多花胡枝子基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

以多花胡枝子干种子、萌发种子及开花期叶片三种材料提取基因组DNA,其中开花期叶片用CTAB法提取、干种子和萌发种子用SDS法提取的DNA均用于RAPD研究。结果表明,叶片基因组DNA的RAPD扩增最佳反应体系是:DNA模板用量为75ng,Mg2+浓度2.1mmol/L,dNTP浓度200μmol/L,随机引物浓度为0.2pm/μL,10×buffer2.5uL,TaqDNA聚合酶1.5个单位,反应总体积25uL;扩增反应程序:94℃预变性3min;94℃变性30s,36℃退火30s,72℃延伸1min,循环45次,72℃延伸10min。

野生花卉多花胡枝子种子萌发特性

Germination of Lespedeza floribunda Bunge.seeds was studied in order to provide cultivation and application in gardening and landscaping.Results indicated that the seeds of Lespedeza floribunda had the characteristic of forcing dormancy that was caused by hard seed vessels.The dormancy could be released by soaking in hot water and by sulphuric acid treatment.The most appropriate treatment time was 10～30 min,resulting in average germination rate(96%),average germination power(82.53%)and average germination index(17.54).The optimum germination temperature was 25 ℃ and the germination rate,germination power and germination index was 95%,81%,22.95 respectively after treated by sulphuric acid for 20 min.

多花胡枝子野生种质材料芽期耐盐性评价

为加强耐盐性种质资源的研究,选20种不同生境下野生多花胡枝子材料,根据各材料在7个浓度梯度盐胁迫下的发芽势、发芽率、胚根胚芽比等变化情况,利用模糊数学中隶属函数法综合分析研究其耐盐性。结果表明,随着盐浓度的增加,各个材料的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数都呈下降趋势,胚根胚芽比在低盐浓度下降低,在高盐浓度下升高,表明低盐浓度对野生多花胡枝子种子萌发有一定促进作用,而高盐浓度则严重抑制种子的萌发。相同盐浓度下,不同材料间也呈显著差异性(p<0.05)。平定冠山的L 6材料耐盐性较强,可作为多花胡枝子耐盐育种的材料,而黑山寨的L 16较差。

商洛多花胡枝子根瘤菌16S rDNA-RFLP分析及系统发育研究

利用16S rDNA-RFLP和全序列测定方法,对分离自商洛地区5个分布点的59株多花胡枝子根瘤菌进行了RFLP分析和系统发育研究.结果表明:(1)42株供试菌株归属根瘤菌属(Rhizobium)、11株归属中华根瘤菌属(Sinorhizobium).其余6株非根瘤菌中3株是嗜麦芽黄单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)、3株是解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus),说明胡枝子根瘤内生菌较为丰富且类型多样.(2)结合供试菌株的地理生境分析,发现来自不同采集点的菌株有些具有同样的遗传类型,而来自同一采集点的菌株遗传类型却有差异,证明胡枝子根瘤菌在分群类别上与地理环境之间没有明确的对应关系,地理环境并非根瘤菌多样性形成的主要因素.建议今后对根瘤菌多样性研究应从根瘤菌与寄主植物物之间的共生选择进化,特别是对共生体系中基因的横向转移方面进行深入探讨.

多花胡枝子对干旱胁迫的生理响应初步研究

实验采用聚乙二醇6000（PEG6000）在室内模拟干旱条件,研究不同程度干旱胁迫对多花胡枝子相对含水量、相对电导率、丙二醛（MDA）、叶绿素含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力和脯氨酸含量的影响,旨在探求其在沙质条件下的生存能力.结果表明：随着干旱胁迫的加强,电导率和丙二醛（MDA）明显增加,而叶绿素含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和叶片相对含水量均呈显著下降趋势.以30%PEG6000处理对多花胡枝子的伤害最大.在胁迫处理12h,30%浓度处理的植株电导率高至（50.7%）比对照组高13.4%;SOD活性最低为100.4 U/g;在胁迫处理24h时,10%浓度处理的植株脯氨酸含量高达1 024 Ug/g,此后逐渐降低;在处理48h时,30%浓度处理的植株MDA含量为17.58 nmol/g,高于其他胁迫处理.在PEG6000处理过程中,处理0~12h为植株的抗性阶段,处理12~48h为植株的耗尽阶段.可见,在干旱胁迫下,多花胡枝子可以通过改变体内物质含量来提高抗性,渡过逆境.

