新型冠状病毒RNA依赖性RNA聚合酶抑制剂研究进展

由严重急性呼吸综合征冠状病毒2型导致的新型冠状病毒感染席卷全球,寻找广谱抗病毒特效药一直是一项重大任务。RNA病毒的RNA依赖性RNA聚合酶是一类不同病毒间在结构和功能上高度保守的关键非结构蛋白,针对该聚合酶为靶点开发新的小分子抑制剂至关重要。本文作者从新型冠状病毒RNA依赖性RNA聚合酶的结构为出发点,详细阐述了该病毒RNA依赖性RNA聚合酶的作用机制以及不同种类抑制剂的特点。着重从药物化学的角度介绍了核苷类似物和非核苷类似物的作用特点和作用机制,综述了多种小分子聚合酶抑制剂化学结构与生物活性之间的关系。

流感病毒RNA碱性聚合酶-2抑制剂研究进展

季节流行性感冒是一种易在人际传播的急性病毒感染,是目前对人类健康构成威胁的主要呼吸道传染病之一。迄今为止,流感的预防和治疗主要采用接种疫苗预防和开发抗病毒药物防治并重的应对手段。目前临床应用的抗流感病毒药物包括基质蛋白-2抑制剂(如金刚烷胺)、神经氨酸酶抑制剂(如奥司他韦)、内切酶抑制剂(如巴洛沙韦酯)和聚合酶抑制剂(如法匹拉韦)等,均已产生广泛耐药性。研究开发机制新颖的、与现有药物没有交叉耐药的抗流感病毒药物是解决季节流行性感冒治疗这一尚未完全解决的医学问题,以及应对流感大规模爆发的有效手段。流感病毒RNA碱性聚合酶-2(PB2),由于其在不同流感病毒间的高度保守性而不易产生耐药性,使其成为一个非常有吸引力的药物靶点。目前PB2抑制剂的研究开发已成为抗流感病毒药物的一个热点,特别是围绕明星分子吡莫地韦及其类似物的研究吸引了极大的关注,虽然吡莫地韦因疗效不理想最终止步于Ⅲ期临床试验,但是在其研究过程中所揭示出的PB2蛋白与小分子结合模式及构效关系,为进一步开发该类药物奠定了扎实的基础。本文主要针对PB2抑制剂近10年相关药物化学的研究进展进行综述,并对该药物研究领域的前景提出展望。

疏肝健脾补髓方防治多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂维持治疗卵巢癌所致血液毒性的效果观察

目的观察疏肝健脾补髓方防治多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)维持治疗卵巢癌所致血液毒性的效果。方法选取2021年8月至2023年12月就诊于安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科及医联体科室符合纳入标准的卵巢癌患者60例,按照随机数字表法分为观察组(30例)及对照组(30例)。对照组予以PARPi维持治疗,观察组在对照组基础上联合疏肝健脾补髓方同步治疗。治疗3个月后比较2组血液毒性发生率、严重程度、持续时间、中医证候积分及疗效、不良反应情况。结果治疗3个月后,观察组贫血、血小板减少及中性粒细胞减少发生率[26.7%(8/30)比53.3%(16/30)、23.3%(7/30)比50.0%(15/30)、20.0%(6/30)比46.7%(14/30)]及严重程度均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组贫血及血小板减少的持续时间均短于对照组[(2.56±1.33)d比(4.21±2.00)d、(7.33±0.38)d比(9.26±1.22)d],差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗3个月后,观察组中医证候积分明显低于对照组,中医证候疗效好于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组恶心呕吐、腹泻、便秘发生情况轻于对照组(均P<0.05)。结论疏肝健脾补髓方可减轻血液毒性发生率及严重程度,缩短发生时间,同时改善患者中医证候疗效,安全性尚可,维护了PARPi治疗的应答持续性。

