多药耐药相关蛋白转运体在药物性肝损伤中的作用研究进展

肝脏是人体新陈代谢最旺盛的器官,也是体内多种药物的解毒器官。当长期或过量使用药物时会增加药物性肝损伤(DILI)的风险。多药耐药相关蛋白(MRPs)是位于细胞膜上的功能蛋白,可转运多种药物,在DILI中发挥重要作用。MRPs功能的抑制、缺失是药物肝毒性产生的重要原因。本文对MRPs的结构、表达部位及功能进行归纳,并对MRPs与DILI的关系及其改善DILI的机制进行总结,期望更好地了解MRPs转运体与DILI的关系,为后续防治DILI提供参考。

铜转运蛋白1与结直肠癌化疗耐药的关系研究进展

结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤。虽然化疗、分子靶向治疗和免疫治疗显著提高了患者的生存期,但化疗耐药仍然是影响肿瘤治疗效果的关键因素,寻找肿瘤细胞对化疗的耐药靶点,进而提高化疗效果,成为亟待解决的关键性问题。铜转运蛋白1(CTR1)是细胞内稳态调节的关键之一,负责将铜离子泵入细胞,与肿瘤微环境以及多种信号通路密切相关,并对药物耐药性的产生有一定影响。深入研究CTR1在肿瘤发生发展以及耐药机制中的作用可能为提高肿瘤化疗效果、克服耐药性提供新的靶点。

愈痫灵方对难治性癫痫大鼠多药耐药相关蛋白MRP_1、P-gp、LAP、MCP-1表达的作用

目的探讨"愈痫灵"方对红藻氨酸(KA)致痫难治性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P糖蛋白(P-gp)、层黏连蛋白(LAP)以及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法 (1)造模:在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入KA1.0μL(即1.0μg)点燃发作,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d后,再次以亚惊厥剂量KA0.5μL复燃,筛选再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波放电者为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。(2)分组与处理:造模成功鼠随机分为愈痫灵方干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共5组,分别给予"愈痫灵"汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 m L/d)灌胃30 d。(3)标本处置与检测:采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1在海马与颞叶皮层的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区及颞叶皮质区MRP1、P-gp、LAP、MCP-1的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预处理后能显著降低模型鼠海马区MRP1、P-gp表达水平(P<0.05),海马区及颞叶皮质区LAP、MCP-1的表达差异均无统计学意义(P>0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区LAP、MCP-1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐药性癫痫大鼠模型海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达均明显升高,逆转与降低海马区MRP1、P-gp的表达可能是"愈痫灵"方抗耐药性癫痫作用机制之一。

钾离子通道蛋白Kir2.1/KCNJ2及多药耐药蛋白MRP1/ABCC1在小细胞肺癌中的表达及相关性

目的:探讨内向整流钾通道2.1(Kir2.1/KCNJ2)及多药耐药相关蛋白1(MRP1/ABCC1)在小细胞肺癌(SCLC)中的表达情况及两者的相关性。方法:采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测小细胞肺癌多药耐药细胞株H69AR及敏感株H69细胞中Kir2.1/KCNJ2及MRP1/ABCC1 mRNA和蛋白的表达水平,采用免疫组化EnVision两步法检测44例SCLC组织中Kir2.1/KCNJ2和MRP1蛋白的表达水平;采用蛋白免疫共沉淀实验检测Kir2.1/KCNJ2与MRP1/ABCC1之间的相互作用。结果:H69AR细胞株中Kir2.1/KCNJ2及MRP1/ABCC1 mRNA和蛋白的表达均显著高于H69细胞株,二者均有显著差异(P<0.05);免疫组化结果表明SCLC组织中Kir2.1/KCNJ2和MRP1/ABCC1阳性表达率分别为47.7%(21/44)和52.3%(23/44),两者表达在SCLC中呈正相关(r=0.853,P<0.01);Kir2.1/KCNJ2与MRP/ABCC1在H69AR细胞内可形成复合物。结论:Kir2.1/KCNJ2与小细胞癌多药耐药有关。Kir2.1/KCNJ2和MRP1/ABCC1之间可能存在共同作用通路。Kir2.1/KCNJ2可能通过调控MRP1/ABCC1的表达促进SCLC多药耐药的发生。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白(MRP1)的表达抑制作用(英文)