盐胁迫对多花胡枝子种子萌发及生理特性的影响

对冠山、金山寺、黑山寨3个耐盐性不同的野生多花胡枝子材料的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、胚根胚芽比值及SOD、POD和质膜透性等指标在盐胁迫下的表现进行了分析。结果表明,0.2%～0.6%盐浓度各指标能反映出很好的变化趋势,区分性好,而0.8%～1.0%盐浓度下各项指标均很低,不宜作为野生多花胡枝子耐盐性评价的盐浓度。0.6%以内盐浓度的相对发芽率、相对发芽指数与胚根胚芽比及变化量相结合的综合评价法最简便易行,可作为野生多花胡枝子耐盐性评价的首选指标。

多花胡枝子在沙质条件下生态适应性研究

采用沙、壤土不同比例的2种土壤,对多花胡枝子和榛子2种植物进行栽培,探求豆科植物在沙质条件下其生理指标变化。结果表明:在正常和沙质土壤条件下,多花胡枝子和榛子的电导率均增加,榛子增加幅度较大,表明其电解质外渗严重;叶绿素含量、SOD活性、N和P含量均减少,但多花胡枝子变化幅度明显小于榛子,表明豆科植物多花胡枝子在逆境条件下抗性较好;沙质条件下多花胡枝子MDA含量增加值大于榛子,表明其抗氧化能力强。因此在沙质土壤条件下,多花胡枝子具有更好的适应性。

商洛多花胡枝子根瘤菌生理生化特性和数值分类研究

选用分离自陕西商洛多花胡枝子的59株根瘤菌和15株参比菌,进行了125项表型性状测定和聚类分析。结果表明:未知菌能够利用的碳氮源比较广泛,生长的温度和pH范围较宽,对抗菌素、染料和重金属分别具有抗性的菌株以及产氧化酶菌株的数量比例较高,部分菌株具有耐高浓度盐或碱的性能,其中大约67%的菌株能耐受3.0%的NaCl,25%的菌株可在初始pH12的YMA培养基上生长。从数值分类树状图谱发现,在80.5%的相似性水平上,除CCNWSX0922外,供试菌株聚成8个表观群,群Ⅰ包含6株未知菌和3株已知中慢生根瘤菌属参比菌,群Ⅱ包含19株未知菌和6株中华根瘤菌属参比菌,群Ⅲ包含1株未知菌和3株根瘤菌属参比菌,群Ⅳ和群Ⅴ皆含根瘤菌属参比菌株。群Ⅵ、群Ⅶ和群Ⅷ三个类群未能与参比菌株聚在一起,为新类群,其分类地位需进一步研究确定。

多花胡枝子再生体系初探

[目的]研究多花胡枝子(Lespedeza floribunda)组培再生体系。[方法]以子叶节为初代分化外植体,诱导不定芽,通过继代培养获得再生茎段,培养生根后获得再生植株。[结果]最佳种子消毒时间为0.1%HgCl2溶液消毒8min;初代分化选择子叶节为外植体时,最佳分化配方是1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+IBA0.2mg/L;最佳茎段继代配方是WS+6-BA0.7mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L;最佳生根配方是WS+IBA0.3mg/L,生根率为74.8%。6-苄基腺嘌呤(6-BA)对初代分化与继代分化的影响均达显著水平(α=0.05)。与萘乙酸(NAA)相比,吲哚丁酸(IBA)诱导多花胡枝子生根的能力更好。

荆条和多花胡枝子叶片形态和光合生理特性的耐阴适应性研究

荆条和多花胡枝子是北京地区典型的乡土植物,具有耐寒、耐热、耐瘠薄等较强的综合抗性,但其耐阴适应性反应及生理机理仍不清楚。通过测定植株在不同遮阴处理下的叶片形态和光合生理特性指标,分析其耐阴的适应性变化。结果表明,2种植物都具有较强的耐阴性,在不同遮阴处理条件下,叶片面积、厚度、含水量、气孔密度和导度、净光合速率、叶绿素含量变化等叶片形态和光合生理特性指标都能够对荫蔽环境产生一系列的适应性变化,维持植株正常生长。荆条对荫蔽环境的适应性能力比多花胡枝子略强。

多花胡枝子的苗木繁育

多花胡枝子开花期在8－9月初，花期近40d，花冠紫红色。植株耐干旱、寒冷、适宜性强，在园林绿化上有较高观赏应用价值。以播种法繁殖为主，宜用床上条播，覆盖厚土度0．5cm，播种量2kg／667m^2。第二年按O．6—0．8m行株距移植，经过修建造形，田间场规管理，3～4a时间即出圃用于园林绿化。

香山公园常见地被植物生长特性及根系研究

在古树下种植乡土地被植物,既可保护古树下土地免受践踏,又有利于改善土壤的透气和保水能力。但栽植前需掌握地被植物的根系生长特性,评估其对古树根系的影响。利用Epson数字扫描仪,配合直接测定法,对香山公园内4种常见地被植物(多花胡枝子、菊花脑、青绿薹草和求米草)在古树油松、古树白皮松及苗圃3种立地条件下的根系及地上部生长情况进行分析。苗圃条件下的相同年份多花胡枝子植株,根系及地上部发育均显著优于白皮松及油松下植株;菊花脑在3种立地条件下均表现良好,根系及地上部发育未表现出显著差异;在相同立地条件下的求米草根系及地上部发育显著优于菊花脑和青绿薹草,且不同立地条件下的求米草地上部分和根系发育差异较小。研究结果显示,菊花脑和求米草在不同立地条件下均表现良好,且不易对古树根系产生影响,适宜在古树下栽植;多花胡枝子适宜在立地环境较陡的古树下栽植;青绿薹草不适于作为古树林下地被使用。