PARP抑制剂与免疫检查点抑制剂联合治疗在妇科恶性肿瘤中的应用

近年来肿瘤靶向和免疫治疗的研究进展迅速,如多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂[poly(ADP-ribose)polymerase inhibitor,PARPi]、免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICI)等已改变了妇科肿瘤的传统治疗模式,但部分患者疗效有限或出现耐药。临床前研究发现,PARPi损伤DNA修复过程,可造成肿瘤突变负荷与肿瘤特异性抗原增加,调节肿瘤微环境,刺激肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)产生并促进抗肿瘤免疫反应,为PARPi与ICI联合治疗提供了理论基础。近年多项临床研究发现PARPi与ICI联合使用可显著改善妇科恶性肿瘤患者的预后。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)治疗卵巢癌:影像学研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)的出现,开启了维持治疗卵巢癌的新篇章,使大部分患者预后得到明显改善。影像学可对患者进行非侵入性全面评估,为临床诊治提供重要信息。本文就PARPi作用原理及影像学有关PARPi治疗卵巢癌进展进行综述。

预防性护理降低卵巢癌患者使用多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂后不良反应发生率

目的:探讨预防性护理对卵巢癌患者使用多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(adenosine diphosphate ribose)polymerase,PARP]抑制剂后预防不良反应的效果。方法:收集2020年4月至2022年7月苏北人民医院收治的56例卵巢癌患者,随机分为对照组和观察组。对照组实施常规护理,观察组在常规护理的基础上实施预防性护理,比较2组满意度、疗效、焦虑自评量表(Self-Rating Anxiety Scale,SAS)和抑郁自评量表(Self-Rating Depression Scale,SDS)评分以及不良反应发生率。结果:观察组满意度96.43%,显著高于对照组71.42%(P<0.05),2组患者疗效差异无统计学意义(P>0.05);2组患者护理后SAS、SDS评分均显著低于护理前(均P<0.05);观察组不良反应发生率为14.29%,低于对照组的42.85%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对使用PARP抑制剂的卵巢癌患者实施预防性护理干预,可有效降低患者使用PARP抑制剂后不良反应的发生率,可在临床推广。

PARP抑制剂治疗转移性去势抵抗性前列腺癌有效性及安全性的Meta分析

目的:系统评价PARPi治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)的有效性及安全性,以期为临床决策供循证医学证据。方法:依据纳入和排除标准,网络检索2015年1月~2023年6月PubMed、Web of Science、Embace、Clinicial.gov中有关PARPi治疗mCRPC的随机对照试验文献,使用RevMan5.4及Stata17.0软件对数据进行Meta分析。结果:纳入7篇随机对照试验文献,共1888例患者。Meta分析结果表明,与非PARPi组比较,PARPi组(PARPi联合或不联合抗激素治疗)可提高mCRPC的放射学无进展生存期(HR=0.52,95%CI=0.34~0.78)和总生存期(HR=0.72,95%CI=0.60~0.86),差异均有统计学意义(P<0.05)。在安全性方面,PARPi组1~2级骨痛、背痛、贫血、中性粒细胞减少、恶心、呕吐、腹泻、乏力不良反应发生率明显高于非PARPi组,差异均有统计学意义(P<0.05);≥3级上述不良反应中与非PARPi组比较,PARPi组中只有恶心和贫血不良反应发生率较高,差异均有统计学意义(P<0.05),而骨痛、背痛、中性粒细胞减少、呕吐、腹泻、乏力两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:与非PARPi比较,PARPi联合或不联合抗激素治疗可提高mCRPC的放射学无进展生存期和总生存期,3级及以上不良反应发生率低,值得在临床上推广应用。

