抗肿瘤转移多聚β肽聚乙二醇化的研究

目的:研究抗肿瘤转移多聚β肽的聚乙二醇(PEG)化的方法及其作用。方法:采用甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEGALD5000)修饰多聚β肽;采用电泳和成像分析系统检测修饰率。以粘附实验检测生物活性。结果:(1)二聚β肽(β2)的修饰率为66.7%,三聚β肽(β3)为52.7%。(2)最佳反应条件为:pH值为5,多聚β肽和mPEGALD5000的摩尔之比为1∶10,反应温度为4℃,反应时间为24h。(3)修饰后产物在4℃下可稳定放置50d。(4)修饰后产物水溶解度增加。(5)β2,β2-PEG,β3和β3-PEG对SMMC-7721和HCCLM6细胞与纤连蛋白(FN)粘附均具有显著的抑制作用(P<0.01),而且PEG修饰后作用显著增强(P<0.05或P<0.01)。结论:采用mPEGALD5000能有效地将多聚β肽PEG化。多聚β肽和PEG修饰物对肿瘤细胞与FN的粘附具有特异的抑制作用,且PEG修饰后作用增强。

冠心病患者血浆正五聚蛋白-3、血清超敏C-反应蛋白与血脂的相关性

目的:通过分别检测冠心病患者及正常人的血浆正五聚蛋白-3(PTX3)、血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及各项血脂水平,探讨血浆PTX3水平在各组间的差异以及血浆PTX3、血清hs-CRP与血脂的相关性。方法:入选经冠脉造影正常的40例患者为对照组;冠脉造影确诊为冠心病的60例,分为稳定型心绞痛(SAP)组,20例;不稳定型心绞痛(UAP)组,20例;急性心肌梗塞(AMI)组,20例。分别检测各组入院第2d的血浆PTX3、血清h-CRP及各项血脂水平。血浆PTX3和血清hs-CRP水平取对数后均服从正态分布。对所得数据进行单因素方差分析、两变量相关分析及多元线性回归分析。结果:UAP组和AMI组患者的血浆PTX3对数水平显著高于SAP组和对照组的(P均<0.05);SAP组与对照组之间差异无显著性(P>0.05);UAP组和AMI组之间差异有显著性(P<0.05)。患者血浆PTX3对数水平与低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平存在正相关(r=0.641,P<0.05),与总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)无线性相关(P均>0.05);而血清hs-CRP对数水平与TG、TC、LDL-C呈正相关,且与HDL-C呈负相关(r值分别为0.325、0.228、0.625、-0.312,P均<0.05)。患者血浆PTX3对数水平与血清hs-CRP对数水平呈正相关(r=0.729,P>0.05)。多元线性回归分析显示血浆PTX-3和LDL-C的相关性优于血清hs-CRP和LDL-C的(β=0.492,P=0.001:β=0.382,P=0.03)。结论:血浆PTX3水平与血清hs-CRP水平呈正相关,PTX3是心血管疾病的独立危险因素,其与LDL-C的相关性优于hs-CRP。

骨髓间充质干细胞体外诱导成软骨细胞的动态观察

背景:骨髓间充质干细胞向软骨细胞定向诱导时间报道不一,对诱导中细胞动态变化进行观察比较的研究较少。目的:观察兔骨髓间充质干细胞诱导8,11,14,17,20 d向成软骨细胞定向分化的动态变化情况以及诱导成熟时间。方法:穿刺新西兰大白兔股骨穿刺抽取骨髓,密度梯度离心法分离、培养骨髓间充质干细胞。传至第3代后予以含转化生长因子β1等成分的无血清诱导液定向向软骨细胞诱导。根据不同的诱导时间分成为5组:8 d组、11 d组、14 d组、17 d组及20 d组。通过观察各组细胞形态、甲苯胺蓝染色结果、Ⅱ型胶原免疫组化结果、培养液内多聚蛋白聚糖含量,比较各实验组定向诱导为成软骨细胞的情况。结果与结论:诱导8 d时细胞形态有较明显改变,14 d时具有明显的软骨细胞形态。诱导培养液在诱导4 d时即可检出少量多聚蛋白聚糖,在8 d时浓度出现明显升高,并保持缓慢升高至20 d。在14 d时,诱导的细胞爬片甲苯胺蓝染色可见异染颗粒;Ⅱ型胶原免疫组化明显阳性表现。提示单层高密度接种的骨髓间充质干细胞,在转化生长因子β1等因子作用下能定向诱导为软骨细胞,诱导早期即可能有少量细胞向成软骨细胞分化,8 d时初步具有软骨细胞的形态、功能特征,14 d时成为较成熟的软骨细胞;诱导过程中细胞保持较高的生物活性。

