用

心血管疾病(CVD)是类风湿关节炎(RA)患者死亡的重要原因之一,脂代谢紊乱与CVD发生有密切关联,因而有必要对RA和药物治疗导致的脂代谢改变进行探讨。该研究采用胶原诱导法(CIA)构建关节炎模型,引入多维质谱鸟枪法开展血清脂质分析,检测了血清中105种脂质分子,发现模型大鼠体内7种磷脂酰肌醇、15种鞘磷脂、5种神经酰胺、10种磷脂酰胆碱和2种溶血磷脂酰胆碱异常上调,环氧酶-2(COX-2)抑制剂可部分修复紊乱的脂代谢,但对5种磷脂酰胆碱和1种溶血磷脂酰胆碱具有异常调控作用。该研究从脂质分子水平探讨了RA及COX-2抑制剂对脂代谢的干预作用,可以为RA的心血管风险研究提供信息。

基于多维质谱“鸟枪法”探讨运脾和络方对2型糖尿病大鼠骨骼肌脂肪异位沉积的影响

目的:探讨运脾和络方对2型糖尿病(T2DM)大鼠骨骼肌脂肪异位沉积的影响。方法:采用高脂饲料喂养ZDF大鼠建立T2DM模型,将大鼠随机分为模型组和运脾和络组,另设正常组普通饲料喂养。干预10周后检测各组大鼠体质量、空腹血糖及脂质含量,观察各组大鼠骨骼肌病理改变,并运用多维质谱"鸟枪法"脂质组学技术进一步进行模式判别,分析各组大鼠骨骼肌脂质代谢的变化,筛选潜在生物标记物并进行代谢物网络分析。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量增加,血糖升高,脂质含量升高(P<0.01,P<0.05),病理观察显示脂肪沉积;与模型组比较,运脾和络组大鼠体质量减轻,血糖下降,脂质含量有不同程度下降,病理观察显示脂肪沉积改善。脂质组学通过采用有监督式方法OPLS-DA进行建模分析,筛选并鉴定出14个生物标记物,运脾和络可回调各生物标记物的异常改变。结论:运脾和络方可改善T2DM大鼠骨骼肌脂肪异位沉积,其机制可能与改善骨骼肌线粒体功能和调节脂肪酸代谢及磷脂代谢有关。

基于多维质谱“鸟枪法”脂质组学技术研究“上火”患者血浆脂质组学

目的:利用脂质组学的方法探讨"上火"发生的机制。方法:利用多维质谱"鸟枪法"脂质组学技术(MDMS-SL)完成了93例各类"上火"患者以及37名正常人群血浆中多种脂质分子的定性定量分析,其中"上火"患者中36例以口腔溃疡为主要表现,32例以干眼为主要表现,25例以牙龈炎主要表现。结果:与正常人群比较,"上火"人群血浆中缩醛型磷酯、sn-2型溶血磷酯、神经酰胺、磷酯酰肌醇(PI)发生了显著变化,其中以PI变化最为明显,具体为"上火"人群PI总体含量比正常人群上升约44%(P<0.05)。不同"上火"表型的人群在不同脂质的代谢方面表现出相同的变化趋势。结论:"上火"人群的血浆脂质代谢发生了显著变化,脂质代谢的异常可能通过氧化应激以及能量代谢增强,导致"上火"症状的发生。

羊骨脂质的组成分析

为了实现羊骨副产物的有效利用和为羊骨油高值化产品开发提供基础数据,以羊腿骨为原料,提取其中的油脂,分别采用高效液相色谱法(HPLC)、多维质谱鸟枪法(MDMS-SL)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对羊骨油的甘油酯组成、脂质组学、脂肪酸组成进行分析。结果表明:羊骨油中甘油三酯含量达到96.76%,还有少量的甘油二酯(1.41%),而甘油一酯未检出;羊骨油中共鉴定出19种酰基肉碱、17种鞘磷脂、37种磷脂酰胆碱、39种甘油三酯,总含量分别为5.76、96.58、85.18 nmol/g和15.76μmol/g;羊骨油中共鉴定出11种脂肪酸,其中饱和脂肪酸含量为11.51%,单不饱和脂肪酸含量为72.34%,多不饱和脂肪酸含量为7.56%。

运脾解毒通络祛湿方对胶原诱导性关节炎大鼠炎症因子表达及脂质代谢的影响

目的:探究运脾解毒通络祛湿方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠脂质代谢及相关炎症因子的影响,并寻找二者的相关性。方法:32只雌性Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组、模型组、中药组、西药组,每组8只。以胶原注射的方式构建CIA模型,在第14天分别以单蒸水、运脾解毒通络祛湿方、甲氨蝶呤干预3周,期间每周评价各组大鼠的体质量及双后肢足趾容积,从第14天开始每周评价各组关节炎症评分。ELISA法检测初次免疫后第21、35天大鼠血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-17A(IL-17A)水平。对初次免疫后第35天大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)及肌酐(Crea)含量进行检测。利用多维质谱“鸟枪法”脂质组学技术对磷脂酰肌醇(PI)、神经酰胺(CER)、磷脂酰丝氨酸(PS)、4-羟基壬烯醛(HNE)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、鞘磷脂(SM)、磷脂酰甘油(PG)7大类脂质分子进行分析;对具有差异的脂质分子与炎症因子进行Pearson相关性分析。结果:各组大鼠体质量无明显变化。与模型组比较,各治疗组关节炎症评分显著下降(P<0.05,P<0.01),西药组大鼠足趾肿胀度显著降低(P<0.05),中药组足趾肿胀度也得到了一定的缓解。药物干预后,各治疗组血清IL-17A、TGF-β1、TNF-α水平较模型组均显著下降(P<0.01)。各治疗组ALT、AST、TP含量无显著性差异,而Crea含量显著下降(P<0.01,P<0.05)。药物干预后,与模型组比较,PI含量显著下降(P<0.01)。PI脂质分子与炎症因子的Pearson相关性分析结果显示,PI脂质分子与大鼠血清中IL-17A、TGF-β1、TNF-α水平具有显著的正相关性(P<0.01,P<0.05)。结论:CIA大鼠模型中存在PI类脂质代谢异常,且该脂质代谢异常与炎症相关,运脾解毒通络祛湿方可通过调节PI类脂质的代谢,降低炎症水平,减轻关节肿胀,改善类风湿关节炎的疾病状态,且该方对肝肾功能无显著影响。