PARP抑制剂Olaparib对非小细胞肺癌细胞的放疗增敏作用及其机制

目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂Olaparib对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的放疗增敏作用及其可能的发生机制。方法以人NSCLC细胞A549细胞系为研究对象,采用CCK-8实验检测不同药物浓度梯度对细胞的增殖抑制作用。选择对细胞10%抑制浓度(IC10)作为后续实验的药物浓度,实验分为对照组、Olaparib组、单纯放疗组(RT组)、Olaparib联合放疗组(Olaparib+RT组)。通过克隆形成实验和EDU细胞增殖实验检测Olaparib联合放疗后的增敏效果,流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot实验检测各组DNA损伤标志蛋白γ-H2AX的表达。结果Olaparib对A549细胞具有抑制作用且呈剂量依赖性;在处理A549细胞24 h后IC10为2.593μmol·L^(-1);Olaparib放疗增敏比为1.966。Olaparib+RT组A549细胞的增殖能力下降(P<0.01);Olaparib+RT组的G2/M期细胞占比高于对照组(46.0%vs 10.8%,P<0.05);且Olaparib+RT组细胞中γ-H2AX明显高于RT组(P<0.01)。结论Olaparib对人NSCLC细胞A549细胞系有着放疗增敏效果,其机制可能与影响细胞周期、增加放疗后细胞DNA双链断裂形成相关。

PARP抑制剂在上皮性卵巢癌中的耐药机制及解决策略

上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)的致死率在女性生殖系统恶性肿瘤中居首位。EOC的传统治疗方案是肿瘤细胞减灭术联合铂类药物为基础的化疗,但2年内仍有约70%的患者复发或耐药。多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]抑制剂通过对乳腺癌相关基因(breast cancer-related gene,BRCA)突变的肿瘤细胞发挥合成致死效应,为EOC提供了全新的治疗模式。PARP抑制剂为EOC靶向维持治疗带来重大突破,然而仍有患者在治疗中逐步耐药,主要的耐药机制包括同源重组修复途径恢复、药物靶点变化和致死性DNA损伤减少,目前的解决策略包括PARP抑制剂联合DNA损伤修复抑制剂、联合抑制同源重组修复通路的药物、联合传统抗癌方案、联合P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)抑制剂以及更换其他类型的PARP抑制剂。

从价值医疗视角探讨晚期卵巢癌多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂维持治疗的用药选择

目前,国内批准了4种多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂用于晚期卵巢癌患者的维持治疗,药物可及性、可负担性得到极大改善。随着PARP抑制剂的广泛使用,临床医师面临着根据指南建议指导个体化临床实践的新挑战。本文从价值医疗视角(有效性、安全性、可及性)探讨了晚期卵巢癌PARP抑制剂维持治疗的用药选择,以期为临床用药提供指导。

多聚ADP-核糖聚合酶抑制剂对高浓度锌损伤PC12细胞的保护作用

探讨多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对400μmol/L氯化锌损伤PC12细胞的保护作用及其对锌造成的细胞死亡类型的影响。应用MTT法,免疫细胞化学和Western印迹分别测定PC12细胞的存活率和PARP活性;用Hoechst33342/PI荧光双染色、膜联蛋白V结合实验及DNA断裂分析等方法检测细胞死亡类型。结果表明:在400μmol/L氯化锌的作用下,细胞存活率降至(22.7±4.6)%,PARP活性增强,坏死、凋亡和正常细胞百分比分别为(58.4±6.3)%、(18.0±5.6)%及(23.6±4.2)%;3-AB使细胞存活率提高至(76.9±4.7)%,PARP活性减弱,坏死细胞百分数降至(19.2±5.2)%,而正常和凋亡细胞百分数增加到(43.3±1.9)%和(37.5±6.5)%。实验证明,PARP参与了高浓度锌诱导的PC12细胞损伤,抑制PARP活性可提高细胞的存活率,而这种保护作用在于减少细胞的坏死而非凋亡。

RNA依赖的RNA聚合酶的结构特征及其靶向抑制剂的开发

新型冠状病毒肺炎是由新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome-coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致的急性呼吸道传染性疾病。自2019年爆发以来,SARS-CoV-2在世界范围内引起大流行,严重威胁人类的生命安全。目前,已有的疫苗尚不能提供完全的机体免疫保护。因此,开发广谱有效的抗病毒抑制剂是当下热门的研究方向。SARS-CoV-2属于RNA病毒,其RNA依赖性的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRp)在不同RNA病毒中具有高度保守性,是抗病毒抑制剂研发的重要靶标。RdRp是RNA病毒复制的核心组成部分,具有典型的右手杯状结构特征。本文重点介绍近年爆发并持续流行的新型冠状病毒RdRp的结构特征,以及靶向抑制剂的研发进展。同时,选取了其它几种有代表性的致病RNA病毒:流感病毒、轮状病毒、人类鼻病毒、丙型肝炎病毒和寨卡病毒,介绍了它们RdRp的结构特征及其靶向抑制剂的开发。本研究比较了抑制剂靶点结构的异同及抑制效果差异,并分析了可能导致该差异的原因。最后,本文总结讨论了目前针对RdRp抑制剂相关研究的瓶颈问题,为未来针对突发性的RNA病毒传染病的抗病毒抑制剂开发提供新思路。

