冠状动脉CT成像联合血清多聚ADP核糖聚合酶1及硫氧还蛋白相互作用蛋白对冠心病的诊断价值

目的分析冠状动脉CT成像联合血清多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对冠心病的诊断价值。方法选取2020年1月至2022年1月芜湖市第二人民医院确诊的冠心病患者103例为冠心病组,选取同期体检人群41例作为对照组。通过酶联免疫吸附测定法检测两组血清PARP1、TXNIP水平,分析冠状动脉CT成像、血清PARP1、血清TXNIP以及联合检测对冠心病的诊断价值。结果与对照组相比,冠心病组冠状动脉CT成像检测冠心病的阳性比例高,差异有统计学意义(χ^(2)=75.246,P<0.01)。冠心病组患者血清PARP1水平、TXNIP水平相比对照组较高,差异有统计学意义(t=22.938、14.190,P<0.01)。冠状动脉CT成像、血清PARP1、TXNIP水平以及三者联合检测诊断冠心病的曲线下面积为0.873、0.871、0.849、0.933。冠状动脉CT成像、PARP1、TXNIP以及联合检测与临床诊断的具有一致性(Kappa=0.720、0.720、0.568、0.669,P<0.01)。结论冠状动脉CT成像与血清PARP1、TXNIP水平三者联合对冠心病具有较高的诊断价值。

三结构域蛋白8、Ras相关蛋白35、多聚ADP核糖聚合酶1在子宫内膜癌组织中的表达及检测临床意义

目的:探讨三结构域蛋白8(TRIM8)、Ras相关蛋白35(Rab35)、多聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)在子宫内膜癌(EC)组织中的表达及检测临床意义。方法:选择75例EC患者为研究对象,取手术切除的EC组织及癌旁正常子宫内膜组织,以免疫组织化学法检测EC组织和癌旁组织中TRIM8、Rab35、PARP-1蛋白表达情况,并结合患者临床病理因素分析其与临床病理特征的关系,随访5年,记录EC患者生存率,并分析EC患者预后影响因素。结果:Rab35、PARP-1蛋白在EC组织和癌旁组织中阳性表达率分别为71.00%和35.00%、74.00%和43.00%,TRIM8蛋白阳性表达率分别为30.00%和69.00%(均P<0.01)。EC组织中Rab35与PARP-1为正相关性,Rab35和PARP-1与TRIM8表达为负相关性(r=0.542、-0.461、-0.461,均P<0.05)。Rab35阳性患者5年生存率55.17%低于阴性患者70.57%,PARP-1阳性患者5年生存率65.96%低于阴性患者79.24%,TRIM8阳性患者5年生存率93.33%高于阴性患者72.73%(均P<0.05)。FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、肌层浸润深度≥1/2和PARP-1、TRIM8、Rab35表达异常为影响EC患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论:子宫内膜癌组织PARP-1、Rab35表达升高、TRIM8表达降低,三者表达变化与子宫内膜癌的发生、发展有显著相关性。

染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化

目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。

多聚ADP核糖聚合酶1在口腔鳞状细胞癌精准诊疗中的作用机制及转化价值

缺少有效分子靶点是阻碍口腔鳞状细胞癌(OSCC)精准诊疗进步的关键因素。多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)具有执行DNA损伤反应、处理氧化应激压力、抑制细胞程序性死亡等功能,是癌细胞应对生存压力的重要工具,也是适用于多种癌症治疗的分子靶点。研究显示,PARP1在OSCC诊疗中具有强大的潜力:一方面PARP1分子显像技术可用于OSCC的在体诊断,另一方面PARP抑制剂与放化疗联合应用在OSCC临床前测试中取得了良好的疗效。本文总结了PARP1在癌症治疗中的作用机制,重点阐述了PARP1应用于OSCC精准诊疗的研究进展,以促进PARP1靶点在OSCC中的临床应用转化。

拟南芥多聚ADP核糖水解酶在ATM和ATR依赖的DNA损伤信号途径中的作用分析

DNA损伤响应是生物体感知DNA断裂并启动DNA修复过程的重要机制,对维护遗传物质的稳定性具有重要的意义.DNA损伤响应机制中有多种蛋白的参与.多聚ADP核糖水解酶(PARG)是参与蛋白质多聚ADP核糖化(poly(ADP-ribosyl)ation)修饰调控过程的一种重要酶,它通过水解去除蛋白质上的多聚ADP核糖来调节靶蛋白质的生理生化活性.目前已知多聚ADP核糖修饰相关蛋白可能通过修饰DNA修复相关蛋白参与DNA损伤反应,但其影响的信号途径和上下游关系并不清楚.本研究通过双突变体构建、遗传以及表达谱分析,揭示了PARG1可能在DNA损伤响应途径关键激酶ATM和ATR的上游,通过调节ATM和ATR的活性来反馈调节DNA损伤信号途径.

