多药耐药相关蛋白转运体在药物性肝损伤中的作用研究进展

肝脏是人体新陈代谢最旺盛的器官,也是体内多种药物的解毒器官。当长期或过量使用药物时会增加药物性肝损伤(DILI)的风险。多药耐药相关蛋白(MRPs)是位于细胞膜上的功能蛋白,可转运多种药物,在DILI中发挥重要作用。MRPs功能的抑制、缺失是药物肝毒性产生的重要原因。本文对MRPs的结构、表达部位及功能进行归纳,并对MRPs与DILI的关系及其改善DILI的机制进行总结,期望更好地了解MRPs转运体与DILI的关系,为后续防治DILI提供参考。

茵陈水提物对多药耐药蛋白3基因突变致新生儿肠外营养相关性胆汁淤积的保护作用

目的探讨茵陈水提物对多药耐药蛋白3(MDR3)基因突变导致的新生儿肠外营养相关性胆汁淤积(PNAC)的保护作用及可能机制。方法①将人原代培养肝细胞应用体外细胞培养、CRISPR/Cas9慢病毒感染、MDR3突变基因导入等技术处理后,比较1%脂肪乳诱导处理前(0)和处理后16、32、48 h不同时间点肝细胞上清液中肝胆生化指标〔丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、间接胆红素(IBil)、总胆汁酸(TBA)〕的水平,确定构建MDR3基因突变PNAC肝细胞模型脂肪酸诱导所需的时间。②将人原代培养肝细胞株按随机数字表法分为空白对照组、MDR3基因野生型组、MDR3基因突变组、茵陈水提物干预组。空白对照组只用培养液处理,MDR3基因野生型组应用慢病毒感染融入野生型MDR3基因和培养液培养,MDR3基因突变组应用慢病毒感染慢病毒导入MDR3(c.485T>A、c.2793insA、c.1031G>A、c.3347G>A)突变基因和培养液培养,茵陈水提物干预组应用慢病毒感染导入MDR3突变基因和培养液培养的基础上,加入100 g/L茵陈水提物预处理,然后将4组肝细胞分别加入1%脂肪乳诱导处理,处理时间为构建MDR3基因突变PNAC肝细胞模型脂肪酸诱导所需时间。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定4组肝细胞上清液中肝胆生化(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测4组肝细胞编码MDR3、胆盐输出泵(BSEP)、多药耐药相关蛋白(MRP)2~4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的三磷酸腺苷结合盒蛋白(ABCB4、ABCB11、ABCC2、ABCC3、ABCC4)和TNF基因mRNA的表达丰度。结果与空白对照组和MDR3基因野生型组比较,MDR3基因突变组在经1%脂肪乳诱导处理前和处理后16 h肝细胞上清液中肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平比较差异无统计学意义,经1%脂肪乳诱导处理32 h和48 h MDR3基因突变组肝细胞上清液肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、IBil、TBA)水平均明显升高(均P<0.05),确定构建MDR3基因突变PNAC肝细胞模型脂肪酸诱导所需的时间为32 h。与MDR3基因突变组比较,茵陈水提物干预组肝细胞在脂肪乳处理后32 h肝细胞上清液中肝胆生化指标(ALT、AST、TBil、DBil、TBA)水平均明显降低〔ALT(ng/L):148.3±2.3比164.9±7.0,AST(ng/L):2767.4±78.8比3239.4±107.1,TBi(lμmol/L):7.6±0.2比13.6±0.3,DBi(lμmol/L):1.8±0.1比5.7±0.2,TBA(μmol/L):3.4±0.2比6.7±0.1,均P<0.05〕;空白对照组、MDR3基因野生型组、MDR3基因突变组和茵陈水提物干预组肝细胞编码MDR3、MRP2、MRP3、MRP4的ABCB4、ABCC2、ABCC3、ABCC4基因mRNA表达丰度差异无统计学意义;TNF基因mRNA在MDR3基因突变组呈高表达(2-ΔΔCt:1.258±0.200比1.001±0.052),茵陈水提物干预组呈低表达(2-ΔΔCt:0.387±0.247比1.258±0.200),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与MDR3基因突变组比较,茵陈水提取物干预组肝细胞编码BSEP的ABCB11基因mRNA的表达丰度明显增高(2-ΔΔCt:2.955±0.479比1.333±0.529,P<0.05)。结论茵陈水提物对MDR3基因突变导致的PNAC有一定保护作用,可能与拮抗炎症反应,降低TNF基因的mRNA表达和改善编码BSEP的ABCB11基因的mRNA表达有关。

