免疫复合物AtgG刺激小鼠肾小球系膜细胞增殖过程中Hint2基因的表达和作用研究

目的观察免疫复合物AIgG刺激小鼠肾小球系膜细胞（GMCs）后不同增殖状态下Hint2-mRNA的表达量变化情况及Hint2蛋白过表达对免疫复合物AIgG刺激的小鼠GMCs不同增殖状态下的影响。方法（1）采用CCK-8法检测免疫复合物AIgG刺激体外培养小鼠GMCs增殖的量-效和时-效关系。（2）采用SYBRGreenReal—timePCR技术检测不同浓度的AIgG（0、1000、2000tJg／m1）刺激小鼠GMCs增殖后的Hint2-mRNA表达量的变化情况。（3）依次构建Hint2-Pmdl9克隆载体及Hint2-MigRl表达载体，采用磷酸钙共沉淀法将MigRl和Hint2-MigRl质粒分别成功转染小鼠GMCs。（4）将MigRl和Hint2-MigRl质粒分别转染小鼠GMCs后，并用流式细胞术将两者转染效率调整至一致，分别予不同浓度的AIgG（0、1000、2000μg／ml）刺激小鼠GMCs36h后，再用流式细胞术检测两者转染细胞绿色荧光蛋白（GFP）表达的阳性率。结果（1）AIgG对体外培养小鼠GMCs具有明显的促增殖作用，以2000μg／ml组作用最强。（2）Hint2-mRNA的表达量与小鼠GMCs的增殖状态呈负相关。（3）MigRl和Hint2-MigRl质粒通过磷酸钙共沉淀法均能成功转染小鼠GMCs，于荧光倒置显微镜下可见GFP阳性的细胞，FCM检测两者转染效率分别为38．22％和20．44％。（4）FCM检测不同浓度的AIgG刺激转染小鼠GMCs中GFP的阳性率：Hint2蛋白过表达组和对照组水平的差异均无统计学意义。结论Hint2-mRNA的表达量与小鼠GMCs的增殖状态呈负相关；单独Hint2蛋白过表达对小鼠GMCs的增殖状态未见明显影响。

静脉注射用免疫球蛋白的抗补体活性及部分免疫学特性测定

本文采用100CH_(50)法测定静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)的抗补体活性(ACA)。对IVIG的pH,Na^+含量及不同成分的缓冲液进行了试验比较;ACA重复测定结果的变异系数在15％以内;MG在含微量IgG多聚体情况下,多聚体与ACA的关系不明显;17批MG都含有麻疹抗体和白喉抗体,IgA含量不等,不含IgM。