PARP-1基因沉默的子宫内膜癌细胞Ishikawa放射敏感性观察

目的观察PARP-1基因沉默的子宫内膜癌细胞Ishikawa的放射敏感性。方法子宫内膜癌Ishikawa细胞分为Ishikawa/scramble组(细胞转染scramble-shRNA)、Ishikawa/sh PARP-1组(细胞转染PARP-1-shRNA)。采用CCK-8实验测算两组0、2、4、6、8 Gy照射剂量下的细胞增殖率。采用平板克隆形成实验并利用Graphpad prism5.0软件,根据单击多靶模型拟合细胞存活曲线,计算两组放射生物学相关参数(K、N、D0、Dq、SF2)。结果 2、4、6、8 Gy射线照射后,Ishikawa/sh PARP-1组细胞增殖率较Ishikawa/scramble组低(P均<0.05)。Ishikawa/sh PARP-1组放射生物学参数K为0.863、N为3.987、D0为1.158、Dq为0.837、SF2为0.50,Ishikawa/scramble组分别为0.605、3.534、1.653、1.309、0.73;Ishikawa/scramble组与Ishikawa/sh PARP-1组的放射增敏比为1.43(D0值比)和1.56(Dq值比)。结论 PARP-1基因沉默的人子宫内膜癌细胞Ishikawa的放射敏感性增强。

奥曲肽对胃癌AGS细胞多聚ADP核糖聚合酶1、细胞增殖核抗原蛋白表达的影响

目的 观察奥曲肽对胃癌AGS细胞多聚ADP核糖聚合酶1（PARP-1）、细胞增殖核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1 （Cyclin D1）表达的影响及其作用.方法 利用不同浓度的奥曲肽（0、0.001、0.010、0.100、1.000、10.000 mg/L）作用于胃癌AGS细胞,采用Western blot方法分析PARP-1、PCNA和Cyclin Dl蛋白相对表达变化,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测胃癌AGS细胞增殖抑制,流式细胞术检测胃癌AGS细胞凋亡和细胞周期变化.结果 随奥曲肽浓度的增加,胃癌AGS细胞中PARP-1蛋白的表达逐渐增强（0.08、0.09、0.12、0.16、0.21、0.22）,PCNA蛋白的表达逐渐减弱（0.05、0.04、0.02、0.01、0.01、0.0l）,Cyclin D1蛋白表达无显著变化（0.44、0.40、0.39、0.40、0.43、0.40,P＞0.05）,PARP-1和PCNA蛋白表达呈负相关（P＜0.05）.奥曲肽在0～0.100 mg/L浓度范围内,对胃癌AGS细胞增殖抑制逐渐增强,高于0.100 mg/L浓度后,抑制作用逐渐减弱.各浓度奥曲肽作用下,胃癌AGS细胞凋亡和各周期细胞比例未见显著变化（P＞0.05）.结论 奥曲肽浓度可对胃癌AGS细胞增殖产生双向影响作用,其机制可能与PARP-1蛋白表达增强和PCNA蛋白表达抑制有关.

