人脂肪干细胞的生物学鉴定和多能性分子Oct4和Sox2的表达研究

目的探讨人脂肪干细胞(ASCs)多能性分子Oct4和Sox2的表达情况。方法利用胶原酶将人脂肪组织消化后,分离培养得到ASCs,绘制细胞生长曲线;应用流式细胞仪检测不同代数的P2、P3、P5的ASCs的表面标志物;应用诱导分化培养基诱导ASCs朝成脂、成软骨和成骨方向分化,分化后分别行油红O、阿尔辛蓝和茜素红特殊染色鉴定;应用免疫荧光技术分析P1、P2、P5、P6细胞中Oct4和Sox2的表达情况。结果原代及传代后各代ASCs呈成纤维样贴壁生长,形态均一,细胞群体倍增时间为31 h。各代ASCs均表达CD29、CD44、CD90(>90%)和CD105(>50%),不表达CD34和CD45(<1%);成脂、成软骨和成骨诱导后染色鉴定结果均为阳性;Oct4在P1、P2细胞中的表达位于细胞核内,而在P5、P6细胞的表达则位于胞质;Sox2在P1、P2细胞的胞质中表达,而在P5、P6细胞的胞质中几乎不表达。结论 ASCs具有间充质来源干细胞的一些共同特性及间充质谱系的多向分化潜能。多能性分子Oct4和Sox2在不同代数ASCs中的表达量及表达位置有一定差异,可能反应了各代ASCs分化潜能有所不同。

猪胚胎干细胞建系研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是遗传工程、发育生物学和疾病模型研究与应用的重要材料。猪ESCs建系研究虽已历经十多年,且已有建立猪类ES细胞系的报道,但由于其培养和鉴定方法基本都是借鉴小鼠和人的ESCs建系,从而使其培养体系存在着极大的不可靠性,至今未有种系嵌合的猪ESCs建系成功的报道。论文对猪ESCs建系的影响因素和存在的问题、传统的培养和鉴定方法在猪ESCs建系中的应用、ESCs多能性分子以及ESCs研究中出现的新理论进行了综述。