卵巢癌对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂耐药机制的研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂类药物的问世是近年来肿瘤靶向治疗领域中的重要突破之一,其对于卵巢癌的治疗效果颇为显著。然而,一部分患者对于PARP抑制剂的治疗并不敏感,这种耐药现象限制了其在卵巢癌中的应用。探讨PARP抑制剂耐药机制、寻找克服耐药策略成为进一步扩大PARP抑制剂获益人群的迫切需求。现有研究表明,卵巢癌对PARP抑制剂耐药的主要机制有同源重组修复活性恢复、相关信号通路因子表达异常、药物外排作用和复制叉稳定性改变等。本文将就卵巢癌对PARP抑制剂耐药机制的研究进展作一综述,旨在为PARP抑制剂在临床中的合理应用提供理论依据,并对克服耐药策略的探索提供参考思路。

靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂AZD-9574的合成工艺改进

目的精简合成工艺,优化原始步骤,对靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂AZD-9574合成工艺进行改进。方法本研究分别以5-溴代吡啶酸甲酯和2-甲基(4-溴-3-氟-2-硝基苯胺)丙酸酯为起始原料,经氟代、取代、氨解、脱保护基、取代、还原环化、氧化、偶联、取代合成目标物靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂。结果对合成中关键步骤反应条件进行了优化,提高了产率。结论该方法操作简便、原料价廉易得、反应条件温和,可用于靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂的大规模制备。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂诱导的血小板减少症的防治研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)是过去10年卵巢癌治疗的突破性药物,通过阻断参与DNA修复过程的酶发挥作用,用于卵巢癌的维持治疗。但PARPi诱导的血小板减少不但增加患者出血风险、降低治疗药物剂量、延迟用药时间,严重时可导致治疗终止,应引起高度重视。本文重点介绍了PARPi诱导血小板减少症的发病率、发生机制、危险因素及防治方法,为临床防治PARPi诱导的血小板减少症提供参考。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂药物不良反应信号挖掘与分析

目的:挖掘、分析聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂的药物不良反应(ADR)信号,为提高临床用药安全提供参考。方法:应用英国药品和保健品管理局(MHRA)的综合标准法挖掘美国FDA不良事件报告系统(FAERS),调取2014年1月1日~2021年12月31日的不良反应事件数据,使用SQL SERVER(2008 R2)数据库整理信息,以4种PARP抑制剂的名称作为检索关键词。结果:截至2021年12月31日,总共收集9 849 888例不良反应事件信息,其中与尼拉帕利相关的不良反应事件9849例,奥拉帕利6655例,他拉唑帕利420例,卢卡帕利3327例;经挖掘后分别得到尼拉帕利的ADR信号597个,奥拉帕利168个,他拉唑帕利35个,卢卡帕利132个。所有信号涉及25个系统,以各类检查指标、胃肠系统疾病症状、血液及淋巴系统疾病症状和良性、恶性及性质不明的肿瘤这4个系统的信号最多。汇总4种PAPR抑制剂共有的前7种信号分别为糖类抗原125升高、血小板计数下降、卵巢癌复发、恶心、肿瘤标志物升高、恶性肿瘤进展和贫血症,其中尼拉帕利和奥拉帕利相关血小板计数下降和恶心信号的时间强度曲线均不稳定。结论:临床使用PARP抑制剂应重点关注血液学检验指标异常和胃肠系统不良反应,尤其对于低体重或基线血小板计数下降的患者,应加强尼拉帕利的药学监护。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂在乳腺癌治疗中的临床研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂作为靶向DNA损伤的新型抗肿瘤药物,通过抑制PARP活性以及参与PARP1-DNA捕获两大机制,并凭借与乳腺癌易感基因(BRCA)突变在DNA损伤修复途径中的合成致死作用,为携带BRCA突变的乳腺癌患者提供了临床治疗的新方向.近年来,研究者们试图扩大PARP抑制剂的适用范围,并尝试使用联合治疗方案抑制药物耐药,陆续开展了多个临床试验,获得了阶段性的研究成果.本文综述了PARP抑制剂在乳腺癌治疗中的临床研究进展以及亟待解决的问题.