PARP-1、Caspase-3在子宫内膜癌组织中的表达变化及意义

目的探讨多聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)在子宫内膜癌组织中的表达变化及其临床意义。方法收集子宫内膜癌组织60例份、正常子宫内膜组织20例份、子宫内膜增生组织20例份,采用免疫组化法检测各组织PARP-1、Caspase-3蛋白表达,分析子宫内膜癌组织PARP-1、Caspase-3表达与患者临床病理参数的关系及二者的相关性。结果子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织及子宫内膜增生组织PARP-1阳性表达率分别为73.33%、15.00%、45.00%,不同组织间PARP-1阳性表达率比较P<0.05或<0.01。子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织及子宫内膜增生组织Caspase-3阳性表达率分别为41.67%、85.00%、45.00%,正常子宫内膜组织Caspase-3阳性表达率高于子宫内膜癌组织及子宫内膜增生组织(P均<0.01)。子宫内膜癌组织PARP-1阳性表达与患者的临床分期、分化程度、浸润深度均有关(P均<0.05),与淋巴结转移无关(P>0.05)。子宫内膜癌组织Caspase-3阳性表达与患者的临床分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移均无关(P均>0.05)。子宫内膜癌组织PARR-1、Caspase-3阳性表达率呈负相关(r=-0.64,P<0.01)。结论子宫内膜癌组织PARP-1表达升高、Caspase-3表达降低;PARP-1表达升高可能参与子宫内膜癌的发生与发展。

大鼠心肌缺血再灌注早期PARP-1的表达及其抑制剂3-AB对心肌梗死面积的影响

目的探讨1型多聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)在大鼠心肌缺血再灌注损伤早期心肌组织中的蛋白表达,观察其抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对心肌梗死面积的影响。方法将164只大鼠随机分为:(1)手术组:又分7个小组,每组12只大鼠;(2)假手术组:又分7个小组,每组6只大鼠;(3)手术干预组(n=14);(4)手术对照组(n=12);(5)假手术干预组(n=6);(6)假手术对照组(n=6)。手术组:结扎冠状动脉左前降支近端45 min,打开系拌,建立心肌缺血再灌注损伤模型,分别于再灌注15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h、24 h各时间点处死大鼠,检测各时间点心肌组织PARP-1的表达。假手术组:开胸,在冠状动脉左前降支近端穿线但不结扎,分别于与缺血再灌注组相同各时间点(1 h、1 h 15 min、1 h 45 min、2 h 45 min、4 h 45 min、6 h 45 min、24 h 45 min)相同方法检测心肌组织PARP-1的表达。手术干预组:建立缺血再灌注模型,分别于再灌注前15 min及再灌注后45 min给予3-AB(20 mg/kg,静脉注射),于再灌注2 h处死大鼠,然后检测心肌组织PARP-1的表达(n=8),及心肌梗死面积(n=6)。手术对照组:建立缺血再灌注模型,分别于再灌注前15 min及再灌注后45 min给予等体积生理盐水静脉注射,用相同方法检测心肌组织PARP-1的表达(n=6)及心肌梗死面积(n=6)。结果手术组于再灌注不同时间点(15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h、24 h)PARP-1表达灰度值(分别为176±7、180±8、190±9、207±15、198±13、196±9、190±5)与假手术组比较有显著差异(P<0.05)。手术干预组灰度值(171±7)与手术对照组灰度值(205±17)比较有显著差异(P<0.05)。手术干预组梗死面积(20%±2%)与手术对照组(33%±4%)比较有显著差异(P<0.05)。结论心肌缺血再灌注早期心肌组织中PARP-1有明显表达,并呈动态变化,再灌注2 h最明显。3-AB明显抑制PARP-1表达,减小心肌梗死面积。有效抑制心肌缺血再灌注早期PARP-1表达可以减轻再灌注心肌损伤,保护心肌。

MDC1和MMR蛋白在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨DNA损伤检查点蛋白调节子1(MDC1)与错配修复(MMR)蛋白在子宫内膜癌中的表达及其与相关临床特征的关系。方法回顾性分析126例子宫内膜癌患者的临床及病理资料,收集患者手术或刮宫标本进行HE染色和免疫组化染色,检测MDC1、MMR蛋白(MSH6、MSH2、PMS2、MLH1)的表达,并根据MDC1及MMR蛋白免疫组化结果,分析MDC1、MMR蛋白表达及结合两种蛋白不同表达与患者临床特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线图分析MDC1和MMR蛋白联合检测与总生存率的关系。采用Spearman秩相关性分析MDC1与MMR蛋白表达的相关性。结果与MDC1阳性表达患者相比,MDC1阴性表达患者年龄较小,主要为低级别(1~2级)子宫内膜样腺癌(P<0.05);与MMR表达完整(MMR-p)患者相比,MMR表达缺失(MMR-d)患者年龄较小,主要为低级别(1~2级)子宫内膜样腺癌(P<0.05)。MDC1阴性表达/MMR-p、MDC1阳性表达/MMR-p、MDC1阴性表达/MMR-d、MDC1阳性表达/MMR-d各组患者年龄、组织学类型、组织学分级比较,差异具有统计学意义(P<0.05);而临床分期、肌层浸润深度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MDC1、MMR蛋白联合检测与患者的总生存率无关(P>0.05),MDC1阴性表达占所有子宫内膜癌患者的9.5%(12/126),与MMR-d呈正相关(P<0.001)。结论MDC1、MMR蛋白多在低级别子宫内膜癌中失表达,并且MDC1阴性表达与MMR-d具有正相关性,提示MDC1失表达与子宫内膜癌的微卫星不稳定性密切相关。

