细菌多药外排系统的研究进展

目前各种细菌的耐药性问题已引起了科学家们的广泛关注,细菌的多药外排系统是引起细菌多药耐药的主要原因之一.本文着重介绍了与多药耐药相关的两大类多药外排系统(ABC型多药外排系统和次级多药外排系统)各家族成员的结构特点、表达调控和底物范围,以及解决多药外排系统引起耐药性的几项措施.

铜绿假单孢菌多药外排系统研究进展

铜绿假单孢菌是一种重要的院内感染条件致病菌 ,具有先天的和后天获得的多重高度耐药性 ,一旦感染 ,临床治疗十分困难。铜绿假单孢菌的耐药机理十分复杂 ,除常见耐药机制外 ,很重要的就是其拥有可以外排多种药物的主动外排系统 ,使抗菌药物很难发挥应有作用。本文将从近年铜绿假单孢菌中各类外排泵的研究情况 ,特别是其中最重要的外排系统“MexAB -OprM”的分子结构模型、膜定位、该基因的表达与调控等方面的研究进展做一综述。

几种菌的外排泵系统及其抑制剂

由于多药耐药致病菌的出现,越来越多的抗菌药物对这些病原微生物无效。因此,当务之急就是要用创新的方法研发抗多药耐药致病菌的药物,以控制病原微生物的感染。目前,多药外排系统(MES)已成为抗菌药物发挥最佳疗效的一大障碍。因此,小分子外排系统阻滞剂的发现是当下较为热门以及广泛的研究领域,其中包括天然界来源的外排泵抑制剂的研究,天然的化学型外排泵抑制剂的研究方法以及数量正日益增长。本文对革兰阳性菌、革兰阴性菌、分枝杆菌以及真菌中的多药外排系统进行了介绍,为寻找潜在的外排泵抑制剂奠定基础。

多药耐药绿脓杆菌感染对患者的影响

抗生素对绿脓杆菌的耐药率不断增加。绿脓杆菌多药耐药（MDR）的表型可通过多药外排系统、酶的产生、外膜蛋白（孔蛋白）缺失和目标突变等被介导。多药耐药的定义目前还没有共识。经验证明，不适当的治疗会增加绿脓杆菌感染患者的死亡率，而正确治疗的延迟有可能增加住院时间和感染持续时间。患者临床预后差结果可能与多药耐药有关。

结核分枝杆菌毒力基因片段Rv0450c分子克隆及原核表达

目的通过分子克隆的方法对结核分枝杆菌H37Rv中编码MMPL4蛋白的Rv0450c基因以及编码该蛋白一个161氨基酸的膜内区域(I161)和一个371氨基酸的膜外区域(O371)的基因片段在大肠杆菌中的表达和纯化方法进行研究,为进一步探讨MMPL4与结核分枝杆菌耐药相关功能性研究以及抗体制备提供依据。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增Rv0450c基因片段,并克隆到原核表达载体pET28b质粒中,获得的重组质粒转化原核表达宿主大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中,经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳方法检测重组蛋白的表达,并进行纯化。结果从结核分枝杆菌基因组H37RvDNA中成功扩增出Rv0450c基因及编码I161/O371的DNA片段,并构建原核表达质粒pET28b-Rv0450c,pET28b-I161和pET28b-O371重组MMPL4蛋白和I161在大肠杆菌中表达不明显,而膜外区域O371以包涵体形式高表达。结论 Rv0450c基因原核表达质粒可以成功构建并在大肠杆菌内较好表达,为进一步MMPL4功能研究和抗体制备打下良好基础。