细粒棘球绦虫多肽⁃壳聚糖季铵盐纳米颗粒的制备

目的以羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖(HACC)和三聚磷酸钠(TPP)为载体,制备载有细粒棘球绦虫表位多肽FL46的纳米颗粒(NPs),筛选最优制备条件,对包封效果及形态表征进行评价。方法采用离子交联法,将FL46溶液缓慢滴加到HACC溶液中,以800 r/min转速搅拌并逐滴加入TPP溶液,制备FL46⁃HACC⁃NPs混悬液。使用纳米粒度电位仪检测平均粒径、多分散系数(PDI)和表明电位(Zeta),透射电子显微镜下观察其微观形态,二辛可宁酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒计算包封率。以HACC浓度(0.25、0.50、0.75、1.00 mg/ml)、TPP浓度(0.25、0.50、0.75、1.00 mg/ml)、HACC与TPP质量比(8∶1、9∶1、10∶1、11∶1)进行三因素四水平正交实验,单因素法考察对FL46⁃HACC⁃NPs表征的影响。结果不同的HACC和TPP质量浓度及质量比下,FL46⁃HACC⁃NPs溶液可呈澄清、乳光、沉淀状态。经单因素实验,以粒径小、包封率高为筛选条件,筛选出的最优制备条件为HACC浓度0.25 mg/ml,TPP浓度0.50 mg/ml,HACC与TPP的质量比9∶1。最优条件下可制备类球形或多边形FL46⁃HACC⁃NPs,粒径为(307.37±2.17)nm,PDI为(0.228±0.008),Zeta电位为(29.77±0.46)mV,包封率为(75.95±1.60)%。透射电镜下显示,FL46⁃HACC⁃NPs形态结构大小均匀,呈类球形或多边形。结论离子交联法可有效制备出优化的FL46⁃HACC⁃NPs,为细粒棘球绦虫多肽疫苗保护效果的研究提供基础。