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶及其抑制剂与炎症治疗的研究进展

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是近年发现的治疗炎性疾病的一个新靶点,其过度活化能在基因水平调节炎症相关因子,如核因子-κB、诱导型一氧化氮合酶、激活蛋白-1、热休克蛋白1等的表达,从而导致细胞变性坏死,引起炎症反应。因此PARP被认为是炎性疾病发病的诱因之一,抑制PARP的活性将为治疗炎性疾病带来新的希望。本文就PARP的蛋白结构和功能及其在炎症中的作用机制,以及PARP抑制剂在炎性疾病治疗中的应用研究作一综述。

多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶抑制剂对顺铂在肺癌治疗中增敏的作用研究

目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP-1)抑制剂4-氨基-1,8-萘二胺(4-AN)对顺铂在肺腺癌治疗中的增敏作用及相关机制。方法应用MTT法和克隆形成试验检测4-AN与顺铂联合作用对A549细胞的细胞毒性作用;应用单细胞凝胶电泳和微核试验检测4-AN与顺铂联合作用对A549细胞的遗传毒性作用。结果 4-AN可以增加顺铂对A549细胞的杀伤作用,且杀伤作用随4-AN浓度增加而增强;4-AN可以增加顺铂导致的DNA单双链断裂和染色体损伤,而且随药物浓度的增加,损伤作用增强。结论抑制PARP-1可以有效的增加A549对顺铂的敏感性,其作用机制可能是通过抑制A549细胞DNA单双链损伤修复,继而引起染色体损伤,导致细胞的生长和克隆受到抑制。

微小RNA-103a-3p通过肿瘤蛋白53调控凋亡抑制剂1/P53对骨质疏松症的影响

目的探讨微小RNA(miR)-103a-3p调控细胞肿瘤蛋白53调控凋亡抑制剂1(TRIAP1)对成骨细胞分化以及去卵巢小鼠骨量的影响。方法MC3T3-E1细胞分为正常对照(NC)组、miR-103a-3p-NC组、miR-103a-3p模拟(mimc)组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1-NC组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1 mimic组。Real-time PCR检测细胞miR-103a-3p、TRIAP1、P53的mRNA表达,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡,免疫荧光染色和茜红素染色检测细胞骨架F-actin表达和矿化情况,ELISA检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性。24只雌性小鼠设为sham组、骨质疏松症(OP)组、miR-103a-3p antagonist-NC组和miR-103a-3p antagonist组,每组6只摘取双侧卵巢制备OP模型,sham组仅分离卵巢组织周围脂肪。测定骨组织miR-103a-3p、TRIAP1、P53、ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达,microCT测定骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC),HE染色观察骨组织病理改变。结果细胞转染miR-103a-3p mimic后,miR-103a-3p及P53表达升高、TRIAP1表达降低,细胞增殖降低、凋亡增加,F-actin表达减弱,钙结节数量减少,ALP活性降低(P<0.01);而在增加转染TRIAP1 mimic后,以上miR-103a-3p mimics导致的结果均得到显著逆转(P<0.01)。OP组小鼠骨组织miR-103a-3p、P53表达升高,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达降低,BMD、BMC降低,骨组织结构破坏(P<0.05);miR-103a-3p antagonist组小鼠骨组织miR-103a-3p及P53表达降低,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达升高,BMD、BMC升高,骨组织结构改善(P<0.05)。结论MiR-103a-3p可介导TRIAP1/P53抑制成骨细胞增殖及矿化,而miR-103a-3p拮抗治疗可减少OP小鼠骨量丢失。