乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成的作用

目的研究乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成的作用。方法在泛耐药铜绿假单胞菌培养基(OD600=0.05)中分别加入乳铁蛋白多肽(LFcin、LFampin)以及乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)溶液干预;结晶紫法定量检测生物被膜;以结晶紫染色法,在光镜下观察生物被膜形态。结果乳铁蛋白多肽以及乳铁蛋白多肽嵌合体均能抑制泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成(P<0.05),生物被膜量与多肽浓度呈负相关(P<0.05);乳铁蛋白多肽嵌合体的作用强于乳铁蛋白多肽及其混合物(P<0.05)。结论乳铁蛋白多肽和乳铁蛋白多肽嵌合体,尤其是LFchimera对泛耐药铜绿假单胞菌生物被膜形成具有显著的抑制作用,有望用于泛耐药铜绿假单胞菌感染的治疗。

乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌毒力因子表达的影响

目的:研究乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌绿脓菌素、弹性蛋白酶表达的影响。方法:在泛耐药铜绿假单胞菌培养基(D600=0.05)中分别加入乳铁蛋白多肽(LFampin、LFcin)以及乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)溶液干预,通过氯仿萃取法定量检测绿脓菌素水平,用刚果红弹性蛋白检测法检测弹性蛋白酶活性。结果:LFampin、LFcin以及LFchimer均对泛耐药铜绿假单胞菌有杀菌活性,且能显著抑制绿脓菌素、弹性蛋白酶的表达,其作用与浓度呈正相关,其中,LFchimera的作用强于LFampin及LFcin,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳铁蛋白多肽,尤其是乳铁蛋白多肽嵌合体对泛耐药铜绿假单胞菌具有良好的抗菌活性,能显著抑制其绿脓菌素、弹性蛋白酶的表达。

环丙沙星联合乳铁蛋白多肽嵌合体对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达的影响

目的探讨环丙沙星(CIP)联合乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)对铜绿假单胞菌生物被膜和QS系统信号分子表达的影响。方法以铜绿假单胞菌PAO1作为实验研究菌株,将不加任何药物干预的铜绿假单胞菌组作为对照组,根据干预用药分为CIP组(0.04μg/ml的CIP)、低浓度LFchimera组(0.25μmol/L的LFchimera)、高浓度LFchimera组(1.00μmol/L的LFchimera)和联合组(0.04μg/ml的CIP和0.25μmol/L的LFchimera),统计各组实验菌株的定量生物膜表达(A590)及QS系统信号分子表达(A420)情况,比较其差异。结果 CIP组、低浓度LFchimera组、高浓度LFchimera组、联合组实验菌株的生物被膜和QS系统信号分子表达均较对照组低(P<0.05);CIP组的生物被膜、QS系统信号分子表达与低浓度LFchimera组比较,差异无统计学意义(P>0.05);高浓度LFchimera组的生物被膜、QS系统信号分子表达明显低于CIP组和低浓度LFchimera组(P<0.05);联合组的生物被膜、QS系统信号分子表达显著低于其他3组(P<0.05)。结论单独应用CIP、LFchimera对铜绿假单胞菌生物被膜和QS系统信号分子表达具有抑制作用,提高LFchimera的浓度或联合用药,可显著加强抑制作用。

虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-Ⅰ和芋螺毒素MVIIA嵌合体的固相化学合成

采用Fmoc固相合成的方法 ,将来自芋螺的ω 芋螺毒素 (ω Conotoxin)MVIIA (N 型钙离子通道阻断剂 )中已知活性位点及可能的相关序列嵌入虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅰ (HWTX Ⅰ )的非活性位点区 ,代替其相应序列 ,构建同时携带两种活性位点的多肽嵌合体 .嵌合体用MALDI TOF质谱鉴定 .通过RP HPLC检测其氧化复性过程 ,摸索出嵌合体的最佳复性条件 .经过两次RP HPLC脱盐纯化 .结果表明 ,设计合成的嵌合体在 1× 10 5g/mL ,利用小鼠隔神经 隔肌标本的阻断实验证明嵌合体显示了 2 7%的天然HWTX Ⅰ的神经毒活性 .实验结果表明 ,HWTX