聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸

目的 :评价聚合酶链反应 -酶联免疫吸附试验 (PCR- EL ISA)测定乙型肝炎病毒 DNA(HBV DNA)的临床应用价值。方法 :采用定量 PCR- EL ISA法和 EL ISA法分别检测 2 0 8例乙型肝炎患者血清的 HBV DNA和 HBV血清标志物(HBVm ) ,3 4份健康体检者作为阴性对照。结果 :血清 HBV DNA含量 >4× 10 6 拷贝 /ml分别是抗 HBc Ig M组、HBe Ag组、抗 HBc组、抗 HBe组和三抗体组 (抗 HBs、抗 HBBe、抗 HBc) ,其 HBV DNA阳性率分别为 10 0 % ,97.75 % ,62 .3 0 % ,41.67% ,16.0 0 %。结论 :PCR- EL ISA法定量检测 HBV DNA具有较强的特异性和灵敏度 ,为临床早期诊断 ,了解乙型肝炎病毒复制情况 。

质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法检测沙眼衣原体

目的:建立高度灵敏特异的质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法(Gap-LCR-ELISA)检测沙眼衣原体(Chlamy-diatrachomatisCT)。方法:根据CT共有隐蔽性质粒设计并标记4条寡核苷酸探针,对6型CT标准株和鹦鹉热衣原体及其他常见泌尿生殖道病原菌行Gap-LCR-ELISA。结果:质粒Gap-LCR-ELISA可检测出6型CT,并与其他病原体无交叉反应,其最低检测限为2.5个原体(elementarybodiesEB)比PCR敏感10倍。结论:质粒Gap-LCR-ELISA对检测CT感染具有极高的灵敏度和特异度,适宜于我国进行大规模CT流行病学调查。

缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法检测孕妇沙眼衣原体感染

目的:用缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附(Gap-LCR-ELISA)法检测重庆地区孕妇沙眼衣原体感染,以了解围生期沙眼衣原体(CT)的感染现状。方法:以512名孕妇首段尿(FVU)及配对宫颈刮片为研究对象,按照扩大金标准,采用质粒探针和外膜蛋白探针Gap-LCR-ELISA法用于不同类型临床标本检测CT感染。结果:①孕妇的CT感染呈很强的隐匿性,由扩大金标准所确证的CT真阳性共42例,所检重庆地区孕妇的CT感染率为8.2%(42/512),其中88.1%(37/42)可同时从尿道和生殖道检出CT,而另9.5%(4/42)和2.4%(1/42)仅能单独分别从生殖道或尿道检出。②Gap-LCR-ELISA用质粒与外膜蛋白作为探针检测FVU中CT的敏感性分别为90.48%和71.43%(P<0.05),质粒Gap-LCR-ELISA用于宫颈刮片和FVU两种标本的敏感性分别为97.62%和90.48%(P>0.05),特异性均为100%。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法用于孕妇FVU以检测围生期无症状CT感染患者,是一种非侵袭性的、高度敏感特异的、适合于发展中国家和地区进行大规模流行病学调查的方法。

酶联免疫吸附试验和聚合酶链反应检测生殖器标本中的单纯疱疹病毒

目的 评价酶联免疫吸附试验 (ELISA)诊断生殖器疱疹的临床应用价值。方法 对 12 0例具有生殖器皮肤、粘膜损害的病人 ,采用ELISA和分型聚合酶链反应 (PCR)检测其生殖器标本中的单纯疱疹病毒 (HSV) ,两种试验结果不符合者采用第二种PCR检测。结果 12 0例受检者中 ,ELISA检出 4 9例HSV阳性 ,分型PCR检出 5 0例阳性。单纯HSV 1感染者占生殖器疱疹的 10 0 % ,单纯HSV 2感染者占 80 0 % ,HSV 1和HSV 2混合感染者占 10 0 %。在 12 0例标本中 ,10 7例两种试验结果是符合的 ,13例结果不符合。与“扩大金标准”比较 ,ELISA的敏感性、特异性、阳性预期值分别为 92 0 %、95 7%、93 8% ,分型PCR的敏感性、特异性、阳性预期值分别为 94 0 %、95 7%、94 0 %。结论 ELISA法检测HSV感染 ,其敏感性和特异性高 ,方便、快速 ,尤其适合大批量样本的检测 ,值得在临床应用。

聚合酶链反应与血清酶联免疫吸附试验在生殖器疱疹中的应用对比分析

目的对比分析聚合酶链反应和血清酶联免疫吸附试验在生殖器疱疹的临床诊断中的应用价值。方法选择2015年3月至2017年4月在本医院就诊治疗的70例疑似生殖器疱疹患者为观察对象,对全部患者同时进行聚合酶链反应检测和血清酶联免疫吸附试验检测,观察并分析两种检测方法的结果。结果聚合酶链反应检测阳性率(42.86%)和采取血清酶联免疫吸附试验检测阳性率(41.43%)比较,无显著统计学意义(P> 0.05)。结论在生殖器疱疹患者的临床诊断中采取聚合酶链反应和血清酶联免疫吸附试验均可获得良好效果,但聚合酶链反应存在一定的假阳性结果,需要按照患者实际状况合理选取检测方法。