化痰降气胶囊对COPD模型大鼠支气管上皮细胞中多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响

目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察化痰降气胶囊对支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1(MRP1)功能和表达的影响,探讨化痰降气胶囊治疗COPD的作用机制。方法雄性Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和化痰降气胶囊组(简称化痰降气组)。除正常对照组外,其余各组采用烟、二氧化硫定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法,建立COPD大鼠模型;观察化痰降气胶囊治疗后肺功能指标、支气管肺泡灌洗液细胞计数与分类、大鼠的肺组织病理学改变,并采用ELISA方法测定肺组织中白三烯C4(LTC4)的浓度及免疫组化测定肺支气管上皮MRP1的表达。结果 (1)模型组大鼠的肺顺应性(CL)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3%)/用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值、最大呼气中段流量较正常对照组显著降低(P<0.05)。化痰降气组上述肺功能指标较模型组明显升高(P<0.05)。(2)模型组气道炎症加重,且出现明显肺气肿;化痰降气组也出现了炎症和肺气肿,但程度较轻。(3)与正常对照组比较,模型组及化痰降气组肺组织中的LTC4均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组中肺组织的LTC4显著下降(P<0.05)。(4)与正常对照组比较,模型组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著增强(P<0.05)。结论化痰降气胶囊可能通过影响慢性阻塞性肺疾病状态下MRP1功能和表达,从而达到有效减轻COPD大鼠的气道炎症,延缓肺功能恶化等COPD发生和发展的目的。

熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达影响的研究

[目的]研究熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响。[方法]1)利用氯化锂-匹罗卡品制作癫痫大鼠模型。2)实验大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊大剂量+卡马西平(CBZ)组(联高组)、熄风胶囊大剂量+CBZ1/2剂量(联低组)和CBZ组。3)通过Western-blot方法检测癫痫大鼠海马和皮质MRP1的表达程度。[结果]实验结果显示治疗组与模型组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]熄风胶囊能有效抑制MRP1的过度表达。

多药耐药相关蛋白1在骨肉瘤中的表达

目的 探讨骨肉瘤组织中多药耐药相关蛋白 1(MRP1)的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测 6例正常成年骨组织和 4 5例骨肉瘤组织中 MRP1,结合临床病理指标进行分析。结果6例正常骨组织中 MRP1的表达均为阴性。 4 5例骨肉瘤中 MRP1阳性 32例 (71.11% ) ,其中高分化骨肉瘤阳性率2 8.5 7% (2 / 7) ,中、低分化骨肉瘤阳性率 78.95 % (30 / 38) ,两组间差异有显著性 (P<0 .0 5 )。且随着骨肉瘤分化程度的降低 ,MRP1表达率升高 ,MRP1的表达与骨肉瘤的恶性程度呈正相关 (r=0 .84 4 )。根据肿瘤大小、Enneking外科分期、血清碱性磷酸酶 (AL P)含量、患者性别、年龄及就诊前病程长短等分组 ,MRP1表达无统计学意义。结论正常成年骨组织中 MRP1表达阴性。骨肉瘤组织中有 MRP1的表达 ,MRP1的表达与骨肉瘤的恶性程度呈正相关 ,提示 MRP1可能为骨肉瘤原发耐药的重要原因之一。

