多胺生物合成抑制剂结合热处理后番茄冷害、多胺含量的变化及其相关性分析

以"佳粉15"和"粉红908"番茄为试材,分别采用热空气处理和多胺生物合成抑制剂(D-精氨酸和二环己胺)处理,然后于2℃(冷害温度)下贮藏。结果表明,热处理和2种多胺抑制剂处理都可以降低番茄的冷害指数和呼吸速率,抑制呼吸高峰的出现,并抑制多胺的合成。腐胺含量与冷害之间相关性分析的结果表明,多胺合成抑制剂结合热处理是通过改变果实腐胺的生物合成或分解代谢实现其减轻冷害作用的。

多胺生物合成调控与肿瘤细胞恶性表型逆转

细胞繁殖与分化的平衡维持了细胞正常生长与发育．细胞增殖分化的平衡失调可导致细胞癌变．其中生理性多胺起着调节因子的重要作用。大量资料证明：恶性肿瘤的发生、发展与多胺水平的异常升高有密切关系，提示了抑制多胺生物合成有可能作为抗癌的有效途径之一。为了探索这一可能性，

多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸对人膀胱癌细胞的抑制及促凋亡作用研究

目的探讨多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人膀胱癌EJ细胞的抑制作用。方法应用细胞培养、活细胞摄影技术、伊红染色细胞计数和原位DNA片段末端标记,观察DFMO抑制人膀胱癌EJ细胞的增生及诱导其凋亡。结果活细胞摄像结果显示:与空白对照组相比4,6,8mmol/LDFMO给药第5天,细胞生长明显抑制,随DFMO剂量增大,上述变化逐渐明显。伊红染色结果显示:4,6,8mmol/L的DFMO均可抑制EJ细胞生长,并随剂量的增加,抑制作用逐渐增强。原位DNA片段末端标记结果显示:4,6,8mmol/LDFMO均可诱导EJ细胞凋亡;6mmol/L为较适宜剂量;3种检测方法均显示同时加入外源性腐胺(Pu)后,EJ细胞的凋亡与对照组无明显差别。结论DFMO可以抑制膀胱癌EJ细胞的增生并诱导其凋亡。

多胺合成抑制剂DFMO抗人膀胱癌EJ细胞增殖的实验观察

目的 :探讨多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸 (α- difluoeom ethyl- ornithine,DFMO)抗人膀胱癌 EJ细胞增殖的作用。方法 :活细胞显微摄影、伊红染色细胞计数、绘制细胞生长曲线方法。结果 :4m mol～ 8mmol DFMO可以抑制人膀胱癌 EJ细胞的增殖 ,并具有剂量依赖性 ;外源性腐胺可以阻止 DFMO上述作用。结论 :DFMO抗人膀胱癌 EJ细胞增殖的作用是通过抑制多胺生物合成而实现的 ;抑制多胺生物合成可能是治疗膀胱瘤的一种有效途径。

石竹试管苗成花与多胺代谢的研究

以无根石竹试管苗为试材 ,通过外源多胺及多胺生物合成抑制剂调控石竹试管成花 ,研究其内源多胺代谢与成花的关系 .研究表明 ,外源多胺及多胺生物合成抑制剂影响石竹内源腐胺 (Put)、亚精胺 (Spd)、精胺 (Spm)及二丙胺(Dap)的代谢水平 .5× 10 - 2 mmol L的外源Spd、Spm有利于石竹试管苗成花 ,可将成花率由 36 7%分别提高到 6 0 %和4 8 3% .5mmol L的二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)、环己胺硫酸盐 (CHAS)完全抑制成花 ,相同浓度的二氟甲基精氨酸 (DF MA)对成花影响不大 ,说明鸟氨酸脱羧酶 (ODC)比精氨酸脱羧酶 (ADC)作用更大 。