为了研究多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白表达抑制的作用,我们构建了含有20个可以自身切割的顺式作用核酶和10个靶向MRP1基因特定位点的反式作用核酶的多核酶表达系统。利用RT-PCR、Western blot和MTT分析了多核酶系统分别与MRP1靶基因质粒和MRP1全长基因质粒共转染的HEK293细胞。结果显示,多核酶表达系统能够明显降低荧光融合蛋白在HEK293细胞中的表达。RT-PCR分析表明,MRP1靶mRNA降低程度与多核酶表达系统所含的反式作用核酶数目有关。Western blot分析显示了与RT-PCR相似的结果。MTT分析表明,多核酶表达系统能够逆转由MRP1基因转染HEK293细胞产生的多药耐药性。结果提示,含有多个核酶的表达系统对MRP1基因的抑制效应优于单核酶的表达系统。因此,该策略可能用于基因治疗肿瘤或其他疾病。

鱼类产品中嗜水气单胞菌重组酶聚合酶扩增结合CRISPR/Cas12a快速检测及耐药性分析

目的建立重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)结合簇状规则间隔短链重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-associated protein,CRISPR-Cas)新方法,检测鱼类产品中嗜水气单胞菌,并分析其耐药性。方法采用基于最新的CRISPR基因编辑技术建立RPA结合CRISPR/Cas12a新方法,快速检测嗜水气单胞菌,同时采用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法比对两种方法的检出率。筛查嗜水气单胞菌分离株的耐药性,采用纸片扩散法测定耐药表型,采用荧光染料(SYBR green,SYBG)实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)测定耐药基因,分析耐药表型与耐药基因结果的一致性。结果在74例鱼类样品中,基于RPA-CRISPR/Cas12a和LAMP同时检测出6例嗜水气单胞菌。分析耐药性测试结果发现,分离株对5大类10种抗生素的耐药情况差异较大,耐药表型与耐药基因结果一致性较高。结论所建立的RPA-CRISPR/Cas12a方法适用于嗜水气单胞菌快速检测。而细菌耐药性的产生机制比较复杂,耐药表型的产生在一定程度上受耐药基因调控。研究结果为水产品中嗜水气单胞菌快速检测和耐药性筛查提供新思路和方法。

化痰降气胶囊对COPD模型大鼠支气管上皮细胞中多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响

目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,观察化痰降气胶囊对支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1(MRP1)功能和表达的影响,探讨化痰降气胶囊治疗COPD的作用机制。方法雄性Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和化痰降气胶囊组(简称化痰降气组)。除正常对照组外,其余各组采用烟、二氧化硫定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法,建立COPD大鼠模型;观察化痰降气胶囊治疗后肺功能指标、支气管肺泡灌洗液细胞计数与分类、大鼠的肺组织病理学改变,并采用ELISA方法测定肺组织中白三烯C4(LTC4)的浓度及免疫组化测定肺支气管上皮MRP1的表达。结果 (1)模型组大鼠的肺顺应性(CL)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3%)/用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值、最大呼气中段流量较正常对照组显著降低(P<0.05)。化痰降气组上述肺功能指标较模型组明显升高(P<0.05)。(2)模型组气道炎症加重,且出现明显肺气肿;化痰降气组也出现了炎症和肺气肿,但程度较轻。(3)与正常对照组比较,模型组及化痰降气组肺组织中的LTC4均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组中肺组织的LTC4显著下降(P<0.05)。(4)与正常对照组比较,模型组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著增强(P<0.05)。结论化痰降气胶囊可能通过影响慢性阻塞性肺疾病状态下MRP1功能和表达,从而达到有效减轻COPD大鼠的气道炎症,延缓肺功能恶化等COPD发生和发展的目的。

