人参皂甙Rd预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后多聚ADP核糖聚合物的影响

目的:观察人参皂甙Rd缺血前预给药对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后多聚ADP核糖聚合物含量的影响。方法:60只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,体重280～300 g,随机分为假手术组(Sham组)、丙二醇组(Vehicle组)和人参皂甙Rd处理组(Rd组),每组20只。Vehicle组和Rd组大鼠采用MCAO线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,2 h后拔出栓线达到再灌注目的,建立急性局灶性脑缺血/再灌注模型。Vehicle组和Rd组分别于造模前30 min腹腔注射丙二醇(人参皂甙Rd稀释液)和人参皂甙Rd(10 mg/kg)。Sham组手术操作同前,但线栓未阻塞大脑中动脉。Western Blot和免疫组织化学方法检测大鼠大脑中动脉阻塞4 h后多聚ADP核糖聚合物的含量。结果:与Sham组相比,Vehicle组和Rd组缺血侧脑组织PAR聚合物含量增加(P<0.01);与Vehicle组相比,Rd组缺血侧脑组织PAR聚合物含量明显上调(P<0.01)。结论:10 mg/kg人参皂甙Rd预处理可能通过增加PAR聚合物的含量起到脑缺血损伤早期神经保护作用。

冠状动脉CT成像联合血清多聚ADP核糖聚合酶1及硫氧还蛋白相互作用蛋白对冠心病的诊断价值

目的分析冠状动脉CT成像联合血清多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对冠心病的诊断价值。方法选取2020年1月至2022年1月芜湖市第二人民医院确诊的冠心病患者103例为冠心病组,选取同期体检人群41例作为对照组。通过酶联免疫吸附测定法检测两组血清PARP1、TXNIP水平,分析冠状动脉CT成像、血清PARP1、血清TXNIP以及联合检测对冠心病的诊断价值。结果与对照组相比,冠心病组冠状动脉CT成像检测冠心病的阳性比例高,差异有统计学意义(χ^(2)=75.246,P<0.01)。冠心病组患者血清PARP1水平、TXNIP水平相比对照组较高,差异有统计学意义(t=22.938、14.190,P<0.01)。冠状动脉CT成像、血清PARP1、TXNIP水平以及三者联合检测诊断冠心病的曲线下面积为0.873、0.871、0.849、0.933。冠状动脉CT成像、PARP1、TXNIP以及联合检测与临床诊断的具有一致性(Kappa=0.720、0.720、0.568、0.669,P<0.01)。结论冠状动脉CT成像与血清PARP1、TXNIP水平三者联合对冠心病具有较高的诊断价值。

三结构域蛋白8、Ras相关蛋白35、多聚ADP核糖聚合酶1在子宫内膜癌组织中的表达及检测临床意义

目的:探讨三结构域蛋白8(TRIM8)、Ras相关蛋白35(Rab35)、多聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)在子宫内膜癌(EC)组织中的表达及检测临床意义。方法:选择75例EC患者为研究对象,取手术切除的EC组织及癌旁正常子宫内膜组织,以免疫组织化学法检测EC组织和癌旁组织中TRIM8、Rab35、PARP-1蛋白表达情况,并结合患者临床病理因素分析其与临床病理特征的关系,随访5年,记录EC患者生存率,并分析EC患者预后影响因素。结果:Rab35、PARP-1蛋白在EC组织和癌旁组织中阳性表达率分别为71.00%和35.00%、74.00%和43.00%,TRIM8蛋白阳性表达率分别为30.00%和69.00%(均P<0.01)。EC组织中Rab35与PARP-1为正相关性,Rab35和PARP-1与TRIM8表达为负相关性(r=0.542、-0.461、-0.461,均P<0.05)。Rab35阳性患者5年生存率55.17%低于阴性患者70.57%,PARP-1阳性患者5年生存率65.96%低于阴性患者79.24%,TRIM8阳性患者5年生存率93.33%高于阴性患者72.73%(均P<0.05)。FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、肌层浸润深度≥1/2和PARP-1、TRIM8、Rab35表达异常为影响EC患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论:子宫内膜癌组织PARP-1、Rab35表达升高、TRIM8表达降低,三者表达变化与子宫内膜癌的发生、发展有显著相关性。