多胺对宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生的影响

利用已建立的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在其离体形态发生中的作用进行研究。通过检测内源多胺含量发现,在所研究的三种多胺中,Put是器官发生途径的主要多胺,而在体细胞胚发生途径Spd含量占优势。Put含量变化在两条途径中相似:在愈伤组织分化的早期迅速积累不久又下降,随着芽原基和球形胚的形成含量又进一步上升。器官发生中Spd最高含量仅在培养的第一天出现;而从诱导愈伤组织发生体细胞胚的第一天后,Spd含量才开始上升,到第十天时达到最高值。三种外源多胺的添加均能有效地促进两条离体分化途径的形态建成:Spd(100μmol/L)能显著增加不定芽数,而体细胞胚发生中Spd(10 μmol/L)或Put(100 μmol/L)的单独处理能最好地促进体细胞胚形成和进一步发育成苗;尽管Spm在离体形态发生中含量较低,但添加外源Spm也促进了不定芽形成和体细胞胚形成然后成苗。多胺生物合成抑制剂CHA处理阻碍不定芽形成和体细胞胚的进一步发育;但是MGBG对器官发生途径中的形态建成没有影响,却降低体细胞胚的发生频率及再生苗数。添加Spd(50μmol/L)能部分逆转CHA、MGBG的抑制效应。以上结果表明,多胺对宁夏枸杞器官发生和体细胞胚发生途径的离体形态建成有一定影响。

植物体中多胺代谢及其功能研究进展

多胺广泛参与植物的生长发育以及对各种环境胁迫的响应。综合介绍了多胺的生物合成,多胺的转运与降解过程;同时总结了植物体中多胺功能的研究方法,并对多胺研究的发展前景作以展望。

二氟甲基鸟氨酸对人肺癌细胞生长特性的影响及其相关基因ALT-04_(ag)表达调控

目的研究抑制多胺生物合成对人肺癌细胞生长特性的影响及该影响与肺癌相关基因ALT-04ag表达调控的关系。方法以细胞形态观察、生长曲线、流式细胞分析、DNA电泳图谱等方法,研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)不可逆抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人肺鳞癌细胞L78生长特性的影响;根据人肺癌相关抗原ALT-04ag基因片段序列设计引物进行RT-PCR及用抗相关抗原单抗ALT-04进行免疫组化,分别检测ALT-04ag相关基因的mRNA及蛋白表达。结果5mmol/LDFMO作用人肺鳞癌细胞L785d,引起ALT-04ag基因mRNA和蛋白表达下调,并能明显抑制细胞生长、诱导细胞凋亡。同时加入外源性腐胺(Pu)可阻止上述基因及细胞形态的变化。结论抑制多胺生物合成引起的L78细胞生长抑制和细胞凋亡的诱导与肺癌相关抗原基因表达的下调有关。

ODC反义RNA表达质粒的构建及其对人肺鳞癌细胞生长特性的影响

鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶,其活性的异常升高及多胺堆积与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关.作者构建一个能表达人ODC反义RNA的真核表达质粒pCMV/ODCas,用磷酸钙沉淀法将其导入人肺鳞癌细胞系LTEP-78(L78),经G418筛选,获两株转染细胞系L78/ODCasl和L78/ODCas4.与亲本细胞相比,其生长速度减慢;软琼脂集落形成能力减弱,DNA、RNA及蛋白质等生物合成受到抑制,ODC酶活性降低.经Southern blot及PCR分析,进一步证明了上述变化与ODC反义序列稳定完整地整合到转染细胞基因组中有关.

ODC反义RNA转染细胞的肿瘤相关基因表达及其致瘤性

鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶，其活性的异常升高和继之引起的多胺堆积与肿瘤的发生、发展及转移密切相关。我们曾自行构建人ODC反义RNA真核表达质粒，并转染人肺鳞癌细胞，观察到稳定转染细胞株的生长速度减慢；大分子生物合成受到抑制；ODC mRNA表达减少和ODC活性降低等。