一种多重刺激响应性多色荧光水凝胶的制备

基于分子结构设计理论,设计并合成了一种结构新颖的吡啶羧酸类荧光配体甲基丙烯酸-2-(6-脲基吡啶羧酸)-乙酯(UPA).采用自由基聚合法,以UPA和磺酸甜菜碱型两性离子3-[(3-丙烯酰丙基)二甲胺基]丙基-1-磺酸内盐(DMA)为单体,无机黏土为物理交联剂,通过光固化将荧光配体引入水凝胶结构中,再经过Eu3+或Tb3+配位后,在水凝胶中形成镧系配合物,构筑了机械强度高、自修复速度快、刺激响应性多(温度、 pH、离子强度等)且发光效率高的新型智能稀土杂化水凝胶材料,解决了稀土发光材料在水相中稳定性差、易荧光猝灭以及传统水凝胶力学性能差、功能性单一等问题,为信息防伪、生物成像及荧光标记等领域材料的制备提供了新思路.

多色荧光原位杂交在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用

背景与目的:膀胱尿路上皮癌是我国泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤。本研究旨在分析中国人膀胱尿路上皮癌中染色体畸变的情况,探讨多色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,M-FISH)技术辅助诊断膀胱尿路上皮癌的可行性和有效性。方法:用随机引物法标记3、7、17号染色体着丝粒及9p21区带探针,对57例膀胱尿路上皮癌间期细胞核进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH),统计染色体畸变情况并分析其与病理分期、分级的关系以及染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮癌的阳性率。结果:3、7、17号染色体和9p21的畸变率分别为47.4%(27/57)、50.9%(29/57)、56.1%(32/57)和59.6%(34/57),畸变与分期无相关性,3、7和17号染色体畸变与病理分级有显著相关性(P<0.01)。四个探针组合诊断膀胱尿路上皮癌的总阳性率为54.4%。结论:M-FISH技术检测有助于探索3、7、17号染色体畸变与病理分级的关系。

多色荧光原位杂交检测苯系物接触工人精子1,18号染色体畸变率

为研究苯系物暴露对工人精子染色体的损伤 ,用 4条DNA探针与间期精子核染色体进行多色荧光原位杂交 ,同时检测精子 1号、18号染色体数目畸变和 1号染色体结构畸变 (末端缺失与重复 )。作业车间空气中苯的时间加权浓度 (TWA)为 4 2 2 9mg m3,高于国家卫生标准 (6mg m3)。暴露组工人尿粘糠酸 (ttMA)高于对照组。共计数15例暴露组工人 14 4 2 82条精子 ,14例对照组工人 135 937条精子 ,杂交效率为 99 85 %。非整倍体测定结果 :暴露组精子 1号、18号染色体双体率 (分别为 0 0 88%± 0 0 4 1% ,0 0 87%± 0 0 4 9% )显著高于对照组 1号、18号双体率(0 0 4 5 %± 0 0 2 4 % ,0 0 5 3%± 0 0 2 8% ) ;暴露组 1号、18号染色体缺体率分别为 (0 11%± 0 0 5 9% ,0 0 75 %±0 0 35 % )显著高于对照组相应数值 (0 0 4 8%± 0 0 18% ,0 0 4 5 %± 0 0 2 4 % ) ;而二倍体精子率 ,两组差别无显著性。结构畸变测定结果 :暴露组 1号染色体的末端重复率、末端缺失率 (分别为 0 16 %± 0 0 37% ,0 14 %± 0 0 5 3% )显著高于对照组数值 (分别为 0 0 82 %± 0 0 2 3% ,0 0 6 9%± 0 0 2 8% ) ;暴露组 1号染色体着丝粒重复率及着丝粒缺失率(0 10 %± 0 0 35 % ,0 10 %± 0 0 4 1% )