1型多聚ADP核糖聚合酶抑制剂对高同型半胱氨酸血症大鼠内皮功能的保护作用

目的:探讨1型多聚ADP核糖聚合酶(PARP1)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠内皮功能的保护作用。方法:SD大鼠30只随机分为3组:模型组、3-AB组和正常对照组,每组10只,分别给予普通饲料加1.7%蛋氨酸、普通饲料加1.7%蛋氨酸同时每天腹腔注射3-AB20mg·kg-1和普通饲料,饲养45d。观察主动脉组织形态结构的改变;测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的水平;检测大鼠胸主动脉环对乙酰胆碱(Ach)与硝普钠(SNP)的反应;检测大鼠胸主动脉PARP1蛋白的表达。结果:大鼠喂以高蛋氨酸饲料45d可诱导Hhcy。与模型组相比3-AB组大鼠NO水平明显升高而ET-1水平明显降低(P<0.01)。病理形态学观察模型组主动脉内膜病变明显,3-AB组病变程度减轻。与正常对照组比较,模型组胸主动脉对Ach引起的最大的内皮依赖性舒张反应(EDR)明显减弱(0.26±0.03vs0.89±0.11,P<0.01);而3-AB组EDR反应较模型组显著改善(0.57±0.12vs0.26±0.03,P<0.01)。模型组较正常对照组大鼠主动脉PARP表达明显升高(P<0.05),3-AB组PARP表达较模型组明显降低(P<0.05)。结论:PARP抑制剂3-AB有效地改善高同型半胱氨酸血症大鼠血管内皮功能,并在一定程度上改善血管早期病理形态学的改变。

多聚ADP核糖聚合酶与帕金森病关系的研究进展

DNA损伤断裂可以激活多聚 ADP核糖聚合酶,引起多种核蛋白发生聚 ADP核糖化。多聚 ADP核糖聚合酶被过度活化后消耗大量 NAD^+和 ATP可以诱导细胞凋亡或坏死。多聚 ADP核糖聚合酶参与了帕金森病的发病机制,多聚ADP核糖聚合酶抑制剂对帕金森病起保护作用。

3-氨基苯甲酰胺对大鼠心肌梗死后心力衰竭心肌细胞细胞因子、多聚ADP核糖聚合酶和凋亡诱导因子蛋白表达的影响

目的:研究多聚ADP核糖聚合酶(PARP)阻滞剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对心力衰竭(HF)大鼠心肌白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及对PARP和凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达的影响。方法:结扎135只成年雄性Wistar大鼠冠状动脉前降支6周制备HF模型,随机分为HF组、3-AB治疗组(3-AB组)和Sham组。治疗组应用3-AB治疗(30 mg/kg)。治疗2、4、6周后采用放射免疫法测定大鼠心肌IL-10、TNF-α水平,采用免疫组化方法检测心肌PARP和AIF蛋白表达变化。结果:IL-10水平变化:与Sham组相比,HF组各时间点明显增高(P<0.05),3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05);TNF-α水平:HF组各时间点均较Sham组明显增高(P<0.05),而3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05)。PARP蛋白表达:HF组各时间点均较Sham组增加(P<0.05),3-AB组各时间点均较HF组明显减少(P<0.05)。AIF蛋白表达:HF组各时间点较Sham组增加,3-AB组各时间点较HF组明显减少(P<0.05)。结论:3-AB可抑制IL-10、TNF-α的释放;抑制PARP和AIF蛋白表达,从而抑制炎症反应和细胞凋亡,对HF大鼠心肌细胞发挥保护作用。

拟南芥多聚ADP核糖聚合酶Ⅰ的原核表达与活性检测

采用RT-PCR技术获得了拟南芥多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]PARP1基因的全长cDNA,转入原核表达载体pET32a并转化宿主菌Origami(DE3),加入终浓度为0.3mmol/L IPTG,在16℃下诱导可获得较多的可溶重组蛋白。纯化TRX-PARP1,在反应液中加入NAD+和断裂DNA,通过SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting分析,TRX-PARP1分子量可随着时间的延长逐渐增大,产生向上的弥散,表明蛋白质连上了ADP核糖分子;与此对比,作为参照的标签蛋白TRX无此现象。实验结果显示原核表达拟南芥PARP1能够催化自身多聚ADP核糖化修饰,为深入研究植物多聚ADP核糖聚合酶的功能奠定了基础。

染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化

目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显著升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显著降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。