酶联免疫吸附试验检测人类巨细胞病毒抗体在肝移植患者术后诊断及监测中的应用

目的客观评价传统的酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人巨细胞病毒（HCMV）抗体对肝移植患者术后诊断和监测HCMV感染的意义。方法对108例肝移植术后患者分别用ELISA检测HCMV特异性抗体IgM、用免疫组化法检测HCMV低基质磷酸化蛋白（pp65）抗原血症、用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HCMV DNA，将这3种方法的检测结果进行比较。结果108例患者中，IgM阳性者8例，pp65抗原阳性者10例，DNA阳性者12例。ELISA的敏感性较其他2种方法略低，但3种方法的特异性和阴性预测值之间差异无显著性。此外，ELISA检测HCMV IgM阳性者，其结果均在临床症状出现后6～14d检出，而pp65阳性者和HCMV DNA阳性者均在临床症状出现前被检出。结论应用ELISA检测HCMV抗体可以用于诊断监测HCMV感染情况，但有一定的局限性。

酶联免疫吸附试验和直接免疫荧光检测沙眼衣原体的方法学比较

目的:评价酶联免疫吸附试验(ELISA)和直接免疫荧光(DFA)法检测沙眼衣原体(CT)的灵敏度和特异性。方法:分别采用CT抗原DFA和ELISA法检测泌尿生殖道CT,两法结果不一致时采用荧光定量PCR确证。以DFA和ELISA法均阳性或经PCR确证阳性的结果作为真阳性,分别计算DFA和ELISA法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果:共检测222份女性宫颈拭子和69份男性尿道拭子,真阳性66例,真阴性225例,其中DFA和ELISA检测结果均阳性63例,另10例两法结果不符的样本经PCR检测阳性3例。ELISA法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为97.0%、98.7%、95.5%和99.1%,而DFA分别为98.5%,98.2%,94.2%,99.5%。两种方法检测结果符合率为96.6%。结论:ELISA和DFA法检测CT有较高的灵敏度和特异性,均可为临床治疗和性病监测工作提供可靠依据。

酶联免疫吸附测定法检测ζ珠蛋白链在广西东南亚缺失型α-地中海贫血筛查中的应用价值

目的评价并比较酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ζ珠蛋白链与聚合酶链反应(PCR)方法在诊断广西东南亚缺失型α-地中海贫血中的临床诊断价值。方法收集广西壮族自治区人民医院门诊部和产科住院病例210份血样标本(其中115例为正常对照;95例均有MCV<80fl、MCH<27pg,Hb在25～128g/L之间),采用ELISA法和聚合酶链反应(PCR)方法进行检测,最后对ELISA法筛查--SEA携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值、阳性预测值与聚合酶链反应(PCR)方法进行分析并比较其诊断--SEA携带者的临床应用价值。结果ELISA法诊断--SEA携带者总的敏感度、特异度、准确度、阴性预测值和阳性预测值分别是96.2%、98.3%、97.6%和98.3%、96.2%,而聚合酶链反应(PCR)法检测的相应指标均为100.0%(P>0.01),两者无显著性差异。ELISA法不但对--SEA携带者有很高的检出率,而且还能检出个别-α/αα的病例,但其不能筛查出β-地中海贫血,对脐带血的检出率低(仅为65.0%)。结论ELISA法能非常有效地检出--SEA携带者,加之该法简便快速、技术要求不高且经济实用,故很适用于常规实验室和大样本的人群筛查。

PCR结合酶联免疫吸附试验用于肺炎支原体感染检验价值评价

目的研究分析聚合酶链反应(PCR)结合酶联免疫吸附试验(ELISA)用于肺炎支原体(MP)感染检验的价值。方法本次研究行回顾性调查法,采集126份MP标本,分别采用PCR和ELISA对每个标本的MP进行检测,对比记录各组标本的检出阳性率,分析两种方法结合使用进行检验的效果。结果对于MP的检验,ELISA与PCR的阳性检出率分别82.5%、81.0%,阴性检出率分别为17.5%、19.0%,两组对比差异无统计学意义(P>0.05);两组结合使用的阴、阳性检出率分别为25.6%,99.3%。结论对于MP检测而言,PCR与ELISA对其的敏感性与特异性均较理想,两者联合可提高阳性检出率,有利于支原体肺炎疾病的早期诊断与治疗。