化痰降气方对人支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1的影响

目的:研究化痰降气方对人支气管上皮细胞上多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响。方法:体外培养人支气管上皮细胞16HBE14o-,以5-羧基二乙酸荧光素(5-CFDA)为底物,采用流式细胞术检测给予化痰降气方后细胞内荧光强度的变化评价MRP1功能;real time RT-PCR测定给予化痰降气方后MRP1 mRNA的变化。结果:化痰降气方在一定浓度范围内能促进16HBE14o-增殖;与5-CFDA模型组比较,低、中、高浓度(100、1 000、2 000μg/mL)的化痰降气方对MRP1功能分别提高22.59%、47.14%、68.36%;化痰降气方能浓度依赖性诱导16HBE14o-细胞MRP1 mRNA表达的量,中、高浓度诱导作用有显著性差异(P<0.05)。结论:化痰降气方能提高16HBE14o-MRP1外排功能和mRNA的含量,且呈一定的浓度依赖性。

痰热清对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1表达的影响

目的观察痰热清对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白(MRP)1 mRNA的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为COPD模型组、痰热清组和正常对照组,每组10只。除正常对照组,其余两组采用气管注脂多糖加熏香烟方法制备COPD模型,RT-PCR技术分析MRP1 mRNA基因表达。结果 COPD模型组和痰热清组大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达减少(P<0.01)。与模型组比较,痰热清组大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达增高(P<0.05)。结论痰热清注射液可能通过增高大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达而有效减轻COPD气道炎症,达到延缓COPD肺功能恶化和改善症状的效应。

多药耐药相关蛋白在阿霉素诱导人肝癌细胞SMMC-7721耐药性产生中的作用及机理

目的 动态观察阿霉素 (ADM )诱导肝癌细胞SMMC 772 1耐药性的产生 ,了解多药耐药相关蛋白 (MRP)在其耐药机理中的作用。方法 分别用逐步提高培养基中ADM的浓度诱导SMMC 772 1细胞和用含不同ADM浓度的培养基直接短期培养SMMC 772 1细胞的方法 ,诱导细胞产生耐药性 ,绘制剂量反应曲线 ,确定细胞耐药倍数 ,RT PCR法测定细胞MRPmRNA的表达水平 ,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素 (DNR)的浓度。结果 随着培养基中ADM浓度的逐步提高 ,MRPmRNA的表达也逐渐增强 ,细胞内DNR浓度明显下降 ,SMMC 772 1细胞的耐药性逐渐增加 ;用含不同ADM浓度的培养基直接培养亲代细胞后 ,虽然MRPmRNA表达明显升高 ,但细胞内DNR浓度仍维持较高水平 ,并且绝大部分细胞短期内死亡。结论 ADM可以逐步诱导肝癌细胞产生耐药性 ,其机理主要是由于MRP基因过度表达 ,其蛋白产物能明显降低细胞内化疗药物浓度 ,从而细胞获得耐药性。

酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能

目的:以酚红为多药耐药相关蛋白1(MRP1)的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法。方法:小鼠静脉注射酚红(250mg/kg),30min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒(150mg/kg)作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。结果:与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低。结论:肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。

愈痫灵方对难治性癫痫大鼠多药耐药相关蛋白MRP_1、P-gp、LAP、MCP-1表达的作用

目的探讨"愈痫灵"方对红藻氨酸(KA)致痫难治性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P糖蛋白(P-gp)、层黏连蛋白(LAP)以及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法 (1)造模:在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入KA1.0μL(即1.0μg)点燃发作,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d后,再次以亚惊厥剂量KA0.5μL复燃,筛选再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波放电者为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。(2)分组与处理:造模成功鼠随机分为愈痫灵方干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共5组,分别给予"愈痫灵"汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 m L/d)灌胃30 d。(3)标本处置与检测:采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1在海马与颞叶皮层的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区及颞叶皮质区MRP1、P-gp、LAP、MCP-1的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预处理后能显著降低模型鼠海马区MRP1、P-gp表达水平(P<0.05),海马区及颞叶皮质区LAP、MCP-1的表达差异均无统计学意义(P>0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区LAP、MCP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐药性癫痫大鼠模型海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达均明显升高,逆转与降低海马区MRP1、P-gp的表达可能是"愈痫灵"方抗耐药性癫痫作用机制之一。