多聚ADP-核糖聚合酶抑制剂联合西地那非改善糖尿病大鼠勃起功能的研究

目的探讨多聚AOP-核糖聚合酶抑制剂（PJ_34）联合西地那非对糖尿病大鼠勃起功能的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病＋西地那非组、糖尿病＋PJ-34组、糖尿病＋PJ-34＋西地那非组。测定各组大鼠阿扑吗啡诱导下的性行为变化；电刺激盆神经测定各组大鼠阴茎海绵体内压（ICP）及平均周围动脉压（MAP），然后取海绵体组织测定Caspase-3活性。结果Caspase-3活性在糖尿病大鼠中显著升高，PJ-34治疗可有效抑制其活性。糖尿病＋西地那非组、糖尿病＋PJ-34组性行为能力及ICP／MA均低于正常对照组，PJ-34与西地那非联合应用疗效显著高于单一用药。结论PJ-34联合西地那非可以显著改善糖尿病大鼠的勃起功能，为糖尿病性勃起功能障碍治疗方法的探索提供了新的思路。

多聚ADP核糖聚合酶抑制剂他唑帕利在Ⅱ期临床试验中对乳腺癌基因阳性晚期乳腺癌具有疗效

辉瑞公司宣布其双作用机制的多聚ADP核糖聚合酶（PARP）抑制剂他唑帕利（talazoparib），在乳腺癌1和2号基因阳性的晚期乳腺癌Ⅱ期临床试验中证实有抗肿瘤作用。Ⅱ期二阶段临床ABRAZO试验是多中心、平行同期组研究，21d疗程中每日1次他唑帕利，患者为三阴乳腺癌、激素受体或HER2阳性、

多聚ADP核糖聚合酶1在口腔鳞状细胞癌精准诊疗中的作用机制及转化价值

缺少有效分子靶点是阻碍口腔鳞状细胞癌(OSCC)精准诊疗进步的关键因素。多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)具有执行DNA损伤反应、处理氧化应激压力、抑制细胞程序性死亡等功能,是癌细胞应对生存压力的重要工具,也是适用于多种癌症治疗的分子靶点。研究显示,PARP1在OSCC诊疗中具有强大的潜力:一方面PARP1分子显像技术可用于OSCC的在体诊断,另一方面PARP抑制剂与放化疗联合应用在OSCC临床前测试中取得了良好的疗效。本文总结了PARP1在癌症治疗中的作用机制,重点阐述了PARP1应用于OSCC精准诊疗的研究进展,以促进PARP1靶点在OSCC中的临床应用转化。

奥曲肽对胃癌AGS细胞多聚ADP核糖聚合酶1、细胞增殖核抗原蛋白表达的影响

目的 观察奥曲肽对胃癌AGS细胞多聚ADP核糖聚合酶1（PARP-1）、细胞增殖核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1 （Cyclin D1）表达的影响及其作用.方法 利用不同浓度的奥曲肽（0、0.001、0.010、0.100、1.000、10.000 mg/L）作用于胃癌AGS细胞,采用Western blot方法分析PARP-1、PCNA和Cyclin Dl蛋白相对表达变化,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测胃癌AGS细胞增殖抑制,流式细胞术检测胃癌AGS细胞凋亡和细胞周期变化.结果 随奥曲肽浓度的增加,胃癌AGS细胞中PARP-1蛋白的表达逐渐增强（0.08、0.09、0.12、0.16、0.21、0.22）,PCNA蛋白的表达逐渐减弱（0.05、0.04、0.02、0.01、0.01、0.0l）,Cyclin D1蛋白表达无显著变化（0.44、0.40、0.39、0.40、0.43、0.40,P＞0.05）,PARP-1和PCNA蛋白表达呈负相关（P＜0.05）.奥曲肽在0～0.100 mg/L浓度范围内,对胃癌AGS细胞增殖抑制逐渐增强,高于0.100 mg/L浓度后,抑制作用逐渐减弱.各浓度奥曲肽作用下,胃癌AGS细胞凋亡和各周期细胞比例未见显著变化（P＞0.05）.结论 奥曲肽浓度可对胃癌AGS细胞增殖产生双向影响作用,其机制可能与PARP-1蛋白表达增强和PCNA蛋白表达抑制有关.