1型多聚ADP核糖聚合酶激活NF-κB途径调节基质金属蛋白酶活性的机制研究

目的:探讨1型多聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)通过激活NF-κB调节体外培养乳鼠心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9酶活性的机制。方法:使用10μmol/L去甲肾上腺素(NE)刺激体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞24h,利用荧光基团DCF-DA检测心脏成纤维细胞内活性氧(ROS)水平,使用明胶酶谱法检测MMP-2,MMP-9的酶活性水平,凝胶阻滞实验检测NF-κB的DNA结合能力,Western-blot检测PARP-1蛋白表达水平;使用PARP-1抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3AB),α、β受体阻滞剂及抗氧化剂vitC干预后,观察上述指标的变化。结果:NE诱导心脏成纤维细胞内ROS产生增加,PARP-1蛋白表达增加,NF-κB的核转录能力明显增强,MMP-2、MMP-9酶活性明显增加。使用3AB抑制PARP-1活性,或使用抗氧化剂vitC及α、β受体阻滞剂等预先处理后可显著抑制NF-κB的DNA结合能力,进而减少NE诱导的MMP-2,MMP-9酶活性。结论:NE诱导心脏成纤维细胞内ROS产生明显增多,ROS激活PARP-1并促使其蛋白表达显著增高,PARP-1通过增强NF-κB的DNA结合能力调控MMP-2和MMP-9酶活性。

多聚ADP核糖聚合酶-1及其依赖性细胞死亡在神经系统疾病中的研究进展

背景多聚ADP核糖聚合酶-1（poly ADP-ribose polymerase-1，PARP-1）作为-种DNA修复酶，具有维持基因组稳定的生理作用，应激条件下介导细胞程序性死亡，即PARP．1依赖性细胞死亡（PARP-1-dependent cell death，PARthanatos）。目的研究PARP-1及其介导的细胞死亡在脑卒中和神经退行性疾病等神经系统疾病中作用，探讨PARP-1阻断对神经细胞的保护作用。内容持续氧化应激可使PARP-1过度活化，促进凋亡诱导因子（apoptosis induced factor，AIF）转位至细胞核，介导PARthanatos。缺血，再灌注以及谷氨酸兴奋性毒性作用均可产生大量氧自由基，是神经系统疾病主要致病物质。脑卒中和神经退行性疾病中存在持续氧化应激和PARP-1活化，其介导的PARthanatos是神经元死亡的主要方式之一。抑制PARP-1活化具有神经保护作用。趋向PARP-1活化介导脑卒中和神经退行性疾病的发生，阻断PARP-1有望成为治疗该类疾病的新靶点。

PARP2突变恢复parg1突变体对基因毒剂敏感表型的机理研究

蛋白质多聚ADP核糖化是一种翻译后修饰方式,拟南芥中有3个编码多聚ADP核糖化聚合酶的基因(PARP1,PARP2和PARP3)和两个编码多聚ADP核糖水解酶的基因(PARG1和PARG2),其中PARG1突变体parg1-4对基因毒剂极其敏感,为了了解PARP家族成员PARP2基因与parg1突变体表型的关系,本研究将PARP2突变体parp2-3与parg1-4杂交获得了parp2-3 parg1-4双突变体,发现PARP2突变部分恢复了parg1-4对双链断裂基因毒剂zeocin和单链断裂基因毒剂MMS敏感的表型.Western blot结果显示:在zeocin和MMS处理下,parp2-3 parg1-4中的PAR信号强度与parg1-4中的相比大大降低.实时荧光定量PCR结果显示:在zeocin和MMS处理下,parg1-4中响应DNA损伤的基因在胁迫初期被显著诱导,胁迫后期与细胞死亡相关的基因表达量明显高于其他基因型植物,但PARP2突变后,parp2-3 parg1-4中PAR水平和损伤及死亡基因的表达量均降低,从而部分恢复了parg1-4的敏感表型.