菠菜rDNA及端粒多色荧光原位杂交分析

以拟南芥25S rDNA、5S rDNA以及端粒序列为探针对菠菜的中期染色体进行了多色荧光原位杂交分析,其中25S rDNA用生物素标记,端粒序列用地高辛标记,5S rDNA用生物素和地高辛共同标记。杂交结果显示,菠菜中期染色体25S rDNA杂交位点为6个,分别位于3号、5号和6号染色体的随体部位;5S rDNA杂交位点为4个,分别位于3号和5号染色体长臂,端粒序列杂交位点位于6号染色体端部以及其余染色体的端部和着丝粒部位。

多色荧光原位杂交技术检测急性淋巴细胞白血病复杂核型异常

本研究建立多色荧光原位杂交(M-FISH)技术平台,探讨其在检测急性淋巴细胞白血病(ALL)复杂核型异常中的应用。联合应用常规细胞遗传学方法和M-FISH技术分析了5例伴有复杂核型异常的ALL患者。结果表明:M-FISH证实了原有的异常t(9;22)、t(1;19)和t(y;1),同时还发现了新的异常der(1)(1∷3∷7)、der(6)t(6;9)(q?;p13)、der(1)t(1;11)、der(12)t(1;12)、der(3)t(3;5)、der(2)t(2;16)、der(9)(9∷18∷7)和der(7)(9∷18∷7),并且纠正了原有的错误分析,其中der(9)(9∷18∷7)及der(7)(9∷18∷7)为世界上首例报道。结论:M-FISH在检测ALL复杂核型中的应用前景广阔,是进行精确染色体核型分析所不可缺少的先进手段。

五派杨树多色荧光原位杂交分析(英文)

杨树染色体由一对较大的和17对较小的形态近似的染色体组成,联合利用18S-5.8S-25S rDNA,5SrDNA an拟南芥型端粒序列三种荧光探针分析大叶杨,胡杨,毛白杨二倍体,毛白杨三倍体,武黑一号,箭杆杨和小青杨七种五派杨树的分子核型.依据端粒信号测量染色体并根据不同杨树派别间rDNA定位染色体的不同区分杨树形态近似的17对染色体,并按降序排列各杨树的分子核型.分析表明,五派杨树中除胡杨外均由两个18S-5.8S-25SrDNA杂交位点,且位点位于较大的染色体上,而5S rDNA位点位于较小的染色体上,同时观察到七种杨树中均存在随体并与18S-5.8S-25S rDNA共定位于染色体端部.多色荧光原位杂交技术的利用为杨树的核型分析提供了更多的信息,有利于从分子水平区分杨树形态近似的染色体.

多色荧光原位杂交技术的临床应用

目的检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体。方法用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv(9)(p11q13),+m ar和1例46,XY,t(5;?)核型进行诊断。结果病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv(9)(p11q13),+SMC(15)。病例2的核型为46,XY,der(5)t(4,5)(q27;q35)。在此基础上对患者的核型—表型进行了分析。结论多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的。

多色荧光原位杂交方法同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变

背景与目的:建立可以同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变的多色荧光原位杂交技术。材料与方法:使用2条1号染色体探针(着丝粒和末端探针),2条18号染色体着丝粒探针,分别用地高辛或生物素标记,与人精子核DNA进行荧光原位杂交,用CY3-链亲和素检测生物素探针杂交信号;用与FITC结合的抗地高辛抗体检测地高辛信号,结果:在Nikon荧光显微镜下,可以清楚看到精子头部呈现兰色的荧光信号背景下,有红色荧光点信号(1号染色体着丝粒),绿色荧光信号(1号染色体末端),和黄色荧光信号(18号染色体着丝粒部位红、绿两种荧光信号的混合色)。本方法能够同时检测到精子1号,18号染色体非整倍体率(双体率,缺体率),1号染色体短臂和着丝粒结构畸变(重复率,缺失率),以及二倍体精子率3种染色体异常。用建立的方法检测14名正常人135 937条精子,测得1号染色体双体率、缺体率分别为O.045％和0.048％;18号染色双体率、缺体率分别为0.053％和O.045％:二倍体精子率为0.061％;1号染色体末端重复率、缺失率分别为0.082％、0.069％,1号着丝粒重复率、缺失率分别为O.075％,O.060％;均在文献报道范围内。结论:本研究建立的多色FISH可用于测定正常人和环境化学物接触人群精子染色体数目畸变和结构畸变。