1型多聚ADP核糖聚合酶激活NF-κB途径调节基质金属蛋白酶活性的机制研究

目的:探讨1型多聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)通过激活NF-κB调节体外培养乳鼠心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9酶活性的机制。方法:使用10μmol/L去甲肾上腺素(NE)刺激体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞24h,利用荧光基团DCF-DA检测心脏成纤维细胞内活性氧(ROS)水平,使用明胶酶谱法检测MMP-2,MMP-9的酶活性水平,凝胶阻滞实验检测NF-κB的DNA结合能力,Western-blot检测PARP-1蛋白表达水平;使用PARP-1抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3AB),α、β受体阻滞剂及抗氧化剂vitC干预后,观察上述指标的变化。结果:NE诱导心脏成纤维细胞内ROS产生增加,PARP-1蛋白表达增加,NF-κB的核转录能力明显增强,MMP-2、MMP-9酶活性明显增加。使用3AB抑制PARP-1活性,或使用抗氧化剂vitC及α、β受体阻滞剂等预先处理后可显著抑制NF-κB的DNA结合能力,进而减少NE诱导的MMP-2,MMP-9酶活性。结论:NE诱导心脏成纤维细胞内ROS产生明显增多,ROS激活PARP-1并促使其蛋白表达显著增高,PARP-1通过增强NF-κB的DNA结合能力调控MMP-2和MMP-9酶活性。

不同尿蛋白排泄率的2型糖尿病患者血清多聚ADP核糖聚合酶的变化及其临床意义

目的研究糖尿病慢性肾脏疾病（CKD）不同阶段患者血清多聚ADP核糖聚合酶（PARP）水平的变化及临床意义。方法收集T2DM患者195例，根据尿白蛋白／肌酐（UACR）水平，分为UACR〈30mg／g组、UACR30-300mg／g组、UACR〉300mg／g组，另选健康志愿者68名作为正常对照（NC）组。收集标本检测PARP、纤维蛋白原（Fg）、3硝基酪氨酸（3-NT）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、TGF-β1水平，并行相关性分析及多元逐步回归分析。结果3组T2DM患者血清PARP均较NC组高E（56．07±14．05）vs（73．99±10．69）vs（86．18±11．23）vs（34．60±9．21）pg／ml，P〈0．01]。相关分析显示，血清PARP与UACR、Fg、3-NT、MCP-1、TGF-β1呈正相关（r=0．484、0．618、0．854、0．899、0．693，P〈0．05）。多元逐步回归分析显示，Fg、UACR是影响血清PARP的独立危险因素（P〈0．05），回归方程为YPARP=13．004＋3．693XFg＋0．02XUACR。结论T2DM患者血清PARP水平与CKD肾脏损伤有一定联系，可能成为早期诊断CKD的新型生物学标志物。PARP参与CKD肾脏损伤可能涉及氧化应激、慢性炎性反应、肾脏纤维化、纤溶系统紊乱等机制。

多聚ADP核糖聚合酶-1及其依赖性细胞死亡在神经系统疾病中的研究进展

背景多聚ADP核糖聚合酶-1（poly ADP-ribose polymerase-1，PARP-1）作为-种DNA修复酶，具有维持基因组稳定的生理作用，应激条件下介导细胞程序性死亡，即PARP．1依赖性细胞死亡（PARP-1-dependent cell death，PARthanatos）。目的研究PARP-1及其介导的细胞死亡在脑卒中和神经退行性疾病等神经系统疾病中作用，探讨PARP-1阻断对神经细胞的保护作用。内容持续氧化应激可使PARP-1过度活化，促进凋亡诱导因子（apoptosis induced factor，AIF）转位至细胞核，介导PARthanatos。缺血，再灌注以及谷氨酸兴奋性毒性作用均可产生大量氧自由基，是神经系统疾病主要致病物质。脑卒中和神经退行性疾病中存在持续氧化应激和PARP-1活化，其介导的PARthanatos是神经元死亡的主要方式之一。抑制PARP-1活化具有神经保护作用。趋向PARP-1活化介导脑卒中和神经退行性疾病的发生，阻断PARP-1有望成为治疗该类疾病的新靶点。

多聚ADP核糖聚合酶-1与糖尿病肾病

多聚ADP核糖聚合酶-1（PARP-1）是多聚ADP核糖聚合酶家族中重要的成员之一,在肾组织中广泛表达.近期研究发现,PARP-1与糖尿病肾病的发生、发展关系密切,PARP-1通过加重高糖氧化应激、促进慢性低度炎性反应、抑制组蛋白脱乙酰酶-1活性、增强Toll样受体4活性、上调内皮素及内皮素受体的表达、诱导纤溶系统紊乱等参与糖尿病肾病的病理生理过程.而相关研究也证明PARP-1抑制剂在糖尿病肾病的发病过程中可起到一定的保护作用,故PAPR-1可能成为糖尿病肾病的新治疗靶点.