多聚ADP核糖聚合酶-1与糖尿病肾病

多聚ADP核糖聚合酶-1（PARP-1）是多聚ADP核糖聚合酶家族中重要的成员之一,在肾组织中广泛表达.近期研究发现,PARP-1与糖尿病肾病的发生、发展关系密切,PARP-1通过加重高糖氧化应激、促进慢性低度炎性反应、抑制组蛋白脱乙酰酶-1活性、增强Toll样受体4活性、上调内皮素及内皮素受体的表达、诱导纤溶系统紊乱等参与糖尿病肾病的病理生理过程.而相关研究也证明PARP-1抑制剂在糖尿病肾病的发病过程中可起到一定的保护作用,故PAPR-1可能成为糖尿病肾病的新治疗靶点.

多聚ADP核糖聚合酶-1与糖尿病血管并发症

多聚ADP核糖聚合酶（PARP）1是PARP核酶家族主要成员,分布广泛,是机体修复DNA损伤的关键酶之一,但其过度激活又会造成细胞的死亡。糖尿病时的氧化应激状态可以造成血管内皮细胞内源性DNA损伤,从而大量激活PARP,进而导致内皮细胞的死亡。这是糖尿病大血管和微血管并发症发生的共同机制。抑制PARP可有效防止内皮细胞的损伤,预防甚至逆转糖尿病血管并发症,对PARP的干预可能成为防治糖尿病血管并发症的一个新靶点。

PARP1通过调节RNF144A抑制乳腺癌细胞凋亡

背景与目的:乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤,但其发病机制尚不清楚。我们前期研究发现环指蛋白144A(ring finger protein 144A,RNF144A)调节多聚ADP核糖聚合酶1[poly(ADP ribose)polymerase 1,PARP1]的稳定性,进而影响乳腺癌细胞对PARP抑制剂olaparib的敏感性。该研究旨在探讨PARP1是否对RNF144A具有调节作用及其对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法:利用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中PARP1的表达水平,并分析PARP1表达水平与乳腺癌患者预后的关系。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测过表达或者敲低PARP1对RNF144A蛋白水平的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测敲低PARP1对RNF144A转录水平的影响。利用AnnexinⅤ-PE/7-AAD双染法流式细胞术检测细胞凋亡。结果:在乳腺癌组织中PARP1表达阳性率为68%,且高表达PARP1的患者预后较差。在敲低或过表达PARP1的HEK-293T和乳腺癌细胞中,RNF144A在mRNA水平无明显变化,但其蛋白水平与PARP1表达呈负相关。Olaparib诱导细胞凋亡时,过表达PARP1细胞凋亡率较低,在过表达PARP1的细胞中重新过表达RNF144A后凋亡率有一定程度的恢复。结论:PARP1在乳腺癌细胞的表达水平与乳腺癌患者的预后相关,可能在乳腺癌的发生、发展中扮演着癌基因的角色。PARP1调节RNF144A的蛋白水平但不影响其mRNA水平。PARP1可能通过负向调节RNF144A抑制乳腺癌细胞凋亡。

