蜘蛛多肽类毒素异源表达的研究进展

蜘蛛毒液是一个巨大的天然多肽和蛋白质分子组合库,具有多种生物学功能.但仅靠从天然的蜘蛛中提取出研究所需的蜘蛛多肽类毒素远不能满足对其的全面研究和开发利用.相比化学的固相合成法合成的低产量和较高成本,利用基因工程的方法异源表达蜘蛛毒素有较大的优势.综述了近年来利用大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统和植物表达系统异源表达蜘蛛毒素的研究进展.

肽类毒素(蜘蛛、蝎、芋螺)的三维结构

多肽类毒素研究是目前毒素研究的一个重点,对多肽类毒素的三维结构的研究是了解其结构与功能关系的重要基础.对蜘蛛、蝎以及芋螺这3类代表性的有毒动物的多肽类毒素在结构研究方面的进展及其三维结构的特点进行了介绍.其中,蜘蛛毒素多肽分子的结构主要发现有ICK模体(Inhibitor Cystine Knot motif)和D DH模体(disulfided-irectedh-airpin)两类,蝎毒素中长链肽类毒素分子和短链肽类毒素分子的结构明显不同,前者以CSα/β结构模体(Cyss-tabilizedα/βfold m otif)为主,后者则以α/β脚手架结构模体(α/βscaffoldm otif)为主.相对于蜘蛛和蝎而言,芋螺肽类毒素分子的三维结构则表现得更为复杂多样.

虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达

虎纹镇痛活性肽HWAP Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化 ,具有镇痛活性的多肽类神经毒素 .为了在P .pastoris中高效分泌表达HWAP Ⅰ ,依照RT PCR的结果 ,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段 ,与酵母表达载体 pPIC9K重组 ,构建表达质粒pPIC9K HWAP Ⅰ .转化GS115宿主菌后 ,筛选出整合型His+ MutS 表达菌株 .经诱导培养后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)证明HWAP Ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达 ,产物的分子质量为 4ku左右 ,产量达 80mg/L .

三羟鹅膏毒肽的反相高效液相色谱分离纯化

用反相高效液相色谱法,以0.02mol醋酸铵-乙腈为流动相和梯度洗脱模式,从灰花纹鹅膏菌中分离纯化出三羟鹅膏毒肽(amanin),产品纯度达96%以上,三羟鹅膏毒肽的分子量为903.3.

蜘蛛毒素研究进展

蜘蛛在全世界达四万余种,我国已记载的有近3 000种,其中剧毒蜘蛛有10多种[1-2]。蜘蛛毒素含有多种化学成分,根据其相对分子质量大小分为小分子物质、蛋白质和多肽类毒素三类。其中最为丰富也是目前研究最多的是相对分子质量在（1～10）×103的多肽类毒素,包括多肽神经毒素、激肽类似物、凝集活性肽和抗菌肽等。在这些多肽类毒素中,神经毒素又是多肽毒素中含量最多的成分,