多药耐药相关蛋白1 mRNA在慢性癫痫大鼠脑中的表达

目的难治性癫痫(refractory epilepsy,RE)的发生机制尚不明确。现已明确多药耐药相关蛋白(multidrugresistance associated protein,MRP)1与某些肿瘤耐药有关。为了探讨该蛋白是否与癫痫的多药耐药相关,本研究利用大鼠癫痫模型观察癫痫发作对大鼠脑MRP1 mRNA表达的影响及左乙拉西坦(Levetiracetam,LEV)和托吡酯(Topiramate,TPM)的作用。方法通过脑立体定向技术,将海人酸(kainic acid,KA)1.5μg(3μl)注射至SD大鼠海马,制作癫痫模型。对照组大鼠海马注射3μl等渗盐水。建立模型3 d后,将癫痫组和对照组大鼠各15只随机分为LEV、TPM和NS亚组分别给予LEV(50 mg/kg)、TPM(40 mg/kg)和等体积NS灌胃,1次/d,共30 d。用荧光定量RT-PCR测定大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达水平,并进行定量分析。结果各组癫痫大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达与相应非癫痫组相比呈增高趋势,但差异无统计学意义。非癫痫或癫痫大鼠各处理组间颞叶或海马MRP1 mRNA表达水平总体差异均无统计学意义。结论病程为1个月的慢性癫痫大鼠脑内MRP1 mRNA表达无明显增加,TPM、LEV不影响正常和癫痫大鼠脑MRP1 mRNA的表达。

慢性阻塞性肺病大鼠血浆白三烯C4水平、细胞免疫及支气管上皮多药耐药相关蛋白1 mRNA和蛋白水平的变化

目的观察慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠血浆白三烯(LT)C4、T淋巴细胞亚群和支气管上皮多药耐药相关蛋白(MRP)1 mRNA的表达。方法雄性Wistar大鼠20只随机分为正常对照组、模型组。模型组采用气管注脂多糖加熏香烟方法复制COPD模型,荧光免疫试剂检测法检测大鼠血浆LTC4,采用直接免疫荧光标记的流式细胞分析T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+和CD8^+细胞)比例,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析MRP1 mRNA基因表达。结果与正常对照组比,模型组血浆LTC4蛋白的含量显著升高(P<0.05),CD3^+有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4^+明显降低(P<0.001),CD8^+明显增高(P<0.05),MRP1 mRNA基因表达显著减少(P<0.05)。结论 LTC4很可能参与了COPD的支气管黏膜炎症、支气管平滑肌收缩和气道重构过程;T淋巴细胞的失衡提示COPD的细胞免疫功能降低,造成病情延绵难治;MRP1在COPD过程中起保护作用。

慢性阻塞性肺疾病与多药耐药相关蛋白1的相关性研究进展

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是肺部常见疾病,与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关,其中炎症反应和氧化应激等扮演着重要的角色。多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)是一种依赖于ATP介导底物跨膜转运蛋白。近年来研究表明,MRP1在肺部广泛表达,且有着特定的生物学功能,如介导外源性有毒物质的外排,内源性物质炎症介质LTC4及GSH等的跨膜转运,其生物学功能的改变在COPD的发生和发展过程中发挥着重要作用。通过了解MRP1在肺部疾病的功能,有利于进一步理解MRP1和COPD的关系,从而更好地指导COPD的治疗。

痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1水平的影响

目的观察痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1（MRP1）表达水平的影响，探讨痰热清治疗COPD的作用机制。方法选择雄性Wistar大鼠30只，按随机数字表法分为正常对照组、COPD模型组和痰热清治疗组，每组10只。采用气管内滴人脂多糖（LPS）加香烟烟熏方法复制COPD模型，正常对照组不予任何处理。制模后痰热清治疗组尾静脉注射痰热清注射液2mUkg，COPD模型组和正常对照组则注射0．9％氯化钠注射液2mUkg；各组均连续给药14d，然后观察大鼠体质量及呼吸功能，用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）测定肺组织MRP1蛋白表达，取肺组织观察大鼠肺组织病理学改变。结果治疗14d后3组大鼠体质量均较治疗前增加，但COPD模型组增加缓慢且低于痰热清治疗组（g：247．8±15．9比265．4±18．7，P〈0．05）。COPD模型组0．3s用力呼气容积占用力肺活量的比值（FEV0．3／FVC）较正常对照组明显降低（0．688±0．213比0．973±0．052），呼气峰流速[PEF（mUs）：3．28±0．74比4．58±1．48]、肺顺应性[Cydn（mL/cmH2O）：317．1±130．3比515．1±140．2]和MRP1蛋白水平[吸光度（A）值：0．698±0．103比1．318±0．169]均较正常对照组明显降低，残气容积／肺总量比值（RVffLC）较正常对照组明显升高（0．502±0．128比0．316±0．153）；痰热清治疗组FEV0．3／FVC（0．801±0．142比0．688±0．213）、PEF（mUs：4．24±0．36比3．28±0．74）、Cydn（421．2±342．0比317．1±130．3）、MRP1蛋白（A值：0．964±0．095比0．698±0．103]均较COPD模型组增高，RVffLC较COPD模型组降低（0．411±0．105比0．502±0．128），差异均有统计学意义（均P〈O．05）。光镜下可见：COPD模型组大鼠肺泡壁变薄、断裂，肺泡融合扩大，支气管黏膜大量上皮纤毛脱落、倒伏、粘连，杯状细胞增生，各级细支气管壁可见大量炎性细胞浸润，管腔内有炎性分泌物潴留；痰热清治疗组上述变化较COPD模型组有一定程度改善。结论痰热清注射液可能通过增加大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达起到有效减轻COPD气道炎症、延缓COPD肺功能恶化和改善症状的作用。

钾离子通道蛋白Kir2.1/KCNJ2及多药耐药蛋白MRP1/ABCC1在小细胞肺癌中的表达及相关性

目的:探讨内向整流钾通道2.1(Kir2.1/KCNJ2)及多药耐药相关蛋白1(MRP1/ABCC1)在小细胞肺癌(SCLC)中的表达情况及两者的相关性。方法:采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测小细胞肺癌多药耐药细胞株H69AR及敏感株H69细胞中Kir2.1/KCNJ2及MRP1/ABCC1 mRNA和蛋白的表达水平,采用免疫组化EnVision两步法检测44例SCLC组织中Kir2.1/KCNJ2和MRP1蛋白的表达水平;采用蛋白免疫共沉淀实验检测Kir2.1/KCNJ2与MRP1/ABCC1之间的相互作用。结果:H69AR细胞株中Kir2.1/KCNJ2及MRP1/ABCC1 mRNA和蛋白的表达均显著高于H69细胞株,二者均有显著差异(P<0.05);免疫组化结果表明SCLC组织中Kir2.1/KCNJ2和MRP1/ABCC1阳性表达率分别为47.7%(21/44)和52.3%(23/44),两者表达在SCLC中呈正相关(r=0.853,P<0.01);Kir2.1/KCNJ2与MRP/ABCC1在H69AR细胞内可形成复合物。结论:Kir2.1/KCNJ2与小细胞癌多药耐药有关。Kir2.1/KCNJ2和MRP1/ABCC1之间可能存在共同作用通路。Kir2.1/KCNJ2可能通过调控MRP1/ABCC1的表达促进SCLC多药耐药的发生。