细胞外信号调节激酶1/2与Rho激酶作用对脑梗死后神经血管单元的影响

目的研究脑梗死后细胞外信号调节激酶1/2(ERK_(1/2))和Rho激酶(ROCK)两条信号通路通过相互作用激活下游效应分子多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)来调控脑梗死后神经血管单元。方法该实验分为两个部分:35只SD大鼠随机分为假手术组(s)和脑梗死组(M),脑梗死组根据脑梗死后时间不同又分为1h、3h、12h、24h、3d和7d六个亚组,分别采用westem blot检测假手术组及脑梗死组各亚组ERK_(1/2)、ROCK蛋白表达水平。35只SD大鼠随机分为对照组、模型组、U0126组、Fasudil组和U0126+Fasudil组,分别检测神经功能、脑梗死面积以及ROCK、ERK_(1/2)及PARP-1的蛋白表达水平。结果假手术组各个时间点总ERK_(1/2)/2和p-ERK_(1/2)表达相同。脑梗死组总ERK_(1/2)表达不变,p-ERK_(1/2)表达先降低后升高,24h时达最高峰。脑梗死组ROCK的表达随时问的延长逐渐升高,12h表达达高峰,随后表达下降。模型组与对照组相比,p-ERK_(1/2)、ROCK及PARP-1的表达显著提高(P<0.05);与模型组相比,Fasudil组p-ERK_(1/2)的表达下降(P<0.05),而U0126组ROCK表达无变化(p>0.05),Fasudil组、U0126组及Fasudil组+U0126组PARFP-1的表达显著下降(P<0.05),其中以U0126+Fasudil组下降最为显著。结论 ERK_(1/2)和ROCK都参与了脑梗死后脑组织的损伤,ERK_(1/2)可能作为ROCK的下游效应分子,与ROCK共同调节PARP-1的表达进而调控脑梗死后神经血管单元的存亡。

脊髓背角星形胶质细胞内PAPR-1/TNF-α通路参与脊神经结扎模型大鼠神经病理性痛的机制研究

目的观察PAPR-1/TNF-α信号通路在脊神经结扎模型大鼠脊髓背角星形胶质细胞内的表达情况,并探究其与神经病理性痛的发生发展关系。方法将大鼠第5腰神经(L5)进行结扎构建慢性神经病理性痛模型,Von-Frey细丝检测各组大鼠的机械性痛阈值,免疫组织化学染色和Western blot技术半定量和定量分析脊髓背角内PAPR-1和TNF-α的表达情况。结果与正常组相比,假手术组大鼠疼痛阈值未见显著改变(P>0.05),脊神经结扎后大鼠的术侧后足的疼痛阈值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),且在术后2周内,疼痛阈值均保持在较低水平。免疫荧光组织化学染色结果显示,PAPR-1和TNF-α主要表达于脊髓背角内星形胶质细胞中,Western blot结果进一步显示,造模后大鼠脊髓背角内GFAP、PAPR-1及TNF-α水平显著高于正常组和假手术组(P<0.05)。结论 PAPR-1/TNF-α信号通路主要表达于脊髓背角内星形胶质细胞中,且在慢性神经病理性痛的维持阶段保持较高表达水平,可能参与了慢性痛的发生和发展,临床治疗中具有一定的理论参考意义。

Olaparib治疗日RCA1或BRCA2突变复发性晚期乳腺癌有效

一种新型的口服多聚ADP核糖聚合酶olaparib能诱导BRCA缺陷的细胞合成致死。在BRCA缺陷的卵巢癌中也已报道该药的最大耐受剂量以及初始疗效资料。本研究旨在评价olaparib单于BRCA1或BRCA2突变的晚期乳腺癌女性的疗效、安全性及耐受性。

1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶对去甲肾上腺素诱导心肌重构的影响

目的:探讨1型多聚二磷酸腺苷核糖合成酶[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导培养的大鼠心肌细胞重构过程中的调节作用及其机制。方法:①培养乳鼠心肌细胞,10μmol/LNE刺激心肌细胞24h后,使用实时定量PCR法检测c-fos、ANP、β-MHC、α-MHC基因表达水平;观察抗氧化剂维生素C(VitC)和PARP-1抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)对上述基因表达的影响。②检测心肌细胞内活性氧(ROS)水平,及PARP活性和PARP-1表达水平的变化。结果:NE诱导心肌细胞内c-fos、ANP、β-MHC基因表达水平明显增加。心肌细胞内ROS产生增加,PARP激活,PARP-1蛋白表达亦显著增加。使用VitC减少ROS产生,抑制了NE诱导的PARP-1活性及表达的增加,NE诱导的c-fos、ANP基因表达也显著降低。3AB可明显减少NE诱导的c-fos、ANP、β-MHC基因的表达及β-MHC/α-MHC的比值。结论:NE刺激心肌细胞增加了细胞内ROS的产生,大量的ROS激活了PARP并使PARP-1的表达水平显著增加,PARP-1参与调节了心肌重构过程胚胎基因c-fos、ANP、β-MHC、α-MHC的异常表达。PARP-1可能是心肌重构过程中的重要调节机制之一。