人表皮聚角蛋白微丝蛋白的提取及其在类风湿关节炎诊断中的应用

目的 建立从人表皮提取聚角蛋白微丝蛋白 (filaggrin)抗原的方法 ,检测抗filaggrin抗体 (AFA)在类风湿关节炎 (RA)中的分布 ,探讨AFA对早期RA诊断的价值。方法 从人表皮细胞中提取并部分纯化filaggrin抗原 ,经SDS PAGE后用免疫印迹法检测 (Westernblot) 10 3例类风湿关节炎 (RA)血清和 140例对照血清 ,包括系统性红斑狼疮 (SLE)、干燥综合征 (SS)、骨关节炎 (OA)等。结果 本研究方法提取的filaggrin能作为AFA免疫印迹检测的抗原。 10 3例RA病人中AFA敏感性和特异性分别为 35 9%、93 7% ,与疾病对照组和正常对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 从人表皮提取和部分纯化filaggrin抗原 ,能满足免疫印迹检测的要求。用免疫印迹法检测RA患者的AFA抗体 ,对RA有较好的敏感性和特异性 ,可临床用于RA的诊断。由于基因的变异性 ,不同个体的filaggrin表达强弱不同。

慢性肝功能衰竭合并细菌感染患者血清PTX3、HBP水平及其预测患者预后的临床价值

【目的】探讨慢性肝功能衰竭(CLF)合并细菌感染患者血清五聚蛋白3(PTX3)、肝素结合蛋白(HBP)水平及其预测患者预后的临床价值。【方法】选取2018年3月至2020年3月西安医学高等专科学校附属医院收治的138例CLF患者,根据是否合并细菌感染将其分为观察组(合并细菌感染,n=58)和对照组(未合并细菌感染,n=80)。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清PTX3、HBP水平,分析血清PTX3、HBP表达水平与临床病理特征的关系,比较不同预后情况患者血清PTX3、HBP水平;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清PTX3、HBP水平对患者预后不良的诊断价值。【结果】观察组患者血清PTX3、HBP水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同血清PTX3、HBP水平的患者年龄、性别、糖尿病比较,差异无统计学意义(P>0.05);临床分期、MELD评分及并发症发生情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组患者血清PTX3、HBP水平均高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清PTX3预测患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.876,敏感度为92.1%,特异性为80.0%;血清HBP预测患者预后不良的AUC为0.893,敏感度为71.1%,特异性为95.0%;二者联合预测的AUC为0.959,敏感度为84.2%,特异性为95.0%。【结论】CLF合并细菌感染患者血清PTX3、HBP呈高表达,PTX3、HBP高表达与患者预后不良有关,是预测患者预后情况的潜在生物学指标。

PTX3在继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症中的表达及临床意义分析

目的探讨血浆PTX3在继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(sHLH)的表达水平及其临床意义。方法回顾性分析2017年1月至2019年7月南京医科大学第一附属医院48例sHLH患者外周血浆标本,以18名健康体检者、9例淋巴瘤患者为对照,ELISA法检测血浆PTX3水平。收集患者相关实验室检查数据,并根据血浆PTX3的表达水平进行诊断及预后分析等。结果初诊sHLH组血浆PTX3表达水平明显高于健康对照组[16.29(1.17~66.00)比0.76(0.01~7.86)μg/L,P<0.01];初诊淋巴瘤相关HLH组(LHLH)血浆PTX3水平明显高于感染相关HLH组(IHLH)[24.29(3.36~66.00)比9.56(1.17~36.50)μg/L,P<0.05]。48例sHLH患者血浆PTX3水平与血清铁蛋白正相关(P<0.05)。血浆PTX3以3.9 μg/L为最佳临界值时,其判断sHLH患者及健康对照组的敏感度及特异度分别为86.7%及94.4%;血浆PTX3以17.5 μg/L为最佳临界值时,其判断LHLH组与non-LHLH组的敏感度及特异度分别为63.0%及76.2%。对初诊sHLH组进行预后分析,多因素分析显示PTX3≥17.5 μg/L组1年总生存率(18.5%)与PTX3<17.5 μg/L组(75.8%)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆PTX3在sHLH患者的诊断、LHLH鉴别诊断、预后分析等方面具有重要的临床意义。