多色荧光原位杂交技术在精子染色体研究中的应用

随着胞质内精子显微注射 (ICSI)的应用 ,严重少、弱、畸精子症病人也能获得治疗。现有许多研究发现这部分病人精子染色体非整倍率增加。如非整倍体的精子受精 ,产生的子代将导致流产、畸胎、死胎 ,因此对精子染色体数目的研究已成为男性不育精子检测的一项重要内容。近年来 ,多色荧光原位杂交 (FISH)技术在检测精子染色体非整倍体方面取得了一些进展 。

多色荧光原位杂交及其在遗传毒理学中的应用

多色荧光原位杂交 (MFISH)在检测核酸序列、染色体和基因方面有着强大功能。由于染色体结构和数目畸变被认为是遗传毒性研究重要的生物学终点 ,而该方法可准确直观地评价暴露于职业、医疗和环境毒物后的染色体异常 ,因此以其为基础的各类方法在人类遗传学、生殖医学、尤其是遗传毒理学中将会得到广泛的应用。

多色荧光原位杂交检测尿沉渣诊断膀胱尿路上皮癌

目的研究应用多色荧光原位杂交检测尿沉渣诊断膀胱尿路上皮癌的可行性,并与尿脱落细胞学相比较。方法M-FISH法分析100例可疑膀胱尿路上皮癌或有相关病史患者和10例良性前列腺增生患者晨尿尿沉渣,同时行尿脱落细胞学检查,以病理为诊断标准。FISH探针是用随机引物法标记3、7、17号染色体着丝粒及9p21区带,统计染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮癌的阳性率。结果M-FISH低级别尿路上皮癌灵敏度75.6%,高级别尿路上皮癌为100%,总体灵敏度85.5%;尿脱落细胞学低级别尿路上皮癌灵敏度33.3%,高级别是96.0%,总体灵敏度62.9%,两者总体灵敏度之间有统计学差异(P<0.05);两者特异性分别是84.6%和87.8%,无统计学差异。结论M-FISH法检测灵敏度比尿脱落细胞学高,特异性相似,并可以诊断出所有的高级别浸润性肿瘤。

应用Photoshop软件合成FISH HER-2多色荧光图像

人类表皮生长因子受体-2（HER-2/neu,erbB-2）是一种相对分子质量185 kDa的跨膜受体,在25%～30%的原发性乳腺癌中HER-2/neu基因过表达。赫塞丁（Herceptin）是一种重组DNA衍生的人源化抗p185HER2嵌合抗体,可特异性结合p185HER2。由于赫塞丁治疗是以HER-2为靶点的靶向性治疗,因此只有HER-2过表达的患者应用该药才可能有效[1-3]。

基于改进的多色荧光原位杂交技术的染色体分析

为了提高多色荧光原位杂交(M-FISH)技术的鉴定效率,简化M-FISH操作程序,探索和建立新的M-FISH实验及观察体系,本研究以‘荆辉1号’(普通小麦辉县红-荆州黑麦双二倍体)、‘南农9918’(普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6AL)、‘扬麦22’(普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6DL)以及‘ST5V#4S-1’(普通小麦-簇毛麦小片段易位系)等为试验材料,以2个寡核苷酸探针[(GAA)10、pAs1-1]和物种基因组DNA探针作混合探针进行M-FISH分析。结果表明在一次原位杂交中同时使用3种探针,既可以识别出小麦背景中所有的外源染色体或染色体片段,又可以根据(GAA)10和pAs1-1在染色体上的杂交信号分布精确鉴定出小麦和外源染色体(片段)的具体身份。这种改进的M-FISH技术可有效用于小麦及其近缘植物染色体的鉴定,并有助于快速构建物种基于FISH的分子核型。

