新型多胺代谢酶抑制剂SI-4650对结肠癌CT-26细胞增殖的影响及其机制

目的:探讨本实验室新发现的新型多胺代谢酶小分子抑制剂SI-4650对结肠癌CT-26细胞增殖、自噬和凋亡的影响。方法:体外培养CT-26细胞,以0μmol·L-1 SI-4650处理48 h细胞为正常对照组,单独2.5 mmol·L-13-MA处理细胞为自噬抑制对照组,40、80μmol·L-1 SI-4650处理48 h细胞以及3-MA联合40、80μmol·L-1 SI-4650处理48 h细胞为4个实验组,化学发光法检测CT-26细胞中多胺代谢酶SMO和APAO酶活性的变化,HPLC法检测细胞中多胺含量的变化,CCK8法检测CT-26细胞增殖能力变化;PI单染结合流式细胞术分析细胞周期;Western blot法分析细胞自噬;PI/FITC-Annexin V双染、JC-1荧光探针和Fluo-3 AM钙离子荧光探针分别结合流式细胞术以及Western blot法分析细胞凋亡。结果:与正常对照组比较,40、80μmol·L-1 SI-4650实验组细胞生长抑制率分别为36.98%、46.91%,有效抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01);同时细胞中SMO和APAO酶活性下降(P<0.01);细胞中多胺总含量减少(P<0.01);CT-26细胞被阻滞在G0/G1期(P<0.01);凋亡细胞数分别为7.69%和16.87%,细胞中钙浓度增加(P<0.01)、线粒体膜电位下降(P<0.01),c-PARP、Bax表达增加(P<0.01)、Bcl-2含量减少(P<0.01);以及CT-26细胞中自噬相关蛋离子白Beclin-1、LC3-Ⅱ以及P62含量显著上升(P<0.01)。与单独40、80μmol·L-1 SI-4650处理组相比,2.5 mmol·L-13-MA联合40、80μmol·L-1 SI-4650实验组细胞自噬水平下降(P<0.01),凋亡相关蛋白、线粒体膜电位和钙离子浓度变化均减弱(P<0.01),凋亡细胞数减少(P<0.01)。结论:SI-4650有效抑制结肠癌CT-26细胞增殖,机制可能与抑制多胺代谢酶活性,干扰多胺代谢,减少多胺总含量以及诱导细胞周期阻滞、细胞自噬和凋亡相关。

多胺及其代谢抑制剂对盐胁迫下枣树叶绿体离子稳态和类囊体膜H^+-ATP酶活性的影响

研究了外源多胺及其代谢抑制剂灌根处理对盐胁迫下耐盐性不同的2年生‘冬枣’(耐盐性弱)、‘金丝小枣’(耐盐性强)嫁接苗叶片生长发育、光合作用、叶绿体内离子稳态、类囊体膜H+-ATP酶活性及结合态多胺水平的影响。结果表明:120 mmol.L-1NaCl胁迫30 d,0.75 mmol.L-1的3种外源多胺均可提高两个枣品种(特别是耐盐性弱的冬枣)的单叶重、叶绿素含量和叶片光合速率,Put、Spd效应均显著,Spm效应较小;枣叶叶绿体中不同种类多胺之间存在显著转化关系,Put对枣叶无毒害作用,且是其它多胺发挥效应的基础。应用多胺合成抑制剂DFMO和MGBG以及其降解抑制剂AG的试验结果进一步证实前述结果。外源多胺提高盐胁迫下枣叶类囊体膜结合态多胺水平,显著抑制盐胁迫下枣叶类囊体膜H+-ATPase活性下降,增强枣叶类囊体膜对盐分离子进出的调控,使枣叶叶绿体中能够保持稳定的K+含量、显著为低的Na+含量和较高的K+/Na+,使盐胁迫下叶绿体中的离子稳态得到维护。

CYP2C9抑制剂对艾瑞昔布大鼠体内药动学的影响

目的:考察CYP2C9抑制剂胺碘酮对艾瑞昔布在大鼠体内药动学的影响。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为2组(n=20),实验组连续7 d灌胃胺碘酮灌胃液(40 mg·kg^(-1),qd),对照组灌胃等量空白灌胃液。2组均于第8天单次灌胃艾瑞昔布灌胃液20 mg·kg^(-1),按确定时间点取血,LC-MS/MS法测定艾瑞昔布血药浓度,DAS 2.1.1软件拟合药时曲线并计算药动学参数,SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果:实验组和对照组的主要药动学参数如下:AUC0-24 h分别为(1 814.8±693.4)ng·h·mL^(-1)和(1 125.1±457.6)ng·h·mL^(-1);AUC0-∞分别为(2 091.6±887.1)ng·h·mL^(-1)和(1 331.3±592.6)ng·h·mL^(-1);t1/2分别为(7.8±4.5)h和(7.4±3.8)h;tmax分别为(1.7±0.6)h和(1.46±0.60)h;CL分别为(0.01±0.01)L·h^(-1)·kg^(-1)和(0.02±0.01)L·h^(-1)·kg^(-1);V分别为(0.11±0.05)L·kg^(-1)和(0.17±0.07)L·kg^(-1);Cmax分别为(268.2±115.7)ng·mL^(-1)和(162.2±53.0)ng·mL^(-1)。与对照组相比,实验组大鼠的AUC0-24 h、AUC0-∞、Cmax显著增大(P<0.05),V、CL显著减小(P<0.05),其他参数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CYP2C9抑制剂(胺碘酮)对艾瑞昔布在大鼠体内的药动学产生影响。