多聚ADP核糖聚合酶-1与糖尿病血管并发症

多聚ADP核糖聚合酶（PARP）1是PARP核酶家族主要成员,分布广泛,是机体修复DNA损伤的关键酶之一,但其过度激活又会造成细胞的死亡。糖尿病时的氧化应激状态可以造成血管内皮细胞内源性DNA损伤,从而大量激活PARP,进而导致内皮细胞的死亡。这是糖尿病大血管和微血管并发症发生的共同机制。抑制PARP可有效防止内皮细胞的损伤,预防甚至逆转糖尿病血管并发症,对PARP的干预可能成为防治糖尿病血管并发症的一个新靶点。

拟南芥多聚ADP核糖聚合酶活性调控植物的抗旱性

为了观察植物多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的酶活对植物生长的作用,利用PARP抑制剂来抑制拟南芥PARP的体内活性,并观察表型.体外生化实验结果表明,3-氨基苯甲酰胺(3-Aminobenzamide,3-AB)可以抑制拟南芥PARP1和PARP2的多聚ADP核糖化修饰活性;利用3-AB来处理拟南芥,发现抑制剂处理过的植物表现出更强的耐旱能力.为了排除3-AB的非特异性作用,使用PARP的另外一个抑制剂苯甲酰胺(Benzamide,BA)对拟南芥进行处理,结果显示,BA处理后拟南芥也表现出相似的抗旱表型.另外,在正常生长条件下,3-AB或BA处理过的拟南芥生长量较大,植株鲜重明显增加.以上结果说明,抑制拟南芥PARP活性可以促进拟南芥抗旱能力的改善,其抑制剂具有潜在的应用价值.

多腺苷二磷酸核糖基化修饰与神经退行性变性疾病

神经退行性疾病的发病率越来越高,但其治疗手段有限。多腺苷二磷酸核糖基化修饰(PARylation)是由多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)催化的蛋白质翻译后修饰。PARylation通过影响蛋白质在细胞内的移位、聚集、蛋白质活性和细胞死亡,参与脑卒中、帕金森病、阿尔茨海默病、运动神经元病等神经退行性变性疾病的发生和发展。PARP抑制剂通过抑制蛋白PARylation,在药物临床前试验和临床试验Ⅰ期都展现了明显的神经保护作用。然而,寻找作用更特异的、符合神经退行性变性疾病治疗药动学特点的新型PARP抑制剂,将是抗神经退行性药物研发的新方向。本文就PARylation与神经退行性变性疾病的研究进展作一综述。

多聚ADP核糖聚合酶14在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的研究多聚ADP核糖聚合酶14(PARP14)在甲状腺癌中的表达情况及与甲状腺癌患者临床病理特征的关系,并评估PARP14在甲状腺癌进展中的作用。方法使用基因表达交互分析(GEPIA)数据库分析PARP14在正常甲状腺组织和甲状腺癌人群中的表达情况以及与患者无病生存期的关系,通过免疫组化实验评估甲状腺癌患者的肿瘤组织及癌旁组织中PARP14的表达。根据染色强度,将患者分为高表达组和低表达组,分析PARP14的表达情况与临床病理特征的相关性。通过克隆形成实验和MTT实验探究PARP14对甲状腺癌细胞增殖的影响。结果生物信息学分析和免疫组织化学结果均表明PARP14在甲状腺癌组织中高表达,且高表达患者的无病生存率明显偏低。PARP14表达水平与肿瘤分期和甲状腺内扩散具有相关性,且有统计学意义(均P<0.05)。克隆形成实验和MTT实验结果表明,KIF4A的表达能促进甲状腺癌细胞的增殖(P<0.05)。结论PARP14在甲状腺癌中高表达,并与患者的临床病理特征相关,提示其可能是甲状腺癌的治疗靶点。