质粒缺口-连接酶链反应-ELISA法检测重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体感染及基因分型

目的:用质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法研究重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体(CT)感染的现状及流行的主要基因型别,为其疫苗的研制提供分子流行病学依据。方法:以512例孕妇的首段尿(FVU)及其配对新生儿的鼻咽拭子为标本,用质粒Gap-LCR-ELISA法检测CT感染者,对阳性母、婴配对标本DNA行omp1-VS4-PCR扩增,产物行双链DNA直接测序并作基因分型。结果:所检重庆地区孕妇CT感染率为7.42%,母婴垂直传播率为15.79%,以阴道分娩为主要传播途径。6对阳性母婴配对标本的CT基因序列一致,其中5对为E型,1对为H型,再次证实了CT的垂直传播途径。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法可用于围生期无症状CT感染孕妇的大规模流行病学调查。重庆地区围生期CT流行型别仍以E型为主。

实时荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒DNA的检验效果

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶联免疫吸附法(ELISA)法对HBV-DNA开展检测操作;其余500名纳入观察组,运用实时荧光定量PCR法对HBV-DNA开展检测操作,比较两组HBV标志物[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝炎e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检出率,分析不同阳性组合分布情况。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均明显高于对照组(HBsAg:1.40%比0.20%,HBsAb:1.80%比0.40%,HBeAg:1.80%比0.20%,HBeAb:1.20%比0.00%,HBcAb:1.40%比0.00%,均P<0.05)。观察组的大三阳(HBsAg、HbeAg、HbcAb均阳性)、小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb均阳性)检出率均明显高于对照组(大三阳:1.60%比0.20%,小三阳1.40%比0.20,均P<0.05)。对照组和观察组HBsAg及HBcAb均阳性、HBsAg及HBeAg均阳性、五项均阳性的检出率比较差异均无统计学意义(HBsAg及HBcAb均阳性:0.20%比0.20%,HBsAg及HBeAg均阳性:0.00%比0.20%,五项均阳性:0.20%比0.40%,均P>0.05)。结论应用实时荧光定量PCR法开展对HBV-DNA的检测效果较为突出,有较高的准确度,与ELISA相比应用价值理想。

聚合酶链反应检测HBV-DNA与HBsAg带现象的实验研究

目前检测HBV5项指标的方法,较普遍地使用酶联免疫一步法,虽然大大地缩短了检测时间,但可能导致高滴度的阳性标本漏检,出现假阴性结果.“抗原与抗体需在一定的比例时才出现可见反应,不适合的比例即不出现反应,属抑制带”.作者检测HBV5项指标,同时用聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA,以期阐明带现象及其临床意义.

评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验方法在麻疹监测中的价值

目的评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应（real-time RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法在麻疹病毒感染病例中的诊断价值。方法分析2014年天津市麻疹监测信息报告管理系统报告数据,运用χ~2检验（Chi-square Test）、配对Mc Nemar检验和效度分析,比较2种方法的判定价值。结果 171例麻疹疑似病例同时采集了血清和干血片标本,ELISA法检测两种标本IgM抗体阳性率分别为53.22%和49.71%,差异无统计学意义（χ~2=3.60,P=0.06）,两种标本ELISA法检测一致率为94.15%。2 512例麻疹确诊病例中,2 439例采集了血标本,ELISA法检测IgM抗体阳性率为76.38%;871例采集了咽拭子,real-time RT-PCR检测核酸阳性率为86.68%。咽拭子采样间隔在3天内的real-time RT-PCR核酸阳性率达到91.14%,3天后的阳性率只有66.26%（χ~2=72.46,P〈0.01）。血标本采样间隔在3天内的ELISA IgM抗体阳性率为71.47%,3天后达到94.14%（χ~2=118.06,P〈0.01）。检验效度分析,ELISA方法灵敏度为71.60%,特异度为85.29%,约登指数为0.57。real-time RT-PCR方法灵敏度为99.60%,特异度为67.65%,约登指数为0.67。结论 real-time RT-PCR方法更敏感,适合发病早期诊断,ELISA方法更适合发病中后期诊断。

实时荧光定量聚合酶链反应在丙型肝炎诊断中的临床应用价值

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)荧光定量检测在丙型肝炎诊断中的临床应用价值。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测358例血清中HCV RNA载量及抗-HCV。结果 358例慢性丙型肝炎患者抗-HCV和HCV RNA检出率分别为78.8%和54.2%,经χ2检验差异有统计学意义(P<0.05),HCV RNA的平均载量为4.85×105 copies/mL。结论FQ-PCR检测血清中HCV RNA的载量,是判定HCV感染的直接证据,它反映HCV的活动性和复制程度,有利于抗病毒治疗的疗效观察。抗-HCV和HCV RNA联合检测对丙型肝炎病毒的早期诊断有重要临床应用价值。