耐药相关基因MDR1、MRP、LRP及其表达产物P-gp、MRP、LRP在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的:研究探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织和癌旁组织中多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,MDR1)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related proteins,MRP)、肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)mRNA及其相应蛋白P-gp、MRP、LRP的表达情况及临床意义。方法:运用聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学法(IHC)检测43例NSCLC组织及癌旁组织标本中耐药基因MDR1、MRP、LRPmRNA及其蛋白P-gp、MRP、LRP的表达水平。结果:MDR1、MRP和LRP mRNA3种基因在43例肿瘤组织中的表达率分别为79.06%(34/43)、65.17%(28/43)和86.05%(37/43),癌旁组织中的表达率分别为20.00%(3/15)、13.33%(2/15)和13.33%(2/15);P-gp、MRP和LRP3种耐药蛋白在肺癌组织中的表达率分别为74.42%(32/43)、67.44%(29/43)和88.37%(38/43),癌旁组织中的表达率分别为13.33%(2/15)、20.00%(3/15)和6.67%(1/15),上述3种基因及其蛋白在肺癌组织与癌旁组织的表达差异有显著性(P<0.05)。肺癌组织中既存在耐药基因MDR1、MRP和LRP的共表达,也存在耐药蛋白P-gp、MRP和LRP的共表达,3种基因与其相应蛋白表达密切相关。肺腺癌组织中MDR1及其蛋白P-gp、LRPmRNA表达率较高,与其它病理类型相比差异有显著性(P<0.05),MRPmRNA及其蛋白MRP表达与肺癌病理类型、临床分期和组织学分级无关(P>0.05)。结论:NSCLC存在着广泛的原发性多药耐药现象,耐药基因MDR1、MRP和LRPmRNA及其相应蛋白参与了肺癌多药耐药的形成,检测多药耐药基因可为指导临床用药提供一定的理论依据及策略。

单分子力谱研究活细胞上多药耐药相关蛋白1的表达

采用原子力显微镜的单分子力谱(SMFM)技术研究了多药耐药相关蛋白1(MRP1)与其抗体间的相互作用,并考察了人舌癌细胞系TCA8113经高剂量平阳霉素(BLM)反复间歇诱导前后细胞表面MRP1的表达差异.实验结果表明,MRP1与其抗体之间存在特异性相互作用力,当针尖运动速率为2.5μm/s时,作用力大小约为(182±35)pN;而且药物诱导后MRP1在人舌癌细胞上的表达明显增强.本工作为了解活细胞水平上MRP1的表达提供了新方法,有助于肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的研究.

Yap1相关的化疗耐药机制研究进展

随着化疗的推进,部分患者逐渐出现耐药现象,从而导致治疗中止或失败,因此逆转耐药已经成为肿瘤临床治疗中亟待解决的问题。Yes相关蛋白1(Yap1)在肿瘤发生、发展中发挥关键作用,下调Yap1表达能提高耐药后肿瘤的药物敏感性,减少或延缓耐药事件发生。Yap1主要通过增强肿瘤干细胞表型、促进上皮-间充质转化、抑制自噬、调节肿瘤微环境及基因表达来促进耐药的发生;通过Yap1抑制剂、自噬激活剂及其他相关因子调控剂联合应用能够在临床中延缓患者生存期,同时也可将Yap1作为预后、治疗监测指标辅助临床决策。

熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1表达影响的研究

[目的]研究熄风胶囊对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠皮质和海马多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响。[方法]1)利用氯化锂-匹罗卡品制作癫痫大鼠模型。2)实验大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊大剂量+卡马西平(CBZ)组(联高组)、熄风胶囊大剂量+CBZ1/2剂量(联低组)和CBZ组。3)通过Western-blot方法检测癫痫大鼠海马和皮质MRP1的表达程度。[结果]实验结果显示治疗组与模型组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]熄风胶囊能有效抑制MRP1的过度表达。