多色荧光原位杂交对昆明山海棠和丙烯酰胺诱发微核染色体组成的研究

采用着丝粒和端粒DNA探针多色荧光原位杂交,分析了昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的NIH 3T3细胞微核的染色体组成。结果表明,昆明山海棠和丙烯酰胺诱导的由整条染色体组成的微核分别可达70.7％和65.9％,提示昆明山海棠和丙烯酰胺均有较强的非整倍体毒性。

多色荧光原位杂交技术在急性白血病研究中的应用

染色体核型与急性白血病的预后、诊断及治疗关系密切。目前各实验室常规应用的方法是传统染色体核型分析与荧光原位杂交技术,但这两种技术各有不足之处。新近发展起来的多色荧光原位杂交技术有效地弥补了这些不足。本文就多色荧光原位杂交技术的原理、种类、特点及其在急性白血病研究中的应用作一综述。

多色荧光原位杂交检测人卵细胞染色体非整倍体方法的建立

目的 建立多色荧光原位杂交技术检测人卵细胞染色体非整倍体的方法。方法 取试管婴儿助孕技术后未能受精成功的卵细胞 ,于取卵后 1～ 3d固定 ,采用多色荧光原位杂交方法检测卵细胞 13,16 ,18,2 1和 2 2号染色体的情况。结果 正常未受精卵细胞中期染色体显示一个成对的杂交信号 ,每条染色单体显示一个单个信号 ;分裂相中多出或缺少一个成对杂交信号表明多余或缺少一条染色体 ;分裂相中多出或缺少一个单个信号表明多余或缺少一条染色单体 ;两个单个信号分离表明两条姐妹染色单体分离。结论 采用多色荧光原位杂交方法可以有效检测人卵细胞染色体非整倍体异常。

多色荧光原位杂交检测尿沉渣诊断膀胱尿路上皮癌的可行性分析

目的研究分析多色荧光原位杂交检测尿沉渣诊断膀胱尿路上皮癌的可行性。方法选取膀胱尿路上皮癌患者30例,纳入对照组。选取30例正常人,纳入观察组。2组均进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridiza-tion,FISH)检测尿沉渣,统计并分析染色体畸变情况。结果观察组与对照组3、7、17、9p21染色体畸变数差异有统计学意义(P<0.05)。3探针敏感性为36.67%,7探针敏感性为43.33%,17探针敏感性为40%,9p16探针敏感性为50%,4组合用探针敏感性为70%显著高于单独使用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多色荧光原位杂交检测尿沉渣诊断膀胱尿路上皮癌诊断疗效显著,值得临床广泛推广及应用。

新型水溶性多色荧光碳点的制备及细胞成像研究

以鸡蛋清和牛奶分别与葡萄糖进行水热反应,制备水溶性多色荧光碳点,通过膜和柱层析分离纯化,利用透射电子显微镜（TEM）、紫外吸收光谱（UV）、荧光光谱（FL）、红外光谱（FTIR）等技术对所制备碳纳米粒子的粒径大小、吸收光谱、发光性质、表面基团进行表征.将所制备的碳点与小鼠黑色素瘤细胞共孵育,进行细胞成像应用评价.结果表明：制备的两种水溶性荧光碳点平均粒径分别为2.5 nm和4.9 nm,可在紫外灯下发出明亮的荧光,紫外最大吸收波长为250 nm.基于鸡蛋清或牛奶与葡萄糖反应制备的多色荧光碳量子点具有良好水溶性,其荧光光谱最大发射波长分别在410 nm和400nm处,同时在660～800 nm激发波长范围内具有上转换性质,且荧光发射光谱随着激发光波长的增加发生红移.红外光谱表明存在—COOH、-NH2和-OH基团.细胞成像结果表明,在405 nm或488 nm激光照射下,所制备的碳点在细胞内的荧光成像清晰可见,而且在碳点浓度小于2.5 mg/mL时,均表现出较低的细胞毒性.