多耐药基因1及多药耐药相关蛋白1在雷帕霉素靶蛋白相关性难治性癫痫病变中的表达与细胞分布

目的:探讨多耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)及多药耐药相关蛋白1(multidrug resi stance assoc iated protein 1,MR P1)在雷帕霉素靶蛋白相关性难治性癫痫病变中的表达与细胞分布特征及在耐药过程中发挥的作用。方法:选取39例雷帕霉素靶蛋白相关性难治性癫痫病变病例,包括9例局灶性脑皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)IIB型,15例结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)及15例节细胞胶质瘤(ganglioglioma,GG),按病变类型分组,将10例正常脑组织作为对照组,选用MDR1及MRP1两种免疫组织化学试剂,采用Max Vision法染色,观察在各组2种蛋白的表达与细胞分布特点。结果:MDR1及MRP1两种耐药蛋白在各疾病组相对于对照组均表达上调,并显示不同的细胞分布。MDR1主要表达于病灶区域内血管内皮细胞;MRP1主要表达于病灶区域内异常神经元,气球样细胞及巨细胞表达强弱不一。此外,2种蛋白在胶质细胞中均有中等或以上程度的表达,且MRP1更显著表达于血管周胶质细胞,表达强度及范围与病变中增生胶质细胞的数量相关。结论:MDR1及MRP1在雷帕霉素靶蛋白相关性难治性癫痫病变(FCD IIB,TSC及GG)中协同表达,可能在耐药机制中发挥作用,形态异常的神经元、过度增生的胶质细胞以及被破坏的血管内皮与癫痫耐药密切相关。

单分子力谱研究活细胞上多药耐药相关蛋白1的表达

采用原子力显微镜的单分子力谱(SMFM)技术研究了多药耐药相关蛋白1(MRP1)与其抗体间的相互作用,并考察了人舌癌细胞系TCA8113经高剂量平阳霉素(BLM)反复间歇诱导前后细胞表面MRP1的表达差异.实验结果表明,MRP1与其抗体之间存在特异性相互作用力,当针尖运动速率为2.5μm/s时,作用力大小约为(182±35)pN;而且药物诱导后MRP1在人舌癌细胞上的表达明显增强.本工作为了解活细胞水平上MRP1的表达提供了新方法,有助于肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的研究.

ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。

熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫大鼠大脑皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达的影响

目的:研究熄风胶囊单药及与卡马西平联合用药对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫大鼠反复自发性发作及多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein1,MRP1)表达的影响。方法:应用氯化锂-匹罗卡品诱导难治性癫大鼠模型。将造模成功的癫大鼠随机分为模型组、熄风胶囊高剂量组、熄风胶囊中剂量组、熄风胶囊低剂量组、熄风胶囊高剂量加卡马西平组(高剂量联合组)、熄风胶囊高剂量加卡马西平1/2剂量组(低剂量联合组)和卡马西平组,每组10只,并选择10只正常大鼠作为对照。治疗28d后,取大脑皮质和海马组织,采用免疫组织化学方法检测癫大鼠大脑皮质与海马MRP1的表达。结果:各治疗组大鼠海马MRP1的表达均高于正常对照组,表达范围较广泛,阳性颗粒颜色较深,同时又低于模型组;在大脑皮质区,高剂量联合组、低剂量联合组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);无论是在海马CA1、CA3区,齿状回及大脑皮质区,高剂量熄风胶囊对MRP1的分布的作用要优于低剂量熄风胶囊和中剂量熄风胶囊;与卡马西平联合用药时均优于低剂量熄风胶囊、中剂量熄风胶囊及卡马西平(P<0.05)。结论:熄风胶囊单药及与卡马西平联合用药能有效地抑制癫大鼠海马与皮质MRP1的过度表达。

铜转运蛋白1与结直肠癌化疗耐药的关系研究进展

结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤。虽然化疗、分子靶向治疗和免疫治疗显著提高了患者的生存期,但化疗耐药仍然是影响肿瘤治疗效果的关键因素,寻找肿瘤细胞对化疗的耐药靶点,进而提高化疗效果,成为亟待解决的关键性问题。铜转运蛋白1(CTR1)是细胞内稳态调节的关键之一,负责将铜离子泵入细胞,与肿瘤微环境以及多种信号通路密切相关,并对药物耐药性的产生有一定影响。深入研究CTR1在肿瘤发生发展以及耐药机制中的作用可能为提高肿瘤化疗效果、克服耐药性提供新的靶点。