实时荧光定量PCR检测肝癌细胞多药耐药相关蛋白MRP2、MRP3及MRP5 mRNA的表达

目的研究多药耐药相关蛋白2(MRP2)基因及MRP3、MRP5基因在正常肝脏细胞系L-02、肝癌细胞系BEL及肝癌耐药细胞系BEL/ADM的表达差异,并探讨其在肝癌耐药中的意义。方法分别提取L-02、BEL及BEL/ADM细胞的总RNA,利用实时荧光定量PCR法检测MRP2、MRP3、MRP5基因的表达水平。结果MRP2基因在BEL/ADM细胞中的表达量明显高于在L-02、BEL细胞中的表达(P=0.000),而其在L-02、BEL两种细胞中的表达没有显著性差异(P=0.468);MRP3、MRP5基因表达量在L-02、BEL、BEL/ADM三种细胞中均有显著性差异(P=0.000)。结论MRP2可能参与了肝癌的内在性耐药,而MRP3、MRP5可能与肝癌的获得性耐药有关。

多药耐药相关蛋白1在骨肉瘤中的表达

目的 探讨骨肉瘤组织中多药耐药相关蛋白 1(MRP1)的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测 6例正常成年骨组织和 4 5例骨肉瘤组织中 MRP1,结合临床病理指标进行分析。结果6例正常骨组织中 MRP1的表达均为阴性。 4 5例骨肉瘤中 MRP1阳性 32例 (71.11% ) ,其中高分化骨肉瘤阳性率2 8.5 7% (2 / 7) ,中、低分化骨肉瘤阳性率 78.95 % (30 / 38) ,两组间差异有显著性 (P<0 .0 5 )。且随着骨肉瘤分化程度的降低 ,MRP1表达率升高 ,MRP1的表达与骨肉瘤的恶性程度呈正相关 (r=0 .84 4 )。根据肿瘤大小、Enneking外科分期、血清碱性磷酸酶 (AL P)含量、患者性别、年龄及就诊前病程长短等分组 ,MRP1表达无统计学意义。结论正常成年骨组织中 MRP1表达阴性。骨肉瘤组织中有 MRP1的表达 ,MRP1的表达与骨肉瘤的恶性程度呈正相关 ,提示 MRP1可能为骨肉瘤原发耐药的重要原因之一。

化痰降气方对人支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1的影响

目的:研究化痰降气方对人支气管上皮细胞上多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响。方法:体外培养人支气管上皮细胞16HBE14o-,以5-羧基二乙酸荧光素(5-CFDA)为底物,采用流式细胞术检测给予化痰降气方后细胞内荧光强度的变化评价MRP1功能;real time RT-PCR测定给予化痰降气方后MRP1 mRNA的变化。结果:化痰降气方在一定浓度范围内能促进16HBE14o-增殖;与5-CFDA模型组比较,低、中、高浓度(100、1 000、2 000μg/mL)的化痰降气方对MRP1功能分别提高22.59%、47.14%、68.36%;化痰降气方能浓度依赖性诱导16HBE14o-细胞MRP1 mRNA表达的量,中、高浓度诱导作用有显著性差异(P<0.05)。结论:化痰降气方能提高16HBE14o-MRP1外排功能和mRNA的含量,且呈一定的浓度依赖性。

多药耐药相关蛋白在阿霉素诱导人肝癌细胞SMMC-7721耐药性产生中的作用及机理

目的 动态观察阿霉素 (ADM )诱导肝癌细胞SMMC 772 1耐药性的产生 ,了解多药耐药相关蛋白 (MRP)在其耐药机理中的作用。方法 分别用逐步提高培养基中ADM的浓度诱导SMMC 772 1细胞和用含不同ADM浓度的培养基直接短期培养SMMC 772 1细胞的方法 ,诱导细胞产生耐药性 ,绘制剂量反应曲线 ,确定细胞耐药倍数 ,RT PCR法测定细胞MRPmRNA的表达水平 ,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素 (DNR)的浓度。结果 随着培养基中ADM浓度的逐步提高 ,MRPmRNA的表达也逐渐增强 ,细胞内DNR浓度明显下降 ,SMMC 772 1细胞的耐药性逐渐增加 ;用含不同ADM浓度的培养基直接培养亲代细胞后 ,虽然MRPmRNA表达明显升高 ,但细胞内DNR浓度仍维持较高水平 ,并且绝大部分细胞短期内死亡。结论 ADM可以逐步诱导肝癌细胞产生耐药性 ,其机理主要是由于MRP基因过度表达 ,其蛋白产物能明显降低细胞内化疗药物浓度 ,从而细胞获得耐药性。

酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能

目的:以酚红为多药耐药相关蛋白1(MRP1)的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法。方法:小鼠静脉注射酚红(250mg/kg),30min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒(150mg/kg)作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。结果:与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低。结论:肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。

痰热清对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白1表达的影响

目的观察痰热清对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管上皮多药耐药相关蛋白(MRP)1 mRNA的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为COPD模型组、痰热清组和正常对照组,每组10只。除正常对照组,其余两组采用气管注脂多糖加熏香烟方法制备COPD模型,RT-PCR技术分析MRP1 mRNA基因表达。结果 COPD模型组和痰热清组大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达减少(P<0.01)。与模型组比较,痰热清组大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达增高(P<0.05)。结论痰热清注射液可能通过增高大鼠支气管上皮细胞中MRP1的表达而有效减轻COPD气道炎症,达到延缓COPD肺功能恶化和改善症状的效应。

多药耐药相关蛋白1 mRNA在慢性癫痫大鼠脑中的表达

目的难治性癫痫(refractory epilepsy,RE)的发生机制尚不明确。现已明确多药耐药相关蛋白(multidrugresistance associated protein,MRP)1与某些肿瘤耐药有关。为了探讨该蛋白是否与癫痫的多药耐药相关,本研究利用大鼠癫痫模型观察癫痫发作对大鼠脑MRP1 mRNA表达的影响及左乙拉西坦(Levetiracetam,LEV)和托吡酯(Topiramate,TPM)的作用。方法通过脑立体定向技术,将海人酸(kainic acid,KA)1.5μg(3μl)注射至SD大鼠海马,制作癫痫模型。对照组大鼠海马注射3μl等渗盐水。建立模型3 d后,将癫痫组和对照组大鼠各15只随机分为LEV、TPM和NS亚组分别给予LEV(50 mg/kg)、TPM(40 mg/kg)和等体积NS灌胃,1次/d,共30 d。用荧光定量RT-PCR测定大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达水平,并进行定量分析。结果各组癫痫大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达与相应非癫痫组相比呈增高趋势,但差异无统计学意义。非癫痫或癫痫大鼠各处理组间颞叶或海马MRP1 mRNA表达水平总体差异均无统计学意义。结论病程为1个月的慢性癫痫大鼠脑内MRP1 mRNA表达无明显增加,TPM、LEV不影响正常和癫痫大鼠脑MRP1 mRNA的表达。

慢性阻塞性肺病大鼠血浆白三烯C4水平、细胞免疫及支气管上皮多药耐药相关蛋白1 mRNA和蛋白水平的变化

目的观察慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠血浆白三烯(LT)C4、T淋巴细胞亚群和支气管上皮多药耐药相关蛋白(MRP)1 mRNA的表达。方法雄性Wistar大鼠20只随机分为正常对照组、模型组。模型组采用气管注脂多糖加熏香烟方法复制COPD模型,荧光免疫试剂检测法检测大鼠血浆LTC4,采用直接免疫荧光标记的流式细胞分析T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+和CD8^+细胞)比例,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析MRP1 mRNA基因表达。结果与正常对照组比,模型组血浆LTC4蛋白的含量显著升高(P<0.05),CD3^+有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4^+明显降低(P<0.001),CD8^+明显增高(P<0.05),MRP1 mRNA基因表达显著减少(P<0.05)。结论 LTC4很可能参与了COPD的支气管黏膜炎症、支气管平滑肌收缩和气道重构过程;T淋巴细胞的失衡提示COPD的细胞免疫功能降低,造成病情延绵难治;MRP1在COPD过程中起保护作用。