以 CEA 为靶抗原的基因免疫治疗是近年来肿瘤治疗学研究的突出进展,我们用 CEA 真核表达质粒(pCEA)免疫兔子,分别以重组人 CEA 痘苗病毒(rV-CEA)和生理盐水作阳性和阴性对照。与生理盐水相比,pCEA 组和 rV-CEA 组兔血清 CEA 含量均明显...以 CEA 为靶抗原的基因免疫治疗是近年来肿瘤治疗学研究的突出进展,我们用 CEA 真核表达质粒(pCEA)免疫兔子,分别以重组人 CEA 痘苗病毒(rV-CEA)和生理盐水作阳性和阴性对照。与生理盐水相比,pCEA 组和 rV-CEA 组兔血清 CEA 含量均明显升高,并出现高滴度的作用时间持续更长久。展开更多
提出了一种检测三磷酸腺苷(ATP)的非标记荧光新方法,该方法基于T4多聚核苷酸激酶调控Lambda核酸外切酶活性的原理,利用DNA荧光染料SYBR Green I作信号报告基团.有ATP时,双链DNA底物能在T4 PNK作用下发生5'端磷酸化,进而被核酸外切...提出了一种检测三磷酸腺苷(ATP)的非标记荧光新方法,该方法基于T4多聚核苷酸激酶调控Lambda核酸外切酶活性的原理,利用DNA荧光染料SYBR Green I作信号报告基团.有ATP时,双链DNA底物能在T4 PNK作用下发生5'端磷酸化,进而被核酸外切酶降解成DNA碎片,得到较弱的荧光信号,信号强度与ATP浓度成反比.该方法对ATP检测的线性范围为0.04~4 mmol/L,检测限为20 nmol/L.实验结果表明本方法具有快速、成本低、灵敏度高和简单易操作等优点,可进一步应用于复杂生物样品的分析.展开更多
文摘以 CEA 为靶抗原的基因免疫治疗是近年来肿瘤治疗学研究的突出进展,我们用 CEA 真核表达质粒(pCEA)免疫兔子,分别以重组人 CEA 痘苗病毒(rV-CEA)和生理盐水作阳性和阴性对照。与生理盐水相比,pCEA 组和 rV-CEA 组兔血清 CEA 含量均明显升高,并出现高滴度的作用时间持续更长久。
文摘目的:寻求一种快速稳定的方法从人外周血中诱导培养出成熟的树突细胞(DC)。方法:用密度梯度离心法从正常人外周血中分离出单个核细胞(PBMC),再用贴壁法获取单核细胞,在0 h加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4),随后分四组继续培养:第一组在24 h加入多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸[Poly(I∶C)],继续培养24 h,于48 h收集DC细胞,即48 h Poly(I∶C)组;第二组在24 h加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),继续培养24 h,于48 h收集DC细胞,即48 h TNF-α组;第三组在36 h加入Poly(I∶C),继续培养36 h,在72 h时收获DC细胞,即72 h Poly(I∶C)组;第四组在36 h加入TNF-α,继续培养36 h,于72 h收集DC细胞,即72 hTNF-α组。同时设立对照组,仅加GM-CSF和IL-4。结果:经流式细胞仪检测72 h Poly(I∶C)组获得的成熟DC细胞的百分比含量最高;混合淋巴细胞培养(MLC)表明72 h Poly(I∶C)组获得的DC细胞具有较强的刺激淋巴细胞增殖的能力。结论:Poly(I∶C)诱导下人外周血DC的体外培养与成熟的方法是具有快速、稳定、经济、简便的特点,为DC的深入研究和临床应用奠定了基础。